实验室管理制度
1. 食品毒理学实验室操作规范 GB 15193.2-1994
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整理前九页，由于自己专业限制，可能分类不尽完全正确，但希望能对大家有所帮助！
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名称：仪器设备管理制度
关键词：仪器设备,管理制度
目的：加强仪器设备的技术管理，做好维护保养工作,确保实验教学需求。
主体内容：1、实验室的仪器设备由主任指定专人保管，并按仪器设备的不同类别和档次分别建卡入帐。专管人员要将固定资产帐、卡在每年的五至六月份与实验管理科核对一次，做到帐、物、卡相符。确保实验教学需求。
2、加强仪器设备的技术管理，做好维护保养工作。万元以上仪器技术资料要齐全包括：操作规程、说明书、装箱单、产品合格证、使用及维修记录等；并定期对其主要性能指标进行校验和标定，使其处于完好状态，提高仪器完好率及使用率。
3、实验教学过程中教师损坏仪器设备统一登记，由实验室负责维修，毕业论文教学中损坏仪器由指导教师修好后归还实验室。
4、加强对学生使用的仪器设备的安全教育，尽量减少教学中仪器设备的损坏及丢失。如有损坏或丢失则按《仪器设备丢失损坏赔偿制度》处置。
5、使用与借用原则：
1)实验室仪器设备仅供教学、科研之用，一般不外借，任何人不得以个人名义外借。
2)特殊情况下，经实验室主任同意后可以外借，借期不超半年（以不影响实验教学为准），严格执行登记手续，过期由借出者负责要回。
3)五千元以上仪器一律不外借，但经实验室主任批准后，可在专管人员指导下在本实验室使用并登记。
4)本实验室仪器设备因特殊情况需要外借并携出院外时，必须经实验管理科同意。
5)如教师科研、创收需用仪器设备，经实验室同意后可使用，实行登记手续，并视创收情况对实验室进行一定的补偿，其款用于贴补学生实验低值易耗品。
6、仪器设备的报废、报损及拆改的条件及审批
1)使用年久或其它某种原因致使主要部件已经损坏或遗失无法使用且无法修复者（报废）。
2)上级主管部门文件规定属于淘汰或禁用的产品（报废）。
3)修复费用超过或者接近原值者（报废）
4)由于意外的事故受到严重破坏不能修复者（报损）。
5)虽可使用，但因工作需要，须永久拆散改作它用而变更原形者（拆改）。
6)由实验室专管人提出《报废、报损申请表》，按价值不同呈报有关部门审批及鉴定，最后将鉴定表送交实验管理科及财务，调整帐面（审批）。拆改也依此类推办理。
7、鼓励改进和自制仪器设备，若对实验教学和科研工作有明显效果，使用一年后经本实验室和上级有关部门进行鉴定和审查，应给予表扬或奖励。
原创：常温高速离心机的标准操作程序（SOP）
名称：型号TGL-16G型离心机使用、维护保养、检修操作规程
关键词：TGL-16G常温高速离心机；使用、保养、检修
目的：确保常温高速离心机运行的准确性、安全性。
常温高速离心机的标准操作程序（SOP）
1. 目的：确保常温高速离心机运行的准确性、安全性。
2. 适用范围：型号TGL-16G
3. 该SOP变动程序：
本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出，并经下述人员签字：科学技术部经理、科学技术部实验室主管。
4. 操作方法：
(1)离心机应放置于稳定、平坦及坚固的桌面，无阳光直接照射处，且勿随意挪动
(2)外接电源电压匹配，并有良好的接地线
(3)不要放置任何物品于塑料盖门上
(4)经常检查转头及实验用的离心管是否有裂纹、老化等现象，如有应及时更换
(5)样品必须对称放置、平衡，并在开机前确保已拧紧螺母
在离心机未停稳的情况下不得打开盖门
(7)使用完毕后，关闭电源，将仪器擦试干净，以防腐蚀，保持离心机内的清洁与干燥
再发一个哈，这个食品分析和药品分析都可能用到！
名称：常量、半微量氮测定法 标准操作规程(SOP)
关键词：常量定氮 半微量定氮 氮测定法 SOP
目的：适用于食品、多肽类物质、核酸等氮含量的分析测定。
主体内容：
1设备和供应：
1.1 常量定氮仪
1.2 半微量定氮仪
1.3 天平
1.4 电炉
1.5 乳胶管
2.试剂：
2.1硫酸液
2.2硫酸铜
5.3硫酸钾
3操作程序：
3.1配液：
3.1.1 滴定液的配制和标定应符合2000年版中国药典二部附录规定。硫酸液（0.005mol/L）用硫酸液(0.05mol/L)定量稀释制成。
3.1.2 试液、指示液的配制均应符合2000年版中国药典二部附录规定。
3.1.3硫酸铜用作消化催化剂；硫酸钾用以提高硫酸的沸点，也可将硫酸钾与硫酸铜按10：1比例混合研匀使用。
3.2操作步骤：
3.2.1 第一法（常量法）：
3.2.1 称样：取供试品适量（约相当于含氮量25-30mg），精密称定，供试品如为固体或半固体，可用滤纸称取，并连同滤纸置干燥的500ml凯氏烧瓶中。
3.2.2 消化：在烧瓶中依次加入硫酸钾（或无水硫酸钠）10g和硫酸铜粉末0.5g，再沿瓶壁缓缓加硫酸20ml；在凯氏烧瓶口放一小漏斗并使烧瓶成450斜置，用直火缓缓加热，使溶液的温度保持在沸点以下，等泡沸停止，强热至沸腾，俟溶液成澄明的绿色后，除另有规定外，继续加热30分钟，放冷。
3.2.3 蒸馏：沿瓶壁缓缓加水250ml，振摇使混合，放冷后，加40%氢氧化钠溶液75ml，注意使沿瓶壁流至瓶底，自成一液层，加锌粒数粒，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接；另取2%硼酸溶液50ml，置500ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴；将冷凝管的下端插入硼酸溶液的液面下，轻轻摆动凯氏烧瓶，使溶液混合均匀，加热蒸馏，至接受液的总体积约为250ml时，
将冷凝管尖端提出液面，使蒸气冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏。
3.2.4 滴定：馏出液用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色,并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的硫酸滴定液（0.05mol/L）相当于1.401mg的N。
3.3 第二法（半微量法）：
3.3.1 称样：取供试品适量（约相当于含氮量1.0-2.0mg），精密称定，置干燥的30-50ml凯氏烧瓶中。
3.3.2 消化：在烧瓶中加硫酸钾0.3g与30%硫酸铜溶液5滴，再沿瓶壁用吸管滴加硫酸2.0ml，并加玻璃珠1-2粒，在凯氏烧瓶口放一小漏斗，并使烧瓶成45°斜置，用小火缓缓加热使消化液保持在沸点以下，并使小火保持在液面下，等泡沸停止，溶液由黑色变为棕黄色时，强热至沸，俟溶液成澄明绿色后，除另有规定外，继续加热10分钟，放冷，加水2ml，放冷。
3.3.3 蒸馏：按95版药典附录图（氮的测定法）连接蒸馏装置，A瓶中加水适量与甲基红指示液数滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石数粒。将连有氮气的蒸馏器和直形冷凝管用水加热蒸气淋洗，并使水自冷凝管尖端反冲洗涤2-3次，从加样品口淋洗1次，洗涤液排出蒸馏管。取2%硼酸溶液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液5滴，将冷凝管尖端浸入液面下；将凯氏烧瓶中已消化的内容物经漏斗移入连有氮气球的蒸馏器中，用水少量淋洗凯氏烧瓶及漏斗2-3次，每次约3-5ml，再加入40%氢氧化钠溶液10ml，用少量水洗涤漏斗1次，关闭漏斗（加少量水封闭出口），进行蒸馏（蒸馏时不宜泡沸过高，以免溅至氮气球），至硼酸液由酒红色变为蓝色起，继续蒸馏约10分钟，将100ml锥形瓶下移至冷凝管尖端提出液面，使蒸气继续冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏。
3.3.4 滴定：馏出液用硫酸液（0.005mol/L）滴定至溶液由蓝色变为灰红色，并将滴定的结果用空白试验（空白馏出液的容积与供试品所得馏出液的容积基本相等）校正。每1ml的硫酸液（0.005mol/L）相当于0.1401mg的N。
3.4 记录：应记录天平型号及室温和相对湿度，供试品与试药的名称、规格及取用量，滴定液的名称（可用盐酸液）、F值及消耗量(ml)。
3.5 计算： T·F（Vs-V0）
含氮量%= ------------------------------ ×100%
W
式中 T为滴定度（mg/ml）；
Vs与V0分别为供试品与空白滴定时硫酸滴定液消耗的体积(ml)；
F为滴定液的F值；
W为供试品的重量。
供试品平行测定两份，相对偏差不得过0.5%，空白2份，极差不得大于0.05ml。
4.附录：检验依据：2005年版《中国药典》二部附录
原创：高压气体基因枪的标准操作程序（SOP）
名称：Gj-1000高压气体基因枪操作规程
关键词：Gj-1000高压气体基因枪
目的：Gj-1000高压气体基因枪的正确使用
酵母基因枪转化
一 钨粉的制备
1. 60mg（w）放在离心管中加入无水乙醇，用超声波粉碎机至手感温度发烫；
2. 1000r/min离心10s，去掉上清液；
3. 加1ml无水乙醇，漩涡振荡3~5分钟；
4. 静止1分钟；
5. 1000r/min离心10s，去掉上清液；
6. 加1ml消毒蒸馏水，旋涡振荡，离心沉淀，弃掉上清液；
7. 重复（6）三次；
8. 在沉淀的金粉或钨粉中加入50%甘油，浓度为60mg（钨粉）/ml。
二 DNA子弹的制作
1. 振荡50%甘油中的钨粉，使之成为悬浮液；
2. 取50µl的悬浮液于离心管中（此管可以打6枪，根据实验样品的多少与分成几个小管）；
3. 取一个小管在液体上的壁处用加样器加入5~10µl的质粒DNA（浓度为1µg/µl），振荡30s，再在小管壁上加入20µl亚精胺（0.1M），振荡30s。边振荡便加入50µlCaCl2溶液（2.5M），漩涡振荡30s~1min，之后静置1min，重复（漩涡振荡30s~1min，之后静置1min）5次左右，冰上静止30min，15000r/min离心10s,弃掉上清液；
4. 加入150µl70%的乙醇，吹打一下沉淀，若沉淀均匀散开，则离心（3000r/min 10s），弃掉上清液，加入无水乙醇，进入第（5）步操作。若吹打不散，则用超声波振散，条件为，加70%的乙醇600µl，功率200W，超声波作用1s，4~6次，然后离心，弃掉上清液；
5. 加入250µl无水乙醇，不破坏沉淀，静置1min，离心（1000r/min 10s）弃掉上清液；
6. 加入大于60µl无水乙醇振荡使成为悬浮液，如悬浮良好，可将此悬浮液用加样器取10µl分别滴在钢膜上，共可加样在6片钢膜上。这样平均每片钢膜为：0.5mg钨粉，0.8µgDNA（以5µl质粒DNA计，质粒多一些效果会好一点）。
三 实验前的准备
1. 75%的已醇对枪室，样品圆筒室及气体加速管包括封口螺母进行消毒灭菌；
2. 将可破裂圆膜在100%乙醇中浸泡15min消毒，然后再无菌条件下干燥：钢膜则在121℃高温消毒20min后烘干（也可用75%乙醇消毒）；
3. 清洁高压管道，在新装基因枪或重新移动位置时，连接高压气体钢瓶与压力调节阀、表系统的的高压管道的一端接口，另一端先不与基因枪的接口相连，握住此端朝向地面，使钢瓶放气（小流量）冲洗此管1~2s，再连接到基因枪上；
4. 消毒操作工具。
四 操作步骤
1. 打开气体瓶阀，调节压力使发射压力达到试验工作要求的范围；
2. 开动真空泵；
3. 选择所需压力的爆破膜（100MP），将它放在钢膜螺母的内圆孔的台肩上，将钢膜螺母旋在储气仓螺口上，用球形扳手将螺母旋紧 ，确保不漏气；
4. 将涂有DNA微粒的钢膜的放在钢膜架上，等干后用镊子夹起放在弹膜架的圆孔中（带有微粒的一面朝下），旋紧钢膜封口螺母；
5. 用镊子将涂有待转化酵母的YPD平板放入基因枪样品架上，此样品架可在样品室内选择合适的位置（4.5cm）；
6. 将已装上DNA的弹膜座装在已装好样品的样品室，安装方法：将手柄往下移并旋转至卡住，这样发射腔筒下平面与升降座上平面之间扩大了空间，可将将样品室与弹膜座放在升降底座上，当手柄放开后，样品室上升，是三件体结合在一起，件与件之间都有密封圈密封；
7. 按下真空开关，真空泵开始工作，真空表指示针指示真空下降，当真空度达到0.085~0095Mpa时，即可按高压触发按钮向储气仓内充气，（若真空抽不上，可能三件体没有合上，可移动一下三件体），同时观察高压气体监测表的的压力值。在达到爆破膜的爆破压力时，瞬间产生一个气体冲击波轰击钢膜，同时钢膜表面的微弹（包覆DNA微粒）通过垫网继续高速飞行射入靶细胞；
8. 关闭真空按钮，按下真空释放钮，使系统卸荷并将样品取出。这样一次基因导入试验完毕；
9. 按下手柄，取出样品室与弹膜座，从样品室的样品皿座上取出样品皿，盖上盖子，编号记录实验内容及条件；
10. 从弹膜座圆孔穴中取出钢膜，接着拧下封口螺母，从圆孔台肩上取出已穿孔的爆破膜；
11. 从步骤3开始重复操作，完成所有的样品处理；
12. 关机：枪用完后应关闭氦气瓶阀，并在真空泵仍处在工作状态，按下高压触发开关是氦气压解除。关闭电源总开关。从插座上拔下电源线插头；
13. 实验完毕后进行整理清洁工作。一般用75%的乙醇清洗[9]。
原创：本人实验室的制度
名称：细胞培养室管理规定
关键词：操作规范
目的：尽可能做到细胞培养室操作规范，减少污染
主要内容：细胞培养室管理规定
1．本细胞培养室是进行各种细胞培养的净化级实验室，所有进入实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度，按培养室管理规定操作。
2． 实验人员进入该实验室进行实验工作时，必须更换、穿戴好工作服、鞋、帽、口罩。有关细胞培养的操作均在超净台上进行，严格按无菌程序操作。
3．实验人员在进行实验前必须熟悉实验内容、操作步骤及各类仪器的性能和操作方法，严格执行操作规程，并做好必要的安全防护。
4．严禁将与实验无关的易燃、易爆及其他有毒有害物品带入实验室；在本实验室内不得进行微生物等其它易污染物的培养。
5．严禁在实验室内吸烟和吃食物；与实验无关人员不得进入实验室。
6．实验室中的昂贵设备，未经许可，不得擅自开关。精密仪器必须经过专门培训方能上机操作，并严格遵守操作规程。
7．实验人员必须按规定的主要仪器参数进行操作，未经许可，不得随意更改有关仪器设备的技术参数，仪器设备出现故障或发生事故，应立即报告。
8．操作完成后，用1：1000的新洁尔敏溶液或75％酒精擦台面。出门前注意关闭酒精灯、照明灯，超净台。
9. 实验室的安全门是用来搬动大型仪器和处置紧急情况的通道，非紧急情况不得随意开启安全门；如发生火警、气体泄漏、漏电等紧急情况，室内人员应迅速通过安全门离开实验室。
10. 实验室开启、关闭程序：
开启程序：用洗手液清洁双手，将要带入实验室的物品必须经过高压，依次打开照明灯开关、风机开关、超净台、紫外灯开关，30分钟后，更换衣服、拖鞋后方可通过缓冲室进入培养室，关闭紫外灯开关，。
关闭程序：实验结束后清洁和整理实验室，确认实验仪器设备处理无误，并将带出的废物 ，依次关闭超净台开关、风机开关和照明灯开关，人员通过缓冲室出实验室，务请随手关门；不得随意关闭其它开关，锁闭实验室门。
原创
794标准型自动电位滴定仪操作规程
关键词（必填项目）：自动电位滴定仪
目的（必填项目）：正确使用794标准型自动电位滴定仪，确保结果的准确
背景知识（选填项目）：无
主体内容（操作步骤，必填项目）：
参数的设定
一、titration parameters 滴定参数
二、stop conditions 滴定结束时的条件
三、statistics calculation 统计学计算
四、evaluation 等当点的求值
五、preselections 滴定次序的预选择
titration parameters
• Meas.pt.density 为采集数据的速度，可设范围0-9。如果设定为0，在滴定过程中电极得到的读数最多，滴定速度慢。默认为4，对大多数滴定适用。
• Min.incr. 用来控制接近终点时的最小体积增量，默认值为10ul。
• V step MET模式中该参数设定了每一滴的加液量。而DET模式没有该参数，因其体积增量是自动控制的。空白滴定时设为0.01ml。其他滴定常设为0.1ml。
• Titr.rate 为体积增量的给液速率，默认为最大(max.ml/min)。
• Signal drift 信号漂移可控制滴定的速度，当信号漂移的基准达到时，下一个体积增量才会加入。默认为50mv/min。
• Equilibr.time 与Signal drift 相联系，也可以控制滴定速度，如果漂移基准没达到，滴定的体积增量就根据平衡时间加入。默认26s。
• Start V 如果知道终点为15ml左右，可设置一个开始体积12ml，然后再慢慢滴定寻找终点。节约试验时间。
• Dos.rate 开始体积的加液速率，默认最大。
• Pause 开始体积加入后，可设定一个暂停时间，使样品充分反应，电极有一个适应时间，以防信号响应的滞后。
• Meas.input 电极插口，我们的电极设为1。
• Temperature 温度对滴定曲线影响较小。默认25℃
Stop conditions
• Stop v 停止体积的类型：
“abs.”以ml为单位的绝对停止体积 ，范围为0-999.99ml
“rel.” 相对于样品量的停止体积
“OFF” 停止体积不监测
• Factor 如果停止体积设为“rel.” ，需输入计算因子，停止体积(ml)=因子*样品量
• Stop U or pH 通过设定电位值或pH值来停止滴定。
• Stop EP 通过设定突跃点的个数来停止滴定。
• Filling rate 该参数用于控制玻璃量管的再填液速度。一般选择“MAX”,对于粘性大的滴定剂可选择小一点的填充速度，避免产生气泡。
Statistics
• Status 一般选择关闭。
Evaluation
• EPC 这是一个阈值，只有电位突跃大于该阈值，仪器才判断为终点。它可阻止将信号噪音判为终点。MET模式默认为30mv，DET模式默认为5。
• EP Recognition 等当点确认方式：
All:符合EPC值的所有终点
Greatest：突跃最大的点
Last：最后一个突跃
Window：希望在一定范围内寻找终点，如电位值或pH范围。
Off ：关闭
• PK/HNP 滴定多元酸或多元碱时可测定pka值。
Preselections
• Req.ident 滴定开始后输入样品名称
• Req.smpl size 滴定开始后样品量的输入
三、注意事项：
v首次使用需用纯水浸泡一夜再使用。
v使用前打开小盖子。
v每次测定样品前先用水冲洗电极，再用无水甲醇或无水乙醇冲洗。
v使用前转动白色套圈。
v使用时注意不要让转子接触到电极。
v更换内参液时，需将原液倾出，加入新鲜的内参液。
v结束时需将盖子盖上，将电极清洗干净，放入储存液。严禁干燥。
名称：仪器购置 标准操作规程(SOP)
关键词：仪器购置
目的：为了规范仪器的正常购置，确保仪器能及时、准确、安全到位，保证实验的顺利进行，特制定本标准操作规程。
背景知识：选填项目
原理：选填项目
主体内容：
1 仪器购置由课题负责人或实验室负责人根据实验需要，填写请购单。
2 经批准后，经过市场调查，确定购买厂家和价格，签定购买合同。
3 所购仪器由请购人验收，应对仪器各性能指标逐一检查，发现问题及时与供应商联系，采取补救措施。
4所购仪器验收后交由保管员检查，保管员应在入库物品专用登记本上详细记录所购买仪器的名称、数量、规格、生产厂家、购买日期、存放地点、购买人、验收人。
5及时通知仪器管理人员，经仪器管理人员登记并佩挂仪器登记牌、状态牌及仪器使用记录本后，由课题负责人或实验室负责人从保管员处领出后，按规定放置于相应位置。
6购置仪器的合同、说明书、维修卡等及时交由档案室存档。
主要参考文献：选填项目：
名称：与长期毒性实验相关的毒代实验 标准操作规程(SOP)
关键词：毒代实验
目的：得到各个（和各组）受试动物在长期毒性实验的药-时曲线及各药代动力学参数
背景知识：选填项目
原理：选填项目
主体内容：
1 试验材料的准备 包括试验仪器、试剂、供试品、对照品、试验动物等。
2 实验方法
2.1 剂量选择
根据毒理学及毒性实验结果，选定三个剂量组。其低剂量为无毒性剂量水平；中剂量选取为低剂量水平药物暴露的合适倍数，根据毒性实验目的确定；高剂量根据毒理学考虑而确定，一般将该化合物可以达到最大药物暴露的最小剂量作为高剂量。
2.2 给药途径
所用的给药途径和方式，应尽可能与临床用药一致。口服给药者，不得破坏原有剂型。
2.3 实验过程
2.3.1 样本采集
2.3.1.1 单一动物数据点采血方案
将长期毒性实验的每一剂量组分为2个亚组，按下表所示的顺序，每一个剂量组在按该组剂量给药后，于不同的时间点进行取样，具体时间点的由药代实验所得到的药代参数决定。
单一动物数据点取血方案
亚组 给药前 时间点1 时间点2 时间点3 时间点4 时间点5 时间点6 时间点7
1雄+1雌/组 A A
1雄+1雌/组 B B
1雄+1雌/组 C C
1雄+1雌/组 D D
2.3.1.2 取血方式及样品贮存
取按要求禁食的动物，按“血液样品的采集SOP”于给药前采集适量空白血样，并根据预试验结果在给药后，于不同时间点采集血样。取血点要求包括吸收相、平衡相及消除相。整个采样时间应持续24小时。取血后，应迅速处理样品，使其酶活性丧失，并冷冻贮存。
2.3.1.3 取血次数的确定
在整个实验的第1、7、15天和期末取血。
2.4.2 血样的处理
对采集到的血样按“血液样品的前处理SOP”进行处理。
2.4.3 样品测定
标准曲线的制备：根据预实验的结果，取与样品制备用量相同的空白血浆6份，分别加入一定量的不同浓度的对照液后，按照上述血液样品处理方法进行处理，得到标准溶液系列。
质控样品的制备：根据预实验的结果，取与样品制备用量相同的空白血浆6份，加入高、中、低3个浓度的对照液后，按照样品处理方法进行处理，制成高、中、低3个浓度的质控样品，每个浓度至少双样本，并应均匀分布在未知样品测试顺序中。
将处理好的空白样品、标准溶液、质控样品及供试样品溶液分别注入高效液相色谱仪，得到随行标准曲线、质控样品数据及不同时间点的血药浓度数据。其中质控样品测定结果的偏差一般应小于15%，低浓度点偏差一般应小于20%，最多允许1/3质控样品的结果超限，但不能在同一浓度中出现。如质控样品测定结果不符合上述要求，则该分析批样品测试结果作废。
3 数据处理及整理
将不同时间点的血药浓度数据输入药代动力学统计软件DAS，进行数据处理，并给出以下结果：
3.1.静脉注射给药，应提供t1/2（消除半衰期）、Vd（表观分布容积）、AUC（血药浓度-时间曲线下面积）、CL（清除率）等参数值；
3.2.血管外给药，提供t1/2（消除半衰期）、Vd（表观分布容积）、AUC（血药浓度-时间曲线下面积）、CL（清除率）、Cmax和Tmax（达峰时间）等参数。
4 注意事项
4.1 实验动物尽量在清醒状态下试验。
4.2 严格掌握好各时间点取血的准时性。
4.3 标准溶液的浓度覆盖范围要包含单次给药的最高及最低血药浓度，不得外推。
4.4 注意样品的稳定性，无法立即制样的样品，应选择合适的方法进行贮存。
主要参考文献：选填项目：
名称：动物实验操作考试标准操作规程(SOP)
关键词：动物实验操作
目的：规范动物实验工作人员操作
背景知识：选填项目
原理：选填项目
主体内容：操作步骤，必填项目
1 进入本所药理、毒理部门的工作的人员，在试用期满，必须会大、小鼠口服、腹腔给药途径的操作。
2 定期刊进行合格考试，主考有中心主任，药理、毒理部门的负责人，及有实验经验者参加。
3 考试范围有不同途径的取药及取血（见附表）方式，每种途径有十只大小鼠。
4 考试合格应符合70—80%合格率。
5 合格由中心主任发给上岗证。
6 持上岗证后，才有资格参加各种安评试验。
7 注意事项
从事药理、毒理工作一年以上者免考。
动物实验操作合格考试通知单
兹定于本月 日 时，进行给药、取血操作考试，请下列人员作好准备：
实验操作人员：
动物采购人员：请准备大鼠 只，小鼠 只
XXX安全性评价中心
药理室主任：
年 月 日
XXX安全性评价中心
操作人员考试内容及合格项目
给 药
静脉给药 □小鼠 □大鼠 □豚鼠 □家兔耳缘
口服给药 □小鼠 □大鼠
腹腔给药 □小鼠 □大鼠
皮下给药 □小鼠 □大鼠
皮内给药 □小鼠 □大鼠 □豚鼠 □家兔
阴道给药 □小鼠 □大鼠 □豚鼠 □家兔
肛门给药 □小鼠 □大鼠 □豚鼠 □家兔
肌肉给药 □小鼠 □大鼠 □豚鼠 □家兔
取 血
眼框取血 □小鼠 □大鼠
尾静脉取血 □小鼠 □大鼠
兔耳缘静脉取血 □
大鼠腹腔主动脉取血□
大鼠长毒脏器解剖 □
考试者： 年 月 日
主考人：
年 月 日
主要参考文献：选填项目：
MatrixTM1600点膜机标准操作规程
1、 准备
1、1 检查仪器使用记录，查看使用状况登记表。
1、2 检查电源连接是否正确，气体管道是否畅通，气体压力是否达到要求。
2、 操作
2、1 开机：按下“ON”开启键，机器开始启动。
2、2 泵的初始化：选择“SET PUMP”键，机器将显示泵的另外一个功能界面，选择“INITIALIEE”和1号泵，使机器开始1号泵的初始化。初始化完成以后，重复按“INITIALIEE”和2号泵，初始化2号泵。
2、3 管道冲洗：当初始化完成以后，界面出现“PURGE”，“RECLAIM”，“SET”，“RETURN”键，选择“PURGE”键及“PURGE 1”键，充分灌洗1号泵，重复3次，完成后同样重复灌洗2号泵，重复3次，直至1号泵和2号泵中的气泡及水完全排空排净。
2、4 固定试剂瓶：将需要点膜的抗体注入白色塑料瓶，然后将瓶子卡在机器上，管子插入瓶内，充分灌注1号泵和2号泵。
2、5 点膜
2、5、1 当灌洗完成以后，按下“RETURN”返回键进入点膜状态。按下显示屏的“HOME”键，使真空平板移动至初始化位置，将磁性滑块移动至点膜结束的位置。
2、5、2 先空点一次，避免第一次点膜时把抗体全部打出，然后把管子插入卡板孔中，调到点膜最合适的位置。
2、5、3 将一条膜按要求附着在空板上，按下显示屏上的“VACUUM”真空键，膜将被吸附在平板上，同时按下“CYCLE”键开始点膜。
2、5、4 点膜完毕，将膜整理放在干净的PVC板上，切勿重叠，然后交下一道工序。
2、5、5 操作完毕，关闭机器电源，关闭氮气供应阀门。
3、 注意事项
3、1 每次操作完毕，立即对设备管道进行在线清理，先用蒸馏水灌洗，然后用三蒸水清洗。
3、2每次操作完毕用干净擦布对机器表面进行擦拭，保持机器的干净和整洁。
3、3 操作过程中注意不同的样品不得混用，根据色标严格区分。
3、4 每周对机器管道彻底清洗一次。先灌入0.1N的盐酸灌洗三遍，停一小时排空；然后灌入1N氢氧化钠灌洗三遍，停半小时排空；最后用蒸馏水反复冲洗十遍，再用三蒸水冲洗五遍。
4、维护与保养
维护对象 频率/手续
机器表面 日常：使用软布和无水乙醇擦拭
真空板 日常：使用软布和异丙醇擦拭，清除缝隙的残片
喷头装备 日常：用无水乙醇擦拭，用去离子水清洗
泵装备 浏览“CAVRO”泵说明书
5、故障排除
故障 检查地点
当机器打开时主保险丝报警 检查电压选择器是否在正确位置
当按下“START”键机器不能打开 “EPO”按钮没有拔出，能量进入模式关闭，电源没有连接
没有真空产生 检查空气压力，检查空气连接，检查底板连接
喷嘴不能上升 检查空气储液瓶，检查弹性条件
喷嘴不能下降或者下降幅度不够 检查空气压力，检查空气连接，检查停止位置
触摸瓶不能工作 检查电源连接，检查“EPO”按钮位置，检查电源输入位置
泵产生剧烈噪声 查看泵的说明书
底板不能移动 检查喷嘴下面传感器，检查标记位置，检查带子，检查滑轮，底板是否在原始位置
泵不能正确响应 检查泵的配置
喷液成零星状 检查液体路径，检查喷嘴条件，检查喷嘴水平，查看泵的说明书
l 目的：建立HCV试剂盒酶标二抗生产操作的标准程序
l 范围：HCV试剂盒酶标二抗生产
l 责任：生产部经理、班组长、生产人员
l 内容：
1. 酶标二抗的制备：
1.1. 接生产指令，填写配液记录。
1.2. 计算物料数量及出库量并出库：Na2HPO4·12H2O，NaH2PO4·2H2O，NaCl，小牛血清，硫柳汞，庆大霉素，去离子水，Tween-20，Red- dye, 浓缩酶标二抗。
1.3. 设备准备：电子天平、托盘天平、正压泵、滤器。
1.4. 容器准备：2L量筒、酶标专用桶、不锈钢杯子、不锈钢勺子。
1.5. 清场：检查有无清场合格证。
1.6. 操作（环境：十万级配液间）
1.6.1. 根据计算数量称量物料
1.6.2. 取合适容器，加入去离子水，然后依次加入Na2HPO4·12H2O ，NaH2PO4·2H2O，NaCl，小牛血清，硫柳汞，庆大霉素，Tween-20，Red-dye，充分溶解。
1.6.3. 测pH，用1N NaOH调pH =7.2。
1.6.4. 过0.22u正压滤器除菌。
1.6.5. 加无菌浓酶标二抗。
1.7. 取10ml送调配组自检。
1.8. 物料平衡：根据理论产量，实际产量计算平衡结果。
1.9. 记录偏差情况及异常情况处理。
1.10. 清场：清理本次生产遗留物品。
1.11. 存放：贴标签，注明产品名称、批号、体积、操作者、日期，存放于中间体库2-8℃，并办理入库手续。
1.12. 生产过程控制：对以上各步骤逐项进行实时复核，做出结论后记录并注明复核者、日期。
2. 分装材料：
2.1. 待分装大包装：酶标二抗。
2.2. 空白瓶、内塞、红色外盖用环氧乙烷灭菌。
2.3. 分装机。
2.4. 刻度试管
2.5. 注射器、不锈钢三通阀、橡胶导管（酶标二抗专用），须灭菌高压处理。
2.6. 已灭菌乳胶手套。
2.7. 十万级洁净工作室。
2.8. 超净工作台
2.9. 分装摆瓶用塑料盒。
2.10. 灯检用日光灯。
2.11. 压内塞专用枪头。
2.12. 酶标二抗标签。
3. 操作程序
3.1. 准备工作：分装用试剂瓶、内塞、外盖由GMP准备室剥去纸箱外包装，成包的空白瓶、内塞、外盖经物流走廊进入分装室。
3.2. 工作人员自人流入口按照相关规定进入。
3.3. 按酶标二抗分装通知单，领取要分装的酶标二抗大包装后送至分装室。
3.4. 检查确认清场合格证及现场无上次工序遗留物品。
3.5. 带上一次性手套，打开瓶袋，将瓶整齐摆放到塑料盒中，填写摆瓶交接记录。
3.6. 分装：
3.6.1. 检查分装器具的消毒日期及标记卡是否在效期内。
3.6.2. 调整好分装机使用状态，用刻度试管调定所需装量，连接分装器具及导管 。
3.6.3. 根据通知单的要求分装加样，复核人在加样过程中，每分装1盒抽检3支，检查加样量是否准确，并检查有无漏加或错加，复核无误后将试剂交压塞人。
3.7. 压内塞：用专用枪头按从下到上、从右到左的顺序依次压内塞，并压紧。压完后，将试剂交拧盖人，并填写交接记录。
3.8. 拧盖：将外盖逐支拧紧，每拧完一盒，要抽查，合格后，将试剂交给灯检人，并填写交接记录。
3.9. 灯检：将试剂瓶摆放在日光灯管前，仔细检查每支试剂的液量是否均匀。次品试剂交指定人员销毁，并填写销毁记录。
3.9.1. 摆瓶人将灯检后的试剂整齐摆放在周转箱内，点清数量，并在周转箱上贴上标签，注明品名、数量、状态、责任人、日期。
3.10. 填写分装记录。
4. 清场与检查：
4.1. 分装完毕，进行物料平衡，核对应分数量，实分数量，差额及其原因。
4.2. 分装管道取下放至专用铝盒内，送至洗刷间，由专人按清洗SOP清洗，填写清洗记录，放到指定位置。供下次分装同类大包装之用，分装器具应做到专项专用，标示清楚，不得混淆。分装用塑料盒送洗刷室清洗，并填写交接记录。剩余塑料瓶、瓶盖和分装剩余大包装交给指定人员负责销毁，填写销毁记录。工作过程中使用的废弃物品集中装于密封塑料袋内一起拿出洁净工作间，由指定人员消毒处理。
5. 贴签：
5.1. 将分装好的酶标二抗从物料出口送出，由物料交接人员送与贴签员，并做好记录。
5.2. 贴签员根据任务单，领取相应品种和数量的标签，按照贴签机的标准操作程序打印批号并贴签，次品标签及剩余标签退库，并填写退库记录。
5.3. 填写贴签记录。
6. 入库及抽样送检，贴签后，检查核对数量完毕，在周转箱上贴标签（品名、批号、数量、状态、负责人、日期），将酶标二抗存放在半成品冷库中，并填写入库单和质检申请单送与质管部门质检，办理入库手续，质检合格后由质检部门发放合格标签，将待检封签换掉并与库房人员作好交接工作。
7. 注意事项
7.1. 操作过程均系在10万级工作室内进行。
7.2. 分装时摆瓶、调量、分注、压内塞操作在超净工作台内进行，并注意无菌操作。
7.3. 各种物料进入洁净工作洁净间时均应去外包装防止不洁净物品带入。
7.4. 作业开始前及进行中不得进行任何大面积清洁消毒工作。
7.5. 工作室内应按《净化工作间工作管理制度》定期进行清洁工作。
7.6. 每个班次作业结束，均应进行彻底的清场及清洁工作。
7.7. 工作中的废物、生产用材料、容器、设备等均应分别按相应规定分别处理，不得随意乱扔，废物按废物处理办法进行。
l 目的：建立洁净区域卫生管理规定。
l 范围：洁净区人员、仪器、设施。
l 职责：生产部负责人、班组长、洁净区工作的全体员工，质管部经理、检查员。
l 内容：
1. 人员卫生管理：
1.1. 全体员工身体健康，持健康合格证上岗。
1.2. 在工作期间，每年必须体检一次，持周期体检合格证方可继续留在本岗位工作。
1.3. 随时注意个人清洁卫生，勤洗澡洗头，不掉头屑，勤理发剃须，勤剪指甲，勤换内衣。
1.4. 不允许化妆，涂含有粉质的护肤品，不允许戴饰物、手表。
1.5. 进入洁净区严格执行人员净化程序。
1.6. 每日上岗前必须按规定穿戴好清洁、无菌、完好的洁净服、洁净鞋、戴好口罩、手套。
1.7. 随时注意保证手的清洁、注意消毒，干手使用烘手机或一次性消毒纸巾，手在清洁以后，不再做与工作无关的动作，接触与工作无关的物品。
2. 洁净服（包括帽、鞋、手套、口罩）卫生
2.1. 洁净服要求不掉纤维，也不因穿着而引起纤维脱落断丝，不产生静电，不粘附粒子，具有良好的过滤性，保证人体和内衣的尘粒不透过，耐腐蚀，对洗涤和消毒处理及蒸汽加热消毒永久性、无磨损、破损现象。
2.2. 洗涤后平整、柔软、穿着舒适，操作方便。
2.3. 洁净服线条简单，接缝处无外露的纤维，领口、袖口、裤口等要加工松紧口。
2.4. 洁净服按清洗规程统一由洗衣房清洗消毒，每班清洗消毒一次。
3. 设备卫生
3.1. 洁净区使用的设备容器、管路在进行清洁以后，还必须用纯化水冲洗干净并采取有效的消毒措施以后方可使用。
3.2. 缓冲间是洁净区与一般生产区或不同级别洁净区之间的隔断设备，用来防止非洁净空气的污染，因此，缓冲间的门不能同时打开。
3.3. 局部净化设施要求按规定的标准操作规定进行保养、清洁、更换。每次必须在工艺操作前5－10分钟启动。
3.4. 洁净区清扫工具宜采用不掉纤维的材料进行清扫，并限制使用区域。
4. 仪器卫生：
4.1. 洁净区内的仪器要表面光滑，易清洗、耐腐蚀、易消毒。
4.2. 仪器清洗干净后，用纯化水冲洗。
4.3. 仪器在使用前后均要清洁。
细胞实验相关操作步骤：
细胞培养
HepG2细胞系，37℃，5%CO2，饱和湿度培养。
Hep G2细胞：上皮样，肝细胞癌，非整倍体，55，XY MEM+NEAA+10%FBS。
生长曲线
1． 选取对数生长期HepG2细胞，用10%胎牛血清DMEM培养液调细胞浓度为1×104/ml，均匀加入24孔培养板，每孔1 ml，设6组，每组计数6次，每次设3个复孔，共108孔。
2． 培养18小时后弃上清液，换10%胎牛血清DMEM培养液，同时加入不同浓度lovastatin（0，1，5，10，20，50 μM）。
3． 每隔24小时吸去3个孔的培养液，加入消化液，混悬细胞，计算细胞数目。每个孔计数2次，得出细胞浓度平均值，共计数6天。
4． 绘细胞生长曲线，横坐标为培养时间，纵坐标为细胞浓度。
5． 根据生长曲线估算lovastatin对HepG2细胞的IC50。
甲唑蓝(MTT)比色法测增殖活性
选取对数生长期HepG2细胞，用10%胎牛血清DMEM培养液调细胞浓度为2×104/ml，均匀加入96孔培养板，每孔200 μl，空白对照为未加细胞的10%胎牛血清DMEM培养液，共四个96孔板。培养18小时后弃上清液，换10%胎牛血清DMEM培养液，同时加入不同浓度lovastatin及GPPP、FPP，对照组加入等量溶剂，每组设3-5个复孔。继续培养24、48、72、96小时后分别换无血清DMEM培养液180μl，同时加入甲唑蓝（MTT 5g/L）20μl，37℃温箱孵育4小时后，小心吸出培养液，每孔加DMSO200μl，振荡溶解10分钟，在酶联免疫检测仪上测定570nm、492nm处光吸收值，读取OD值，以此反映细胞增殖活性，并计算细胞增殖抑制率(inhibitory，IR) =(1-处理孔OD570/对照孔OD570) ×100%。
材料：
1. MTT溶液 MTT5g/L，用0.01mol/L PBS(Ph7.2)配制。在磁力搅拌器上搅拌30分钟，用0.22μm微孔滤器过滤除菌。2-8℃冰箱内避光保存，较长时间使用则冰冻保存。
2. DMSO。
3. 振荡混合仪和酶联免疫检测仪。
操作程序：
1． 生长至对数期细胞，弃去培养液，加入胰酶37℃消化1分钟，吸去消化液，重新加入培养液，吹打细胞成单细胞悬液，调整浓度至2×104/ml。
2． 将细胞均匀接种于96孔细胞培养板，每孔200 μl，共4个96孔板（见表1）。
3． 18小时后换无血清DMEM，使细胞同步化24小时。
4． 吸去DMEM，各孔加入不同浓度的lovastatin及其它处理因素的含10%FBS的DMEM各200 μl。如下表。空白对照为不加细胞的含10%FBS的DMEM。每组设5个复孔。
5． 于加处理因素后的24、48、72、96小时加入5 mg/ml MTT溶液20μl（培养液量的10%），37℃温箱继续孵育4小时。
6． 吸去培养液，加入DMSO 20 μl。
7． 振荡10分钟，使结晶充分溶解。
8． 在酶联免疫检测仪上测定光吸收值，测定波长为570 nm，参考波长492 nm。
9． 结果分析：细胞存活率=试验组光吸收值÷对照组光吸收值×100%。细胞增殖抑制率(inhibitory，IR) =(1-处理孔OD570/对照孔OD570) ×100%。
原创
名称：单细胞凝胶电泳 标准操作规程(本室SOP)
关键词：单细胞凝胶电泳
目的：为便于各室单细胞凝胶电泳试验结果的可比性
背景知识：略
原理：在细胞核中，DNA是环状附着在核基质上，细胞裂解过程中，核基质被溶解、抽提，DNA的结构则未发生变化。如果DNA链上存在缺口，则使DNA超螺旋变的松弛，DNA环向外展，同时由于暴露了阴电荷，在电场力的作用下，松动的DNA环向阳极迁移，但是由于这种松动的DNA环一端仍附着于核DNA，其迁移距离受到限制，因此尾长并不总是真实反映链缺口的多少。实际应当依靠尾长与尾部的荧光强度同时来进行分析。
主体内容：操作步骤见下文
主要参考文献：略
操作步骤：
1. 分离制备单细胞悬液：
（1） 体外培养的细胞株：用胰酶消化，吹打成单细胞悬液
（2） 体内脏器细胞：处死动物，取出脏器，于Hanks’液中制备成单个细胞悬液。
2. 胶板制备：
（1） 取20~50μl于56℃水浴中保温的0.5%普通熔点琼脂糖，铺于磨沙载玻片上，形成底胶。
（2） 取100~150μl 0.5%普通熔点琼脂糖加在底胶上，再于其上加盖玻片，4℃冷凝10分钟。
（3） 取下盖片，取50~100μl于37℃水浴中保温的1.0%的低熔点琼脂糖与50~100μl细胞悬液（105个细胞/ml）混匀，立即铺片，加上盖玻片，4℃冷凝10分钟。
（4） 去掉盖玻片，取70~100μl于37℃水浴中保温的0.5%的低熔点琼脂糖铺片，加盖玻片，4℃冷凝。
3. 细胞裂解与电泳：
（1） 将制备好的胶板去掉盖玻片后，浸于4℃预冷的细胞裂解液中，4℃裂解1小时。
（2） 取出胶板，放入电泳槽中，浸泡在电泳液中解旋20分钟。
（3） 4℃电泳20分钟（25V，300mA）。
4. 中和与染色：
（1） 电泳结束，将胶板浸泡于中和液中，每次15分钟，共中和两次，注意更换中和液。
（2） 取出胶板，置于染色架上，滴加5μg/ml的PI，暗处染色20分钟。
（3） 蒸馏水脱色15分钟。
5. 镜检和分析：
（1） 在荧光显微镜下观察，绿光激发吸收滤片590nm。必要时照相记录。
（2） 记数观察的细胞，记录彗星细胞出现的频率，用目镜测微尺测头长与全长，计算核DNA迁移距离。
* * * * *
使用两层凝胶法，经裂解、DNA解旋、电泳和中和得到湿琼脂糖凝胶片。将湿琼脂糖凝胶片置于冰冷无水乙醇中脱水10分钟，后置于空气中自发干燥。每人制备2张琼脂糖凝胶片。全部操作在采血后8小时内完成，操作过程中注意避光。脱水干燥的琼脂糖凝胶片装于含有干燥剂的载片盒中运回实验室。使用50µl 30µM的溴乙锭溶液染色、照相。使用单细胞凝胶电泳软件分析所有照片，每人随机测量100个以上细胞的尾长和olive尾矩，以尾长和olive尾矩的算术均数代表个体DNA损伤情况。
基因芯片过程
材料：上海生物芯片有限公司的人5K基因表达谱cDNA芯片（V1.0），产品目录号：SBC-R-HC-200-10。包含了5075个功能已知的人类基因，均来自NCBI高质量的RefSeq数据库；芯片内重复一次，有16个质控点，基因序列经过多次测序证实，具有详细的基因注释。可用于检测具有详细注解的转录本的表达情况，可确定功能基因间的相互关系以及调控途径。
操作步骤：
1. 细胞培养 用100 mm培养皿中在含10% v/v胎牛血清的DMEM培养基中常规贴壁培养HepG2细胞。细胞生长至70%融合时，换用无血清的DMEM培养基，24小时后换10%胎牛血清DMEM培养液，实验组加入20μmol/L的lovastatin，18小时后收获对照组和实验组细胞。
2. 总RNA提取 每5×106个细胞加入1ml TRIzol，提取总RNA，用RNeasy Kit纯化总RNA，经核酸/蛋白分析仪检测吸光度A值，琼脂糖凝胶电泳检测总RNA完整性。样品置于-80℃冰箱中保存。
3. 探针标记 采用cDNA直接标记法，其中实验组RNA采用cy3荧光标记，对照组RNA采用荧光cy5标记。用QIAquick Nucleotide Removal Kit纯化探针。
4. 杂交及洗涤 使用上海生物芯片有限公司的5K基因表达谱cDNA芯片，包含5075个功能已知的人类基因。各取30 pmol的Cy3和Cy5标记的探针42℃避光杂交16小时，然后用1SSC/0.2 SDS（55℃）、0.1SSC/0.2% SDS（55℃）、0.1SSC溶液（室温）依次洗片。
5. 扫描与分析 芯片结果采用Agilent扫描仪进行扫描，Imagene软件读取数据，分辨率为10 μm，PMT 100%， 最后采用数据导入分析软件Genespring 进行标准化处理分析，cy3/cy5即处理组/对照组的ratio值，差异基因筛选标准是cy3/cy5≥2为上调基因，cy3/cy5≤0.5为下调基因。
原创：电子ph计的使用规程
关键词：电子PH计 调节PH值
目的：为了让大家正确使用电子PH计，能调节自己满意的PH值，避免实验室经常发生标准液污染，打破玻璃头等。
背景知识：无
原理：无
该ph计是根据电流差原理设计而成
1开机：接通电源，并置右侧按钮于ON状态
2校正标准PH值：
按SET 键，出现校正画面
1）
2）将玻璃头置于标准液（PH=7），待读数稳定后，按STARDEN键。
3）用超纯水冲洗玻璃头，并用滤纸吸拭干（每次更换测试液前必须做的一个步骤）
4）将玻璃头置于标准液（PH=4），待读数稳定后，按STARDEN键。
5）用超纯水冲洗玻璃头，并用滤纸吸拭干
6）将玻璃头置于标准液（PH=10），待读数稳定后，按STARDEN键。
7）用超纯水冲洗玻璃头，并用滤纸吸拭干
3.使用，可以测定溶液PH值，或调节PH值。在调节PH值时，注意一定要缓慢添加调节液体（如HCl或naoh ）,另外一定要搅拌液体，待读数稳定后方可继续调节，直到满意为止。
4.用毕，用超纯水冲洗玻璃头，并用滤纸吸拭干。
5.将玻璃头置于稀的kcl溶液中。
6.关机，关电源。
鼓励新人，请加分，谢谢。
原创：电子ph计的使用规程
关键词：电子PH计 调节PH值
目的：为了让大家正确使用电子PH计，能调节自己满意的PH值，避免实验室经常发生标准液污染，打破玻璃头等。
背景知识：无
原理：无
该ph计是根据电流差原理设计而成
1开机：接通电源，并置右侧按钮于ON状态
2校正标准PH值：
按SET 键，出现校正画面
1）
2）将玻璃头置于标准液（PH=7），待读数稳定后，按STANDARD键。
3）用超纯水冲洗玻璃头，并用滤纸吸拭干（每次更换测试液前必须做的一个步骤）
4）将玻璃头置于标准液（PH=4），待读数稳定后，按STANDARD键。
5）用超纯水冲洗玻璃头，并用滤纸吸拭干
6）将玻璃头置于标准液（PH=10），待读数稳定后，按STANDARD键。
7）用超纯水冲洗玻璃头，并用滤纸吸拭干
3.使用，可以测定溶液PH值，或调节PH值。在调节PH值时，注意一定要缓慢添加调节液体（如HCl或naoh ）,另外一定要搅拌液体，待读数稳定后方可继续调节，直到满意为止。
4.用毕，用超纯水冲洗玻璃头，并用滤纸吸拭干。
5.将玻璃头置于稀的kcl溶液中。
6.关机，关电源。
鼓励新人，请加分，谢谢。
已经搜索,无重复
不过不是原创
名称:容量瓶的校正操作规程
1 容量瓶的校正
1.1 将待校正的清洁、干燥的容量瓶恒重，称重。
1.2 测量纯化水的温度（可将纯化水置仪器室1小时以上，仪器室室温即为纯化水的温度）将纯化水注入容量瓶标线处，称重。
1.3 根据纯化水的温度，查出该温度下水的密度，计算该温度下该容量瓶标示刻度体积的水的质量，并称重，视水液的弯月面是否与刻度吻合。
1.4 校正刻线：若与刻度不符合，可用纸条与水液的弯月面成切线贴成圆圈，然后倒去内容水，在纸圈上，下涂以石腊薄层，再沿纸圈用别针刻一圆圈，涂上氢氟酸，几分钟后洗去过量的氢氟酸，并除去石腊及纸圈，即见容量瓶上的新刻度。
1.5 重复1.1和1.2步骤，取平均值计算容量瓶体积，算出允差，并填附表A。
2 移液管，刻度吸管的校正。
2.1 在洁净的移液管或刻度吸管内吸入已测过温度的纯化水，并使水弯月面恰好在刻线处。
2.2 将水放入预先恒重并称好重量的具塞小锥形瓶中，称量，计算，可得水的重量。（应测2次，得放出水的平均重量）。
2.3 根据水的温度查水的密度表（见附表B），计算，可得移液管或刻度吸管的体积。
2.4 将结果记录在附录A表中。
3 滴定管容积的校正
3.1 在洗净的滴定管内注入纯化水，使弯月面最低处与刻度零位相切。
3.2 由滴定管中放水到已恒重并称重的具塞锥形瓶中，密塞，称重。
3.3重复3.1和3.2操作,取平均值。
3.4根据水的温度查水的质量及该温度下水的密度表（见附录B），计算，可计算出滴定管该部分管柱的体积。
3.5将结果记录在附录A表中。
4 量筒、量杯的容积校正
4.1 将洁净的量筒或量杯注入已知温度的纯化水，并使水弯月面恰好在刻线处。
4.2 将水倒置已恒重并称重的具塞锥形瓶中，密塞，称重，可得水的质量 。
4.3 根据水温查附表B水的密度，可计算出该量筒或量杯的体积。
4.4 根据附表B规定的标准容量允差，判断被校正量筒或量杯是否合格，并将校正结果记录在附录A表中。
本人本月SOP第三帖，本帖适合实验室抗生素研究者参考借鉴
名称：抗生素微生物检验标准操作规程(SOP)
关键词：抗生素 关碟法 效价 SOP
目的：建立一个抗生素微生物管碟测定法检验标准操作规程，确保检验结果可靠。适用于抗生素效价的检验。
主体内容：
1.检查：
1.1仪器于用具：培养箱、恒温水浴锅、、钢管、陶瓦盖、滴定管、双碟、抗生素Ⅰ号培养基、刻度吸管、容量瓶、大烧杯、天平、游标卡尺、称量瓶等。
1.2准备工作：
1.2.1将双碟、滴定管、20ml刻度吸管、10ml刻度吸管、5ml及2ml刻度吸管各1支，钢管、镊子置于贮槽中，在干燥箱250℃灭菌30min，陶瓦盖烘干，应保持其清洁干燥。
1.2.2培养基配置：所有培养基为抗生素效价Ⅰ号培养基，根据其配制说明配制。灭菌，分装到 100ml及200～300ml的锥形瓶中，备用。临用前用水浴溶化。
1.2.3菌悬液的配制：取短小芽孢杆菌工作用菌种营养琼脂斜面培养物加灭菌水1－2ml将菌苔洗下，制成悬液，用吸管将此悬液接种至盛有营养琼脂培养基的扁培养瓶内，均匀摊布，在30—35℃培养7日。取菌苔少许涂片，革兰染色镜检，应有芽孢85%以上，用灭菌水10ml将芽孢洗下，制成芽孢悬液，合并至灭菌大试管内，在70－75℃水浴内加热30min将菌体杀死，待冷后放冰箱贮藏为浓菌液。日常用菌悬液，取上述浓菌悬液，用灭菌水1：3稀释至灭菌试管中，冰箱保存备用。每次试验前，所加量应根据每次实验情况而定。灵活掌握。
1.2.4标准品、供试品配制：
1.2.4.1标准品配制：精密称定标准品粉末0.039g置25ml容量瓶中，用灭菌水定溶。即1000u/ml。从1000u/ml的溶液中移取2ml至200ml容量瓶中，用灭菌水定溶，此时溶液为10u/ml;在从1000u/ml的溶液中移取1ml至200ml容量瓶中，用灭菌水定溶，此时溶液为5u/ml.
1.2.4.2供试品配制：（原料）精密称定原料粉末0.01560g置10ml容量瓶中，用灭菌， 水定溶即1000u/ml。从1000u/ml的溶液中移取1ml置100ml容量瓶中用灭菌水，定溶此时溶液为10u/ml,再从1000u/ml的溶液中移取1ml至200ml容量瓶中。用灭菌水定溶，此时溶液为5u/ml。
1.2.5成品：取成品20片，精密称定，算出平均片重，研细。取平均片重的二倍半粉末（即10万个效价单位）置100ml容量瓶中用灭菌水定溶即1000u/ml。从1000u/ml溶液中移取1ml置100ml容量瓶中，用灭菌水定溶即10u/ml。再从1000u/ml溶液中移取1ml至200ml容量瓶中，用灭菌水定溶即5u/ml。
2.操作方法：
2.1双碟的制备：在无菌室内进行，培养基应在水浴中融化，避免直火加热。
2.2底层：用灭菌大口吸管（20ml）取已融化的培养箱20ml注入双碟内，等凝固后更换干燥的陶瓦盖，放入35－75℃培养箱中保温，使高于摊布菌层。
2.3菌层：取出试验用菌悬液，按已试验要的菌用灭菌吸管吸取菌悬液加入已融化并保温在水浴中(60℃)的培养基内，摇匀作为菌层用。用5ml刻度吸管吸取菌 层培养基5ml，使均匀摊布在底层培养基上，置水平台上，用陶瓦盖覆盖，放置20～30min待凝固备用。
2.4放置钢管：用干热灭菌的镊子将已灭菌的钢管平稳放在双碟中，使4个钢管成等距。钢管放妥后，应使双碟静置5－10min，再开始滴加抗生素溶液。
2.5滴加抗生素溶液：每批供试品取4－10个双蝶，用毛细滴管加样。在滴加之前须用滴加液洗2－3次，在双碟的4个钢管中成对角滴加标准品（Ｓ）及供试品（Ｔ）高（H）低（L）两种浓度的溶液。滴加顺序是：SH→TH→SL→TL。滴加至钢管口平满，注意滴加溶液间隔不可过长，因溶液的扩散时间不同影响测定结果。将已滴完的双碟移入培养箱内36.5℃培养16h。
3.抑菌圈测量：
3.1将培养妥的双碟取出，打开陶瓦盖，将钢管倒入盛有1：1000苯扎溴铵溶液或其它消毒液内，换以玻璃盖，用游标卡尺测量，测量时，眼睛视线应与读数刻度垂直，用尖端与抑菌圈直径的切点成垂直方向测量。
4.记录与计算：
4.1将抑菌圈不规整的弃之，选择教好的整理参加计算 。
根据公式 Log-1[T2+T1-S2-S1/T2+S2-T1-S1]×0.301×100%
5.注意事项：
5.1称量要迅速，研磨时要注意环境干燥。
5.2 配制药液时应注意环境，防止污染。
5.3 滴加抗生素溶液时要用中心浓度向高低两端交叉滴加，滴加要迅速。
6. 检验依据：2005年版《中国药典》二部附录
家兔胆汁中抗生素浓度及药动学实验、杀菌力评定研究方案
2.1胆汁采集方法
禁食12h，3%戊巴比妥腹腔注射麻醉后，行胆总管插管术。将家兔仰卧并固定于实验台上，清洗腹部、备皮、消毒、铺巾，自剑突下取腹部正中切口约3cm开腹，找出并游离胆总管，在胆总管远端靠近十二指肠膨大处剪开小切口，将引流管向上插入约2cm，用丝线结扎固定后关腹。待胆汁引流通畅，留取空白胆汁标本后，按实验设计静脉注射各待测抗生素，各抗生素用量根据临床上人体的用药量，按标准动物等效剂量折算法计算（头孢曲松75mg/kg，头孢哌酮75mg/kg，哌拉西林300mg/kg，美罗培南75mg/kg，左氧氟沙星25mg/kg和甲硝唑40mg/kg），给药结束后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8h等不同时间分别收集胆汁1.5ml,低温保存（-20℃）。
2.2 药物测定方法学 均采用高效液相色谱法（HPLC）测定胆汁样品中抗生素浓度。
2.2.1 色谱条件
（1）头孢曲松：色谱柱：Spherisorb ODS Sm C18, 5μ,150×4.6mm；流动相：0.8%四庚基溴化铵乙腈溶液-水-磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钾13.6g和磷酸二氢钾4.0g，溶于1000ml水中，调节pH=7.0) –枸橼酸盐缓冲液（取枸橼酸钠25.8g,置1000ml量瓶中，加水500ml使溶解，用20%枸橼酸溶液调节pH至5.0，加水至刻度）（500：440：55：5）；流速：1 ml/min；检测波长：254nm；进样量：20l ；柱温：25℃。
（2）头孢哌酮：色谱柱：Nova-Pak C18 60A 4μm,3.9×150mm HPLC Column；流动相：0.005mol/L四丁基氢氧化铵溶液(取10%四丁基氢氧化铵溶液26.4ml，加水800ml，用1mol/L磷酸溶液调节pH至4.0，加水稀释至2000ml，摇匀)-乙腈（750：250）；流速：1 ml/min；检测波长：220nm；进样量：20l ；柱温：25℃。
（3）美罗培南：色谱柱：Waters Symmetry® C18, 5μ,4.6×150mm；流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾（pH=6.5，4：96）；流速：1.5 ml/min；检测波长：300nm；进样量：20l ；柱温：22.5℃。
（4）哌拉西林：色谱柱：DiamonsilTM C18 5μm,200×4.6mm；流动相：甲醇-0.01mmol/L磷酸二氢钠（pH6.5）（55：45）；流速：1.0 ml/min；检测波长：220nm；进样量：20l ；柱温：20℃。
（5）左氧氟沙星：色谱柱：Agilent Hypersil ODS C18, 5μ,4.0×125mm；流动相：0.02mol/L磷酸盐缓冲液（pH2.44）-甲醇-0.5mol/L四丁基溴化铵（70：25：5）；流速：1.0 ml/min；检测波长：294nm；进样量：20l ；柱温：30℃。
（6）甲硝唑：色谱柱：Nova-Pak C18 60A 4μm,3.9×150mm HPLC Column；流动相：磷酸二氢钠（0.0075mol/L）-甲醇（80：20），用磷酸调节pH至4.0；流速：1.0 ml/min；检测波长：320nm；进样量：20l ；柱温：25℃。
2.2.2 对照品溶液的配制
分别称取头孢曲松钠、头孢哌酮、哌拉西林、美罗培南、左氧氟沙星、甲硝唑对照品59.46mg、53.82mg、55.25mg、11.41mg、10.29mg、11.05mg，各置于10ml棕色容量瓶中，以流动相溶解、稀释至刻度，充分摇匀，分别得5.0mg/ml或1.0mg/ml的储备液母液，再根据需要配制成各抗生素不同浓度的标准储备液。
2.2.3 胆汁预处理
取各胆汁标本200l，加入相应流动相或乙腈至2ml，旋涡振荡，离心（15000 rpm ）10min，取上清液经微孔滤膜过滤后进样。
2.2.4 专属性试验及色谱行为
各组样品均取空白胆汁、对照品溶液、空白胆汁加对照品溶液、动物静脉注射该抗生素后的胆汁等4种试样，按上述胆汁预处理方法操作，色谱图均要求在此条件下，分离效果良好，无内源性物质干扰。
2.2.5 标准曲线制备
分别取空白胆汁加入各抗生素标准储备液，头孢曲松成为相当于胆汁浓度分别是2500、1000、500.0、250.0、100.0、50.0、25.0μg/ml的浓度系列；头孢哌酮成为相当于胆汁浓度分别是2500、1000、500.0、250.0、100.0、50.0、25.0μg/ml的浓度系列；哌拉西林成为相当于胆汁浓度分别是5000、2500、1000、500.0、250.0、100.0、50.0、25.0μg/ml的浓度系列；美罗培南成为相当于胆汁浓度分别是500.0、100.0、50.0、25.0、10.0、5.0、1.0、0.5μg/ml的浓度系列；左氧氟沙星、甲硝唑各成为相当于胆汁浓度分别是100.0、50.0、25.0、10.0、5.0、2.5、1.0μg/ml的浓度系列；按前述胆汁预处理方法处理后进样，采用外标法峰面积定量。结果以样品浓度（C）对样品峰面积（S）进行线性回归，得标准曲线及回归方程：S=bC+a。
2.2.6 回收率试验和精密度试验
分别取空白胆汁加入各种抗生素标准液，使各成为高、中、低三个不同浓度的该抗生素的标准胆汁样品各5份，按前述方法处理后进样，以胆汁样品峰面积计算在不同浓度时该药物在胆汁中的回收率。同上法配制各抗生素的高、中、低三个浓度的胆汁溶液各5份，在同一天内进样分析，测得相应药物各种浓度的实测值，计算其日内的变异系数（相对标准偏差RSD），即为日内精密度；其余样品置-20℃冰箱内保存，此后在不同天同法测定各药物的高、中、低三个浓度的胆汁样品，计算日间精密度，以此考察测定方法的符合程度。
2.2.7胆汁药物浓度和药动学数据处理
根据各抗生素胆汁样品进样检测经外标法定量的峰面积，通过该药的标准曲线回归方程，计算其相应的药物浓度。所得胆汁药物浓度－时间数据用上海宏能药动学软件进行房室模型及非房室模型——统计矩分析，得出各种抗生素在胆汁中相应的药代动力学参数，如药物峰浓度、峰时间、半衰期、清除率、表观分布容积等。所得数据用均数±标准差（ ）表示。
2.2.8结合抗生素药效学的抗菌活性指标――最低抑菌浓度(MIC),进一步评估药物在胆汁中的杀菌效力
抗生素的药动学/药效学(PK/PD)研究显示，药物的杀菌作用取决于峰浓度(Cmax)和药物与细菌的接触的有效时间。目前用于评价抗生素杀菌作用的PK/PD参数主要有杀菌指数(抗生素峰浓度和最低抑菌浓度的比值,Cmax/ MIC)和抗生素浓度大于最低抑菌浓度的时间 (T＞MIC)等。根据各抗生素在胆汁中的药峰浓度和不同时间的实际浓度与抗生素的抗菌活性指标――最低抑菌浓度(MIC)结合,得出抗生素的Cmax/ MIC和T＞MIC，评估其在胆汁中的杀菌效力。
需氧菌对各抗生素的MIC数据摘自李家泰主持的中国细菌耐药监测研究组对我国不同地区的多中心的细菌耐药监测结果，甲硝唑对厌氧菌的MIC值摘自戴自英主编的实用抗菌药物学。
SEARCH了以下，有高效液相的，但没分类
转贴了一个分类的．
名称：Agilent1100液相基本操作规程，Waters 600E-2487 高效液相色谱系统操作规程，岛津LC-10AT型高效液相色谱仪操作规程．
关键词:HPLC，Agilent1100，Waters 600E-2487 ，岛津LC-10AT
目的：规范HPLC的使用
Agilent1100液相基本操作步骤
一、开机
1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。
2、打开 1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。
8 、设Flow：5ml/min，单击OK。
9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。
10、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump Control选项，选中Off，单击Ok关泵， 关闭
Purge valve。
11、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入Pump编辑画面，设Flow：1.0ml/min。
12、单击泵下面的瓶图标，如图所示（以二元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。单击Ok。
二、数据采集方法编辑
1、开始编辑完整方法：
从“Method”菜单中选择“Edit entire method” 项，如上图所示选中除“Data analysis ”外的三项，单击Ok，进入下一画面。
2、方法信息：
在“Method Comments”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。
单击Ok 进入下一画面。
3、泵参数设定：（以二元泵为例）
在“Flow”处输入流量,如1ml/min，在“Solvent B”处输入70.0,(A=100- ,也可Insert 一行”Timetable” ,编辑梯度。在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
单击Ok进入下一画面。
4、自动进样器参数设定:
选择合适的进样方式, 如图所示，进样体积 1.0ul ,洗瓶位置为6号。“Standard Injection”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“Injection with Needle Wash”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“Use injector program”---可以点击Edit 键进行进样程序编辑。
点击Ok进入下一画面。
5、柱温箱参数设定:
● 在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>” 键,如图所示,选中”Same as left”---使柱温箱的温度左右一致。
● 点击ok进入下一画面。
6、VWD检测器参数设定:
● 在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在”Peak width (Response time)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min (2s)。
● 在Timetable 中可以“Insert”一行，输入随时间切换的波长，如1min ，波长=300nm。点击ok进入下一画面。
7、DAD检测器参数设定:
● 检测波长: 254nm,BW=30nm, 参比波长=350nm,BW=100nm;
● 检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽BW： 一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽BW：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。Peak width（Response time）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。Slit—狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。
● 点击Ok进入下一画面。
8、RID检测器参数设定:
● 色谱条件:
进样体积: 20ul 。 光学单元温度: Off 。
极性: 正 。 峰宽(响应时间) : 4s 。
● 如图所示: “Optical Unit Temperature”---若环境温度控制在±2℃,设定为Off, 若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“Peak width”---大多数分析设为4S，只有在高速分析下设为更短。“Automatic recycling after analysis”---在不进行分析时可以让流动相循环，节省流动相，检测器连续运行，可随时投入使用。
● ***** 点击RID图标，选择RID Control ：Heater 设为On，若要循环流动相，必须将“Recycling Valve”设为ON。手动purge 参比池，将其设为On，并输入Purge 时间。
9、FLD检测器参数设定:
色谱条件：
● 样品：P/N 01018-68704 用甲醇稀释为1:10。
● 进样体积：5ul。
● 柱温箱: 30℃ 。 EX=246nm, EM=317nm ,PMT=10。
● 响应时间=4s. 停止时间： 出峰完毕。
● Excitation A: 激发波长:200-700nm,步长为1nm,或Zero Order。
● Emission: 发射波长: 280-900nm, 步长为1nm,或Zero Order。
● PMT: 大多数应用适当的设定值为10,若高浓度样品峰被切平头,则减少 PMT 值。
● “Peak width”：大多数应用设为4s，只有快速分析采用小的设定值。
● Multi Ex ： 多波长及光谱（激发）。
● Multi Em：多波长及光谱（发射）。
● 同时可以输入范围Range、步长step、采集光谱。
10、在“ Run time checklist ”中选中“Data acquisition”，单击Ok。
11、单击“Method”菜单，选中“Save method as”，输入一方法名，如“test”，单击Ok。
12、从菜单 “View”中选中”Online signal” ,选中Windows 1,然后单击Change 钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击Ok.(如同时检测二个信号,则重复12,选中Windows 2)。
13、从“Run control ”菜单中选择“Sample info”选项，如上图所示，输入操作者名称，在“Data file ”中选择“Manual”或“Prefix”。
区别: Manual--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。 Prefix—在Prefix 框中输入前缀，在Counter 框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd0001，vwd0002……。
14、从Instrument 菜单选择System on。
15、等仪器Ready，基线平稳，从Method菜单中选择“Run method”，进样。
（DAD, VWD色谱图如下所示：）
三、数据分析方法编辑
1、 从“View”菜单中，单击“Data analysis”进入数据分析画面。
2、 从“File”菜单选择“Load signal”，选中您的数据文件名，如下图所示。单击Ok。
3、 做谱图优化,从“Graphics”菜单中选择“Signal options”选项，。从Ranges中选择Auto scale及合适的显示时间，单击ok,或选择”Use Ranges” 调整。反复进行，直到图的比例合适为止。
4、积分:
(1)、从“Integration”中选择 “Auto integrate”,如积分结果不理想,再从菜单中选择“Integration Events”选项，选择合适的Slope sensitivity，Peak width，Area reject，Height reject。
(2)、从“Integration”菜单中选择“Integrate”选项， 则数据被积分。
(3)、如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。
(4)、单击左边“√”图标，将积分参数存入方法。
5、打印报告:
(1)、从“Report”菜单中选择“Specify report”选项，进入如上画面。
(2)、单击“Quantitative Results”框中Calculate右侧的黑三角，选中Percent（面积百分比），其它选项不变。
(3)、单击Ok.
(4)、从“Report”菜单中选择“Print report”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则单击Report 底部的“Print”钮。
四、关机
● 关机前，用 100%的水冲洗系统20分钟，然后用有机溶剂冲洗系统10分钟（如ACN），然后关泵，（适于反相色谱柱）。[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]
● 退出化学工作站，及其它窗口，关闭计算机（用shut down关）
Waters 600E-2487 高效液相色谱系统操作规程
1. 目的
规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
2. 范围
本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
3. 职责
质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4. 系统组成
本系统由Waters 600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne 7725i手动进样阀、Waters 2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、UPS和通风柜等辅助设备。
5. 程序
5.1. 准备
5.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。
5.1.2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
5.2. 开机和泵操作
5.2.1. 开机
5.2.1.1. 接通UPS的电源，依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。
5.2.1.2. 打开Millennium32软件，按「Login...」，输入用户名和密码，按「OK」注册进入系统主界面。在Project档内选择所需的项目，右击『Run Samples』图标，选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet窗口。
5.2.2. 更换溶剂
5.2.2.1. 打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；
5.2.2.2. 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀（断开柱和进样器）；
5.2.2.3. 按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为1ml/min（梯度配比阀在0ml/min时不工作）；
5.2.2.4. 选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%，其它为0%；
5.2.2.5. 将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；
5.2.2.6. 逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml溶剂；
5.2.2.7. 再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；
5.2.2.8. 转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。
5.2.2.9. 重复5.2.2.4.~5.2.2.8.直至所有即将使用的溶剂更换完毕。
5.2.3. 排气泡
5.2.3.1. 打开参照阀，换流动相为100%超纯水，设流速为10ml/min（注意：确认参照阀是打开的，否则可能损坏安装好的柱）；
5.2.3.2. 转动进口集合管阀手柄至DRAW位置，用启动注射器抽出约10ml水；
5.2.3.3. 顺时钟转动手柄至INJ位置，缓慢用力使水通过泵头从参照阀出口管排出（注意不要将气泡注入泵中）；
5.2.3.4. 按［Stop flow］屏幕键停泵，关上参照阀。
5.2.3.5. 如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下泵出口管，用塑料管连接至塑料烧杯中，设流速为10ml/min，冲洗2~5min（或更长时间）后停泵，重新接上柱。
5.3. 平衡系统（分两种情况进行）
5.3.1. 等度模式
5.3.1.1. 每次以0.1ml/min的增量加大流速至1ml/min，以超纯水冲洗系统10min。
5.3.1.2. 检查管路连接、柱接口及泵头处是否漏液，如漏液应予以排除。
5.3.1.3. 观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应在平均值的5~10%以内。如超出此范围，可初步判断为柱前管路仍有气泡，重复5.2.3.下的步骤。
5.3.1.4. 压力波动平稳后，换检验方法规定的流动相比例冲洗系统。在检查基线稳定性前，让最少5~6倍柱体积的流动相通过系统。
5.3.1.5. 在QuickSet窗口下的Instrument Method档内选择所需的仪器方法，按「Monitor」（此后泵由软件控制），观察基线和压力变化。如果冲洗至基线漂移<10-3Au/min，噪声为10-4Au数量级，且压力平稳时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。
5.3.1.6. 按「Abort」图标（左上第五个），停止监视基线。
5.3.2. 梯度模式
5.3.2.1. 按检验方法规定的条件冲洗平衡系统，并注意压力波动变化和排气泡。
5.3.2.2. 在进样前运行1~2次空白梯度。
5.4. 进样
5.4.1. 在QuickSet窗口内左下部选〈Single〉标签，在Sample Name档内填写试样名称；在Function档内选择试样类型（标准选“Inject Standards”；样品选“Inject Samples”）；在Method Set档内选择所需的方法组；在Injection Volume档内输入进样体积；在Run Time档内输入记录时间。
5.4.2. 用针头滤器过滤试样溶液（注射液可不必过滤），用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量。
5.4.2.1. 如按部分装液法，用微量注射器定容进样时，进样量应不大于定量环体积的50%，并要求每次进样体积准确、相同；
5.4.2.2. 如按完全装液法，用定量环定容进样时，进样量应不小于定量环体积的3倍（5~10倍准确性更佳）。
5.4.3. 按〈Single〉标签内右边的进样(Inject)按钮，等待窗口底部状态档内显示“Waiting”后，方可进样。
5.4.4. 将进样阀手柄转动至Load位置，将注射器针完全插入进样阀入口中，平稳地注入试样溶液，除另有规定外，让注射器留在进样阀上，将进样阀手柄快速转动至Inject位置，系统将自动运行，采集数据并记录图谱。
5.4.5. 让进样阀手柄保持在Inject位置，到下次进样前1~2min切换回Load位置，将注射器从进样阀中拔出。
5.4.6. 先用水再用试样溶液清洗注射器后，按以上程序继续进样，直至完成。
5.5. 数据处理（外标法）和打印
5.5.1. 右击系统主界面下的『Browse Project』图标，选择相应的项目，按「OK」进入Project窗口，选〈Channels〉标签。
5.5.2. 建立处理方法 选择一个待积分的标准，右击后选“Review”进入Review窗口。按「Processing Method Wizard」图标（左边第一个）进入New Processing Method向导窗口，按「OK」。
5.5.2.1. 划入一个感兴趣的最窄的峰，按「Next>」；
5.5.2.2. 划入一段包含噪声的基线，按「Next>」；
5.5.2.3. 划入一段要积分的区间，按「Next>」；
5.5.2.4. 根据情况选择最小峰面积和最小峰高，按「Next>」、「Next>」；
5.5.2.5. 在Name档内输入各组分峰的名称，按「Next>」、「Next>」；
5.5.2.6. 在Method Name档内填写方法名称，按「Finish」。退出Review窗口。
5.5.3. 修改标准 选中所有标准，右击后选“Alter Sample”进入Alter Sample窗口。
5.5.3.1. 在Sample Type档内将Unknown改成Standard；
5.5.3.2. 按「Amount」图标（左上第六个）进入Component Editor窗口；
5.5.3.3. 按「Copy from Process Method」图标（左上第五个），选择刚建立的处理方法，按「Open」，在Value和Units档内分别输入标准所含各组分的数值和单位，完成后按「OK」回到Alter Sample窗口；
5.5.3.4. 按「Save」图标存盘，退出Alter Sample窗口。
5.5.4. 积分 先选中所有标准，再选中所有未知样品，右击后选“Process”进入Background Processing & Reporting窗口，选Use specified processing methods，在右边档内选择刚建立的处理方法，按「OK」。
5.5.5. 打印 在Project窗口下选〈Results〉标签。
5.5.5.1. 选中要打印的标准/样品，右击后选“Preview”进入Open Report Method窗口，选合适的打印方法，按「OK」进入Report Publisher (Preview)窗口，预览打印的结果。按打印(Print)图标（左上第二个）即可打印结果。
5.5.5.2. 按「Close」可进入Report Publisher窗口对报告方法进行修改，完成后按「Print」图标（右数第二个）即可打印结果。
5.5.6. 数据处理完成后，关闭所有窗口，在主界面下按「Logout」退出系统，关闭Millennium32软件，再依次关闭电脑主机、显示器、打印机。
岛津LC-10AT型高效液相色谱仪操作规程
1.目的
规范岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的使用。
2．范围
适用于岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的使用。
3．职责
质检员对本规程的实施负责。
4．规程
4.1 系统组成：本系统由2个LC-10ATvp溶剂输送泵（分主/A泵和副/B泵）、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、N2000色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。
4.2 准备
4.2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
4.3 开机：接通电源，依次开启不间断电源、B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站。
4.4 参数设定
4.4.1 波长设定：在检测器显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所需波长值，按[Enter]键确认。按[CE]键退出到初始屏幕。
4.4.2 流速设定：在A泵显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所需的流速（柱在线时流速一般不超过1ml/min），按[Enter]键确认。按[CE]键退出。
4.4.3 流动相比例设定：在A泵显示初始屏幕时，按[conc]键，用数字键输入流动相B的浓度百分数，按[Enter]键确认。按[CE]键退出。
4.4.4 梯度设定
4.4.4.1 在A泵显示初始屏幕时，按[edit]键，[Enter]键；
4.4.4.2 用数字键输入时间，按[Enter]键，重复按[func]键选择所需功能（FLOW设定流速，BCNC设定流动相B的浓度），按[Enter]键，用数字键输入设定值，按[Enter]键；
4.4.4.3 重复上一步设定其它时间步骤；
4.4.4.4 用数字键输入停止时间，重复按[func]键直至屏幕显示STOP，按[Enter]键。按[CE]键退出。
4.5 更换流动相并排气泡
4.5.1 将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；
4.5.2 逆时针转动A/B泵的排液阀180°，打开排液阀；
4.5.3 按A/B泵的[purge]键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；
4.5.4 将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。
4.5.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
4.5.6 如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按[pump]键，冲洗3min后再按[pump]键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。
4.6 平衡系统
4.6.1 按《N2000色谱数据工作站操作规程》打开“在线色谱工作站”软件，输入实验信息并设定各项方法参数后，按下“数据收集”页的 [查看基线] 按钮。
4.6.2 等度洗脱方式
4.6.2.1 按A泵的[pump]键，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。
4.6.2.2 检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。
4.6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按4.5.6操作。
4.6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min，噪声为<0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。
4.6.3 梯度洗脱方式
4.6.3.1 以检验方法规定的梯度初始条件，按4.6.2项下方法平衡系统。
4.6.3.2 在进样前运行1~2次空白梯度。方法：按A泵的[run]键，prog.run指示灯亮，梯度程序运行；程序停止时，prog.run指示灯灭。
4.7 进样
4.7.1 进样前按检测器[zero]键调零，按软件中 [零点校正] 按钮校正基线零点，再按一下 [查看基线] 按钮使其弹起。
4.7.2 用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量。
原创
1岛津 AY120型托盘电子分析天平标准操作规程(SOP)
关键词：托盘电子分析天平, 标准操作规程
目的：本SOP是用来指导如何正确使用岛津AY120型托盘电子分析天平进行操作
实施人：使用本天平进行称量操作的所有人员
质量控制：由试验人在操作时，进行使用时控制；另外，实验室主管负责仪器总体控制
校准周期：除每次使用前的检查外，校准一般1个月进行一次。校准的项目主要为准确性、重复性、水平状态等
主要内容：具体操作步骤
机器预热
1. 通电一小时以上可进行精确地测定。
2. 不使用时不要拔掉AC适配器，按POWER/BEK键置于待机状态。
3. 一个月以上不使用时，将AC适配器拔掉。
操作规程
1. 称样量：本天平为万分之一天平，可精确称量到0.1mg，称样时为减小误差称样量需大于10mg。
2. 开机前观察天平是否处于水平状态，如否应调整。
3. 在测定开始前机器先预热。
4. 按POWER/BEK键。待机标准灭，全显示亮灯。（确定是否有不亮灯部分）变为零显示，进入测定状态。
5. 使用容器时，将容器装到样品盘上，确认稳定标志灯亮后，按TARE键。确认显示为零。
6. 装载试样，稳定标志灯亮后，显示读数，记录。操作键－POWER/BRK；切换动作/待机－MENU/CAL；去皮重（归零）－TAPE；切换单位－UNIT；（按住UNIT键可在1mg和0.1mg间转换）
注意事项
1. 勿使用附件以外的AC适配器。
2. 确认电源电压。确认供电电源电压与AC适配器标示的电压相符。
3. 放置在尘埃少的房间。不要阳光直射，放置条件是20土2℃，湿度45～60％RH的稳定环境。不要放置在空调或带磁设备的附近，不要放置在有腐蚀性气体、易燃气体的地方。
4. 使用坚固的物件做天平台，并使仪器处于水平状态。
5. 进行量程校正时不要移动天平。移动天平时先将AC适配器拔下。
6. 天平内部不要进入水、金属片等。掉落样品要及时清除。
7. 放置时不要在样品盘上装载过量称量物。
8. 不要碰撞样品盘。不要冲击玻璃把手。
9. 擦拭天平时应使用少量中性洗涤剂。
10. 用完后应登记。
11. 天平长时间不用再启用时，应用仪器原配外部标准砝码进行校准。
12. 每年定期强检，每月使用外部砝码校准；仪器如出现故障请于岛津仪器北京维修站联系。TEL：62043957
参考文献：岛津 AY120型托盘电子分析天平使用说明书
2台式旋转振荡器操作规程（sop）
关键词：台式旋转振荡器，操作规程
目的：本SOP是用来指导如何正确使用台式振荡器
实施人：使用本振荡器进行操作的所有人员
质量控制：由试验人在操作时，进行使用时控制；另外，实验室主管负责仪器总体控制
校准周期：一般3个月进行校准一次。校准的项目主要为转速的准确性、稳定性、振幅大小等
主要内容：具体操作步骤
1. 仪器应放在稳固台面上;
2. 使用前应校准转速,即打开仪器调节转速为一固定值,用秒表计时器计时,并记录转;数,用转数/时间得出转速,如与固定值相差在一定范围内,可用;
3. 仪器应由低速至高速启动,确保所旋转物品不漏液,不易碎;
4. 仪器旋转时,请勿用手或其他物品触摸,防止危险发生;
5. 使用完毕先把转速关为零,再关闭电源;
6. 保持仪器清洁。
参考文献：台式振荡器使用说明书
3移液枪标准操作规程（sop）
关键词：移液枪，标准操作规程
目的：本SOP是用来指导如何正确使用移液枪进行移液操作
实施人：使用移液枪进行移液操作的所有人员
质量控制：由试验人在操作时，进行使用时控制；另外，实验室主管负责仪器总体控制
校准周期：一般6个月进行校准一次。校准的项目主要为体积准确性、重复性等
主要内容：具体操作步骤：
1． 操作使用者应先试用，用20℃的水和天平。即吸取一定体积20℃的水，放入天平中称重，反复几十次，计算出相对标准偏差RSD值，在一定范围内合格，注意掌握力度；
2． 用时确保不漏气；如发现有移液不准确的移液枪应立即标明，查明原因前不得再用。
参考文献：实验室手册
原创：公司制订
名称：凝点测定 标准操作规程(SOP)
关键词：凝点 标准操作规程
目的：建立凝点测定的标准操作规程，保证药品的质量。
背景知识：略
原理：略
主体内容：
5程序
5.1仪器装置：参见《中华人民共和国药典》2005年版一部附录第39页。
5.2测定方法
5.2.1供试品：如为液体，则量取15ml；如为固体，则称取15～20g，加微温使熔融。
5.2.2 操作步骤 取供试品置内管中，使迅速冷却，并测定供试品的近似凝点。再将内管置较近似凝点约高5～10℃的水浴中，使凝结物仅剩极微量未熔融。将仪器安装妥当，烧杯中加入较供试品近似凝点约低5℃的水或其他适宜的冷却液。用搅拌器不断搅拌供试品，每隔30秒钟观察温度1次，至液体开始凝结，停止搅拌并每隔5～10秒钟观察温度1次，至温度计的汞柱在一点能停留约1分钟不变，或微上升至最高温度后停留约1分钟不变，即将该温度作为供试品的凝点。
5.3附注：如某些药品在一般冷却条件下不易凝固者，需另用少量供试品在较低温度使凝固后，取少量作为母晶加到供试品中，方能测出其凝点。
主要参考文献：《中华人民共和国药典》2005年版一部
原创：公司制订
名称：洁净室沉降菌测试标准操作规程
关键词： 沉降菌 标准操作规程
目的：建立洁净室中沉降菌的测试标准操作规程。
背景知识：略
原理：略
主体内容：
1目的：建立洁净室中沉降菌的测试标准操作规程，保证药品在规定洁净级别内进行生产。
2范围：洁净室的沉降菌的监测。
3依据：国家标准GB/T 16294-1996。
4职责：QA洁净度监测人员、微生物检验人员对本制度的实施负责。
5内容
5.1洁净室：对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。
5.2洁净工作台：一种工作台或者与之类似的一个封闭围挡工作区。其特点是自身能够供给经过过滤的空气或气体，如垂直层流洁净罩、水平层流罩、垂直层流洁净工作台、水平层流洁净工作台、自净器等。
5.3洁净度：洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径悬浮粒子的允许统计数。
5.4菌落：细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。通常用个数表示。
5.5测试方法
5.5.1方法概述：本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经48小时以上培养，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室的洁净度。
5.5.2所用的仪器和设备
5.5.2.1高压消毒锅：使用时参照文件GZ-ZL-SOP-066-00进行操作。
5.5.2.2恒温培养箱：必须定期对培养箱的温度计进行检定。
5.5.2.3培养皿：一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20分钟。
5.5.2.4培养基：普通营养琼脂培养基。将培养基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条
件下将培养基注入培养皿，每皿约15m1。待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入30～35℃恒温培养箱中培养数小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2～8℃的环境中存放。
5.5.3测试步骤
5.5.3.1采样方法：将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上盖后倒置。
5.5.3.2培养：全部采样结束，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。在30～35℃培养，时间不少于48小时。每批培养基应有对照试验，检查培养基本身是否污染，可每批选定3只培养皿作对照培养。
5.5.3.3菌落计数：用肉眼直接计数，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。
5.6注意事项
4.6.1测试用具要做灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。
5.6.2采取一切措施防止人为对样本的污染。
5.6.3对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。
5.6.4由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。
5.6.5采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。
5.7测试规则
5.7.1测试状态
5.7.1.1沉降菌测试前：被测试洁净室（区）的温湿度须达到规定的要求，静压差、必须控制在规定值内。被测试洁净室（区）已消毒。
5.7.1.2测试状态有静态和动态两种，并在报告中注明测试状态。
5.7.1.3测试人员：测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。静态测试时，室内测试人员不得多于2个人。
5.7.2测试时间
5.7.2.1对单向流，如100级净化房间内及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始。
5.7.2.2对非单向流，如10000级、100000级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟开始。
5.8沉降菌计数
5.8.1最少采样点数目：可按表1确定。在满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数，见表2。
表1 最少采样点数目
面积(m2) 洁净度级别
100 10000 100000 300000
＜10 2～3 2 2 2
≥10～＜20 4 2 2 2
≥20～＜40 8 2 2 2
≥40～＜100 16 4 2 2
≥100～＜200 40 10 3 3
注：表中的面积对于单向流洁净室是指送风面积，对于非单向流洁净室是指房间面积。
表2 最少培养皿数
洁净度级别 所需Φ90mm培养皿数（以沉降0.5小时计）
100 14
10000 2
100000 2
300000 2
5.8.2采样点的布置：工作区测试点位置离地0.8～1.5m左右（略高于工作面）。可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点，采样点的布置应力求均匀，避免采样点在某 局部区域过于集中，某局部区域过于稀疏。
5.8.3记录：测试报告中应记录房间温度、相对湿度、压差、测试状态及测试数据。
5.8.4结果计算：用计数方法得出各个培养皿的菌落数。平均菌落数的计算见下式：
m1+m2+……+mn
平均菌落数m=
n
式中：m为平均菌落数；m1为1号培养皿菌落数；m2为2号培养皿菌落数；mn为n号培养皿菌落数；n为培养皿总数。
5.8.5结果评定：用平均菌落数判断洁净室的空气中的微生物。
5.8.6洁净室（区）内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准（见表3）。
5.8.7若某洁净室（区）的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先行消毒，然后重新测试两次，测试结果必须合格。
表3
洁净级别 100级 10000级 100000级 300000级
标准（平均） 1个/皿 3个/皿 10个/皿 15个/皿
主要参考文献：国家标准GB/T 16294-1996
原创：公司制订
名称：超声波清洗仪标准操作规程
关键词：超声波 清洗 标准操作规程
目的：建立超声波清洗仪的标准操作程序。
背景知识：略
原理：略
主体内容：
1目的：建立KQ-100A型超声波清洗仪的标准操作程序。
2范围：KQ-100A超声波清洗仪的使用。
3依据：《KQ-100A超声波清洗仪使用说明书》。
4职责：QC质检员对本标准的实施负责，QC主管负责监督。
5内容
5.1清洗槽内加入清洗液最低不得低于50mm，而最高不得超过80mm，同时还应将需加入的物品空间考虑进去。
5.2将需要清洗的物品放入清洗网架中，再把清洗网架放入清洗液中，绝对不能将物品直接放入清洗槽内，以免影响清洗效果和损坏仪器。
5.3将超声波清洗器插头插入220伏电源插座。
5.4按下ON电源开关，绿色开关电源指示灯亮起，表示电源正常，可以工作。
5.5根据物品的清洗要求，用温度控制器调节所需温度，温度指示灯亮起。加热器已加热至所需温度时，温度指示熄灭，加热器停止工作，当温度降至低于所需温度时将自动加热，温度指示灯亮起。
5.6当温度达到物品清洗要求时，可开启清洗定时器，定时时间根据产品清洗要求设置定时器的工作时间，定时器位置可在0～20分钟内任意调节，也可调在常通位置。一般清洗在10～20分钟，根据污垢去除的物件可适当延长清洗时间。
原创：公司制订
名称：生化培养箱标准操作规程
关键词：培养箱 标准操作规程
目的：建立生化培养箱的标准操作程序。
背景知识：略
原理：略
主体内容：
5内容
5.1使用方法
5.1.1通电：将本机电源插头插入电源插座中，按面板上电源开关，开关指示灯亮，表示电源己接通。
5.1.2按动面板上照明开关，开关指示灯亮，同时箱内照明灯点亮。再按一下，灯熄灭。
控温仪菜单操作在仪表运行状态，上主屏显示测量值，下副屏显示设定值。
5.1.3若要改变设定值，按一下SET键，此时副屏门锁，这时可按“ ”、“△”、“ ”键设置箱内所需的控温值。设置完毕后，再按SET键，此时仪表进入新设置的控制程序运行。
5.1.4上限报警设定：按住SET键数秒钟，待主屏显示RL1，副屏闪烁时，可按“ ”、“△”、“ ”键设置所需的上限报警值，再按SET键，设置完毕。
5.1.5下限报警设定：按住SET键数秒钟后，待主屏显示RL1，再按SET键主屏显示RL2，副屏闪烁，可按“ ”、“△”、“ ”键设置下限报警值，再按SET键，设置完毕。
5.1.6上、下限报警设定完毕后，按住SET数秒钟，待主屏显示测量值、副屏显示设定值后，仪器操作完毕，机器即进入正常。
5.2注意事项
5.2.1培养箱应经常保持清洁，切忌用酸、汽油、苯等之类的化学物品清洗箱内的任何部
件。
5.2.2在使用过程中，遇到突然停电时，应及时将电源插头拨下，至少待5分钟后方可重新通电启用。
5.2.3外壳必须有效接地，以保证使用安全。
Biometra Tg PCR仪使用操作说明
关键词：Biometra Tg PCR仪操作
目的：方便使用该仪器行PCR扩增
背景知识：无
原理：略
操作步骤：
编辑一个程序
按[C programs]进入编辑模式。
要在主目录中创建一个程序请按[D enter]。
要进入一个子目录，用→键将光标向右移动，然后用↑↓键选择一个子目录。选择的目录会以强光突出出来。按[D enter]进入选择的子目录。
按[A list]浏览该目录下所有已建立文档和空文档的列表。
用↑↓键在列表中滚动，然后用[D enter]确认其中一个记忆库
您现在可以输入热盖的温度了。
一般来说，盖子的温度应该比程序中的最高温高10 ℃。
完成了所有的预先设置之后，按[Denter]打开设置页。
在这个设置页中，您可以输入您的循环中需要的所有参数。
设置页：
Temp[ ℃] time ← # gradient options →
1:
2:
3:
4:
A ? B insert/delete C pgm ok D enter
每一个设置都用[D enter]来确认。光标将自动移动到下一个区域。您也可以通过向前移动光标键来确认一个数值。
现在输入协议中第一档的温度：
用[D enter]确认温度。
为其输入时间，用小数点来间隔。顺序为h.m.s。
用[D enter]确认时间设置，或者用光标键移动到下一个区域。
在Gradient下输入梯度的范围，最大梯度为40℃
循环是通过选择返回循环的目标和返回循环的次数来定义的。在用←标记的列中，您可以选择返回循环的目标档。
＃表示循环的次数。
设定循环值=总循环值-1，即，总循环数为30时应输入“29”。
用[C pgm ok]来储存一个完整的程序。程序数据永久的储存在记忆中：
运行程序
按[B start/stop]选择一个程序。
用→↑↓键选择一个子目录，或者用[D enter]进入主目录。
输入您想要启动的程序的号码。或者，按[A list]在该子目录中的所
有程序的列表中选择一个程序。用↑↓键在列表中滚动选择。
用[D enter]确认用强光突出的程序。
按[D start]启动程序。
察看运行状态
程序开始后可通过按A(Inf)来察看程序的运行步骤和剩余时间。梯度
功能开始运行时可通过按A(Inf) →A（gradient）来观察各孔的实际温度。
注意事项
1.盖上热盖后，顺时针旋转,听到咔嗒声即可。试验结束开盖时请先逆时针旋转两圈，释放压力后再扳开关。
2.在BLOCK的四个角放入四个PCR管以保证热盖压力均衡。
3.务必确保PCR仪底部(网格部分)的清洁，没有被灰尘或
其他物质堵塞。
4.使用结束，待仪器降到室温后再将电源关闭（风扇自动关闭）
主要参考文献：实验室使用及网上搜索
名称：男科学实验室诊断标准化(黄宇烽，陆金春)
关键词：男科学 诊断
目的：加强实验室管理
主体内容
精液分析是评价男性生育能力的最基本检验手段。理论上，精液分析是一个很简单的操作过程，只要将一滴精液置于玻片上，进而确定其相关参数即可。然而，实际上，精液分析所得的每一个参数都需要大量的专业知识、细致认真的操作及必要的质量控制措施。
许多研究显示，精液分析结果变异很大，而且这种变异可能由于缺乏质量控制而被长期忽视。 Keel等报告了美国纽约、哥伦比亚、洛山矶、明尼苏达几百家男科实验室对精子浓度、形态学、活率及抗精子抗体的室间质量控制结果，精子浓度的结果显示，一份精液标本的精子浓度差异范围达3~492×106 /ml，手工检测的变异系数（CV）为30% ~ 138%，计算机辅助的精液分析（CASA）的CV为24% ~ 99%。不同实验室精子浓度的较大差异提示，精子计数方法的不同、计数池种类的不同以及操作的标准化对精子计数结果有着直接的影响。
一 精子浓度分析
1、精液检测工具不断更新
（1）血细胞计数板 沿用50余年
（2）Makler精子计数板 1978年以色列Makler发明
（3）Macro精子计数板
（4）Microcell计数池 1990年由Ginabury和Armand发
明的一次性使用计数板
（5） Cell-VU计数池 2004年，美国Millennium
Sciences公司产品
2、计算机辅助的精液分析
80年代发展的新技术，除可分析精子密度外，还可分析精子活动百分率等指标，在分析精子运动能力方面显示了其独特的优越性。
用已知浓度的乳胶珠溶液对目前国际上常用的３种精子计数池进行了评价。
1 材料与方法
2 结果
Cell-VU计数池的浓度最接近标准乳胶珠的浓度，相对误差（RE）分别为7.51%和1.22%，而血球计数池的RE分别为22.11%和13.78%，Makler计数池的RE分别为52.91%和38.72%。
提示，Cell-VU计数池计数结果最准确，而血球计数池和Makler计数池计数结果明显偏高，尤以Makler计数池与标准乳胶珠浓度相差最大，差异达52.91%。
精子计数是男科实验室目前考虑较多的质控项目之一，目前最大的挑战来自精子计数方法学的标准化和监测。本研究显示，Cell-VU计数池的准确性和精确性均优于血球计数池和Makler计数池。而且，Cell-VU可一次性或反复多次使用，这在计数传染性较强的样本时将显示出独特的优势。
因此，我们建议要建立一个标准的计数池操作系统用于所有实验室，从而为不同实验室的质量控制评价提供基础，最终提高所有实验室结果的准确性和可靠性。Cell-VU应是此标准计数池的最佳选择。
二、精子活动率和形态学检测
目前有两种方法：手工和CASA；
手工：主观性太强
CASA：仪器型号较多，原理也不一样，所以结果有所差异。但比较客观。
形态学：与染色方法密切相关
三、精浆生化的检测
精浆中的一些生化标志可反映男性附属性腺、附睾及睾丸生精功能等，有利于综合评价不育的发病原因和机制。目前对精浆生化项目的质量控制尚未见报道。
例如，谷氨酰转肽酶和酸性磷酸酶可反映前列腺功能，其中的酸性磷酸酶检测已成为男科实验室的常规检查，常用磷酸苯二钠法；
果糖可反映精囊腺功能，常用间苯二酚法检测果糖；
游离左旋肉毒碱和α-葡糖苷酶可反映附睾功能。
精浆α葡糖苷酶检测标准化和质量控制的初步研究
评价精浆α-葡糖苷酶检测中离心速度、禁欲时间、以及冻融对精浆α-葡糖苷酶水平的影响，为精浆α-葡糖苷酶检测实现标准化及实验室内部和实验室之间的质量控制提供指导。
材料与方法
试剂和仪器
标本处理与分组
精子浓度的分析
精浆总α-葡糖苷酶活性的检测
精浆冻融后的α葡糖苷酶活性的检测
统计学分析
结 果
不同速度离心后的精浆中α-葡糖苷酶水平 见表1、图1。2 000 r/min离心后的精浆与3 500 r/min离心后的精浆中α-葡糖苷酶水平有显著性差异（P = 0.001）。
结 果
不同速度离心后的精浆中精子浓度的比较 精液经2 000 r/min离心10 min后，84.31%（43/51）的精浆含有精子，平均精子密度为(2.43±3.95)×106/ml，而经3 500 r/min离心15 min后，23.53%（12/51）的精浆含有精子，平均精子密度为（0.22±0.87）×106/ml，结果见图2。
结 果
冻融后的精浆α葡糖苷酶的检测结果 见表2、图3-5。所有6份标本加与不加PMSF对α-葡糖苷酶活性检测没有影响（P>0.05）。连续20天（隔一天检测一次）的检测结果表明，6份标本的CV为2.22% ~ 5.29%。
结 果
不同速度离心后的精浆中α-葡糖苷酶水平与禁欲时间的关系 见表3、图6。
结 果
2 000 r/min离心后的精浆及3 500 r/min离心后的精浆中α-葡糖苷酶水平与禁欲时间之间的相关系数（r）分别为0.538和0.486(P均<0.001)。提示，随着禁欲时间的延长，精浆α-葡糖苷酶水平不断升高。
讨 论——结论一
在精浆α-葡糖苷酶的检测中，应该注意离心速度对结果的影响，本研究显示，要想得到单纯的精浆，离心速度不得低于3 500 r/min，只有如此，各实验室之间的检测结果才具有可比性。
讨 论——结论二
精浆α-葡糖苷酶水平检测的最佳禁欲时间最好为4 ~ 7天，即精浆α-葡糖苷酶检测中禁欲时间亦应标准化，应规定为4 ~ 7天。
讨 论——结论三
对α-葡糖苷酶活性检测来说，冷藏精浆标本可作为不同实验室之间的质控品。
精浆果糖测定标准化与质量控制的初步研究
评价精浆果糖检测中果糖标准液、离心速度、精液和精浆放置时间、冻融以及糜蛋白酶对精浆果糖浓度的影响。
结 果
果糖标准液吸光度的监测 果糖标准液连续监测35天的吸光度（OD）值见图1。果糖标准液在配置后的最初2周内OD值变异相对较大，在随后的2周内OD值有所降低但相对稳定，约1个月后OD值进一步降低，而且降低速度较快。
结 果
精液放置时间对果糖浓度的影响 48份精液标本液化后立即（0 h组）、2 h（2 h组）和4 h（4 h组）后3 500 r/min离心15 min分离精浆，所得果糖浓度见表2。随着精液放置时间的延长，精浆果糖不断降低，精液放置2 h后离心所得的精浆果糖浓度显著低于0 h组，放置4 h后离心所得的精浆浓度显著低于0和2 h组。
结 果
研究发现，精液放置后果糖浓度的降低与精子浓度和活动率密切相关。将每份标本0、2、4 h的果糖值通过Excell作图求出斜率（K），以代表每份精液标本果糖的降低速率；将每份精液的活动率乘以精子浓度得到活动精子浓度，两者进行Pearson相关性分析，r = 0.374，P = 0.009，提示精液果糖浓度的降低与活动精子浓度呈显著正相关。结果见图2。
结 果
不同速度离心后的精浆精子浓度有极显著差异（t = 7.546，P = 0.000），但精浆果糖浓度未见明显差异（t = -1.369，P = 0.176）。
糜蛋白酶对精浆果糖检测没有明显影响。
冻融对精浆果糖水平没有明显的影响。
结论——精浆果糖测定必须被标准化
果糖标准液应4℃放置2周后再使用，而且使用期限约为2周即需更换
精液液化后应立即离心将精子和精浆分开，否则活动精子会消耗果糖而使浓度降低
对于不液化精液样本，可预先加入1%体积的10 mg/ml糜蛋白酶37℃孵育30 min后再检测，精浆果糖浓度不会受影响
离心速度对精浆果糖浓度结果的影响尽管不大，但残余的精子或其它非细胞组分可能会轻度影响果糖浓度
冻融精浆可以作为监测不同实验室果糖检测的质控品
精浆酸性磷酸酶测定的标准化与质量控制的初步研究
批内和批间变异均较大，不适宜在临床上开展；
GGT与ACP都来自前列腺，两者高度相关
作为评价前列腺功能的指标，GGT显著优于ACP
四、精子功能测定
（1）传统经典的“仓鼠卵穿刺实验”
（2）精子-宫颈粘液穿透试验
（3）毛细管穿透试验
（4） 吖啶橙染色
（5）低渗肿胀试验
五、生精细胞检查
精液中除成熟的精子外，亦可见未成熟的生精细胞，包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、早期和晚期精子细胞等
生精细胞检查方法：
染色法
荧光原位杂交
单克隆抗体免疫组化法
流式细胞术
生精细胞凋亡检测方法
TUNEL法
流式细胞术（FCM）FCM具有快速、准确、客观、可靠等优点，可反映精液的整体状况，具有广阔的应用前景
六、白细胞精子症的检测
精液白细胞数>1×106/ml，可诊断为白细胞精子症。
白细胞可通过吞噬作用、产生活性氧（ROS）、分泌一些细胞因子等途径使精子损伤。
精液中白细胞的检测方法；
1、对ROS的检测：依赖鲁米诺的化学发光分析法
2、直接镜检法
3、瑞-姬染色或巴氏染色法染色
4、过氧化物酶染色法（正甲苯胺兰、联苯胺及邻甲苯胺过氧化物酶染色）
5、荧光原位杂交法
6、免疫细胞化学法 CD45，CD4，CD8
7、弹性蛋白酶、IL-8及溶菌酶测定
七、免疫性不育的检测
检测方法很多，最常见为ELISA法、MAR法和IBT法，但不同方法的阳性率相差很大，不同实验室的结果差异也很大，我们对目前国内4家公司的检测结果显示，阳性率为8%~70%。
八、生殖道感染的检测
大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、绿脓杆菌、淋球菌、肺炎克雷伯氏菌、结核杆菌、衣原体、支原体、单纯疱疹病毒、人乳头瘤病毒、腺相关病毒、阴道毛滴虫等皆可感染生殖道，而且可致不育。
病毒多用ELISA法检测各种病毒的抗体；
检测沙眼衣原体感染的方法主要有金标法、ELISA法及培养法，尤以ELISA法最为常用；
解脲支原体多采用培养法检测。
九、精浆细胞因子的检测
精浆细胞因子由男性泌尿生殖道内的各种细胞分泌，包括转化生长因子（TGF）、表皮生长因子（EGF）、肿瘤坏死因子（TNF）、各种白细胞介素（IL）及某些可溶性受体等。目前认为，与男性不育有关的细胞因子主要有IL-6和IL-8，不育病人精浆中IL-6和IL-8水平明显高于生育力正常的男性。
测定IL-6和IL-8的方法有：生物学方法、分子生物学方法和免疫学方法，以免疫学方法多用，尤以ELISA和RIA常用。
十、精子发生相关基因的检测
与精子发生相关的基因很多，目前认为在三个区域均存在AZF，分别为AZFa，AZFb，AZFc：
AZFa：Sy84,Sy86
AZFb：Sy142,Sy147
AZFa：DAZ (Sy254,Sy255)
十一、遗传学检测
男性不育的遗传学检测主要是检测精子染色体的异常。
常规使用染色体显带技术，如G带、Q带等技术，然而其敏感度不及FISH技术。
FISH技术可用于研究复杂染色体突变如性染色体异常、未知的小标志物、环状染色体、嵌合体及易位等。
结 论
男性不育是最常见的而且可以鉴定的人类生育失败的原因之一。尽管对精子生理学和精子与配子相互作用的生物学过程的研究已取得很大进展，各种各样的检测方法层出不穷，但目前更多的工作应着重于确定那些预言精子特征十分准确、与配子受精能力密切相关的临床男科诊断实验，并应对这些实验的客观性进行评价，这些实验应简便、经济实用、并提供一致的结果，而且应对它们标准化。
结 论
内部质量控制（IQC）和外部质量控制（EQC）对男科学实验室来说仍是空白。最近几年，世界上不少男科学家正在向男科学实验室引入EQC项目。要实现IQC和EQC，技术操作的标准化是前提，这就要求有精液参数测定的客观方法。目前这样的方法正被建立和评价。有了严格的IQC和EQC，不同实验室将有可能获得准确和可比较的结果。然而，精液的特殊性和精液量的有限性限制了QC样品的制备，尤其是针对全国性的大规模的EQC项目，这样的质控品更加难以得到。
结 论
我们相信，经过男科学家的共同努力，利用混合精液和适当的处理方法，经过系列培训及操作的标准化，精液检测的质控有望在国内推广并引起国际男科学实验室研究人员的广泛重视，前景还是比较乐观的。
原创
PE433A固相多肽合成仪操作规程
关键词（必填项目）：固相多肽合成仪
目的（必填项目）：正确使用PE433A固相多肽合成仪，确保结果的准确
背景知识（选填项目）：无
主要内容:
1.接通电源，确认电压为220V，高纯氮钢瓶高压>10公斤，低压为4.55公斤，特别注意避免虚假低压。
2.系统、9#瓶、10#瓶、活化腔、反应腔、装药空瓶检漏，下阀压力为11psi，上阀压力为3psi。关闭阀门后压力下降应<0.30psi/3min。装药空瓶应注意去除铝盖中央的小圆片。
3.装上合成试剂瓶，注意瓶内试剂是否够合成用量，密封圈是否合适。使计算机和主机联系上。
4.测量各合成试剂瓶的流速。调节下阀使各瓶流速符合规定值。最后计算时间修正值T。
5.在计算机上编辑多肽序列，由N端到C端。从ABI Chemistry 中选择所需的合成方法。计算机存储后，将这些资料送入主机，并在主机上改正T值。
6.主机自检后，定标黑色斑马条纹，定标值应为0-4096。
7.装上氨基酸药瓶，瓶铝盖中央的小圆铝片去掉，条码朝里，检查排放顺序是否符合编辑的多肽序列。
8.多肽合成开始前再复核前面的顺序，是否有遗漏。并检查：废液瓶是否太满，钢瓶高压、低压是否合适，上阀、下阀压力是否正确，滤片是否需更换，阀门开关是否处于press use状态。
9.按下主机菜单的begin开关，开始合成多肽。合成时室温为18-25℃。
10.合成完毕后，用9#和10#瓶的溶剂和钢瓶氮气冲洗系统。卸下所有的合成试剂瓶，并加盖密封，换上干净的空瓶。阀门开关处于Vent位置，再关主机。
主要参考文献：选填项目：
原创
WBS-100比浊法微生物效价测量仪标准操作规程(SOP)。
关键词：比浊法微生物效价测量仪, 标准操作规程。
目的：本SOP是用来指导如何正确使用WBS-100比浊法微生物效价测量仪进行操作。
主要内容：
1.接通仪器电源，使用电子钥匙开启仪器。
2.出现用户登录界面后，点“确认”按钮进入仪器主菜单。
3.在出现的主菜单中点“工具”按钮，进入工具菜单界面。
4.每天第一次实验在时仪器需要预热，按“预热培养箱”按钮，进入培养箱预热选项，再按“启动预热”按钮，启动预热。
5.室温25℃时预热时间约半小时，然后按“退出”按钮，回到主菜单。
6.在出现的主菜单中点“新建”按钮，建立一个新的实验。
7.在创建实验对话框中，按“添加”按钮，添加一个新实验。
8.选择实验方法中的“二剂量文档”，并填写“文件名”，然后按“下一步”按钮。
9.在接下来出现的实验步骤一中，按照各项提示进行样品信息设定，如需要修改各项内容则需按输入框右面的“编辑”按钮，在出现的输入界面中选择相应的输入法进行输入，输入完毕后点“OK”按钮确认输入内容，各项填写完毕后。按“下一步”按钮。
10.接下来出现实验步骤二的设定，其设定内容依据样品及标准品的实际情况设定，其中灰色框为不可输入框，在此无效，填写完毕后按“下一步”按钮，继续实验。
11.在停止条件界面中，可以对实验停止条件进行设定，实验停止条件包括“时间停止”和“时间+吸光度停止”两种，当选择时间停止时实验到达规定时间后即停止，当选择时间+吸光度停止时，实验到达相应吸光度范围或到达所规定的时间时均会停止。设定完毕后即可按“下一步”按钮，进入下一步设定。
12.接下来进入环境参数设定及振摇参数设定界面，可以进行培养温度、振摇、实时监控及振摇频率的设置，具体值可根据实验需要进行设定，一般情况下，振摇间隔时间设定为5分钟，单次振摇时间设定为30秒，检测间隔时间设定为15分钟，振摇频率设定为2。设定完毕后按“下一步”按钮，可进入下一步设定。
13.进入比色皿矩阵设置后，可以根据所做的实验情况选择默认的实验参数，其中“方法一”是单组在左边时的拉丁方排列，“方法二”是单组在右边的拉丁方排列，“方法三”是双组拉丁方排列。“方法四”和“方法五”是与校正有关的排列，一般不用。选择好合适的排列方法后即可按“完成”返回创建实验界面。
14.此时可以按“开始实验”按钮，启动实验过程。
15.实验完毕后仪器自动打印报告（如中途需要提前停止实验，则应点“提前完成”按钮，此时仪器自动停止此次实验，最后保存实验结果。），全部实验完毕后即可按主界面右上角的“关闭”按钮，关闭仪器。
原创：公司制订
名称：菌落计数器 标准操作规程(SOP)
关键词：菌落 计数器 标准操作规程
目的：建立菌落计数器的标准操作程序。
背景知识：略
原理：略
主体内容：
5内容
5.1使用方法
5.1.1将电源插头插入220V电源插座内。将探笔插入仪器上的探笔插孔内。
5.1.2将电源开关拨向“开”，计数池内灯亮。同时显示窗内显示明亮的“000”，表示允许进行计数。
5.1.3将待检的培养皿皿底朝上放入计数池内。用探笔在培养皿底面对所有的菌落逐个点数。此时，菌落处被标上颜色，显示窗内数字自动累加。
5.1.4用放大镜仔细检查，确认点数无遗漏，计数即已完毕。
5.1.5显示窗内的数字即为该培养皿内的菌落数。
5.1.6记录数字后取出培养皿。按“复0”按钮，显示恢复“000”，为另一培养皿的计数做好准备。
5.2注意事项
5.2.1仪器应放置在平整牢固的试验台上使用。
5.2.2点数菌落时，探笔不要过于倾斜，轻轻点下至有弹跳感时，数字即被输入。
5.2.3仪器应防潮、防强烈震动、防直接日光曝晒、防酸碱侵蚀，用后应加防尘罩。
5.2.4注意防止细菌培养物污染计数池。
5.2.5仪器及探笔均不得随意拆卸，若发现故障，应请有经验的技术人员检修。
5.2.6仪器使用后或放置长时间后放大镜表面会有灰尘，选用纯化水稍清洗，然后用镜头纸擦拭干净待用。
主要参考文献：《TYJ-2A型菌落计数器使用说明书》
原创：公司制订
名称：水分测定仪标准操作规程(SOP)
关键词：水分 测定仪 标准操作规程
目的：建立水分测定仪的标准操作程序。
背景知识：略
原理：略
主体内容：
5内容
5.1主要技术参数
最大载荷：10g。 定时器范围：0～30分钟。
微分标尺分度值：5mg。 恒温精度：±20℃。
微分标尺读数范围：0～1g。 水分测定准确性：±0.2%。
调温范围：80～160℃。
5.2使用方法
5.2.1干燥处理：在红外线的辐射下，秤盘和秤盘架部件表面吸附的水分也会受热蒸发，它直接影响测试精度，因此在工作前必须对秤盘和秤盘架进行干燥处理（干燥处理只要把需用的秤盘放进干燥箱内，斜靠在两边的壁上进行加热，去除吸附的水分）。
5.2.2试样物质的称重：试样物质的称重必须在常温下进行，取样可以采取以下两种方法。
5.2.3仪器经干燥处理冷却到常温后，用10g砝码校正天平零位，然后对试样物质进行称量，按选定的量值把试样物质全部称好，放置在备用秤盘或其他容器内（试样物重量不允许超过10g）。
5.2.4选用精度不低于5mg的天平称试样物重量，这种取样方法尤其适用于生产工艺过程中的连续测试工作，能大大加快测试速度。
5.2.5预热调零：由于天平是不等臂上皿式，工作时秤盘在干燥箱内上下运动，时间一长，干燥箱内秤架热量会传至横梁一端，使横梁一臂受热产生膨胀伸长，改变常温下平衡力矩，使天平零位改变，产生天平误差。
消除误差方法：在加码盘内加上10g砝码，按下红外线灯电源开关，20分钟后再开启天平，观察投影屏上的刻线不再移动时即可校正天平零位。天平经预热校正后的零位，在连续测试中不能再任意校正，如果产生怀疑，应按上述方法重新校正。每次测试结束后，取下试样，在秤盘上放10g砝码，这时再观察天平零位平衡值与测试前平衡之差，此值应折合在含水率上。
5.2.6加热测试：天平经预热调零后，取下l0g砝码，把预先称好的试样物质均匀地倒在秤盘内（当试样重量在l0g以下时，应在加码盘内加适量的平衡砝码，使天平平衡），然后对试样物质进行加热（加热时天平可关闭，待设定时间至再开启天平，这样使天平刀子不容易磨损，并且保证了天平的再现性）。
5.2.7在使用10g或5g的定量试样时，若样品含水量不大于1g，可在投影屏内直接读取试样的含水率；若样品的含水量大于1g时，应关闭天平在加码盘上添加1g砝码后，继续测试。
5.2.8如果试样物质在加温很长时间里仍达不到恒重点，一般有二种可能：
5.2.8.1试样温度偏低，水分蒸发缓慢；
5.2.8.2试样温度偏高，在试样中游离水蒸发的同时，试样物质本身挥发或分解，甚至被溶化。因此试样的温度和时间是测定水分正确性关键，在试样的失重曲线上会有一段恒重点，可用低温加热使这段恒重点、适当延长，便于观察和掌握读数的时间。
5.2.9温度控制器的使用：旋转调温旋钮，开始时可将调温旋钮旋到最大位置（10分钟），使温度迅速上升，然后根据不同试样物质的温度，将调温旋钮向小的方向旋转，逐渐微调到某刻线，同时观察温度计指示值是否达到要求。设定温度误差超过±20℃时，可继续旋转调温旋钮，直至温度到达设定温度，此时红外线灯由亮变暗淡，又由暗淡变亮，如此反复，这说明温度控制器在自动控制温度（由于控制器采用半导体热敏电阻，其特性是非线性，因此调温旋钮所指示的刻度为非温度指数，正确值应以温度计指示为准）。
5.2.10定时器的使用：定时器设定范围为0～30分钟，使用时可根据试样干燥所需时间进行设定，定时器旋钮所指的刻线每格约1分钟左右。定好后。定时器旋钮自动转回，转到零位时，蜂鸣报警，旋钮向红点处旋转，报警消除。
5.3读数及计算：天平的微分标尺共有刻度200个分度（不包括两端的辅助线），在标尺的垂直方向上有三组数值，即代表三种不同量值。
a.左起第一组：适用于10g定量的试样测定，每分度（含水率百分数）为0.05%，200个分度合计为10%。
b.左起第二组：适用于5g定量的试样测定，每分度（含水率百分数）为0.01%，200个分度合计为20%。
c.右起第一组：适用于取样在10g以下的任意试样重量测定，分度值为0.005g，200分度合计为1g。
当使用10g或5g定量测定时：若10g含水率小于10%、5g含水率小于20%，可直接在微分标尺显示上读取。当10g含水率超过10%、5g超过20%，则应在加码盘上加上1g砝码（在10g定量测定时，1g砝码等于10%；当5g定量测定时，1g砝码等于20%）。此时加码上添加砝码应与微分标尺显示的百分比相加（见例一、例二）。当使用10g以下任意重量的测试公式：
W1 - W2
M= ×100%
W1
式中：M——含水率(%)；W1——烘干前样品重量；W2——烘干后样品重量。
例1 设：试样重量为10g，在左起一组上经过烘干后微分标尺显示值读得量值为0.5%，加码盘上添加砝码为2g，其含水率为：M=0.5%+20%
例2 设：试样重量为5g，在左起第二组上经过烘干后微分标尺显示值读得量值为1%，加码盘上添加砝码为1g，其含水率为：M=1%+20%
例3 设：试样重量为4g，在右起第一组上经过烘干后微分标尺显示值读得量值为0.05g，其含水率为：
4-3.95
M= ×100% = 0.8%
4
例4 设：试样重量为4g，在在右起第一组上经过烘干后微分标尺显示值读得量值为0.05g，加码盘上添加砝码为1g，其含水率为：
4-(3.95-1)
M= ×100% = 26.25%
4
例1和例4证明：使用定量10g、5g测试方法，只要将加码盘上添加砝码量同标尺显示的量值累加即可，计算十分方便。
操作者可以通过试验，根据被测试样物质的性能，对试样重量、温度、加热时间等进行选定，得出一套切合实际的基本测试工艺，以减少测试中不必要的误差。
5.4衡量完毕后，应将被测物质或砝码取下，不可留置盘中。
5.5仪器的维护保养
5.5.1仪器的主件、横梁上各个零件（除平衡螺母外）不可任意旋动、拆卸，以免仪器损坏。
5.5.2仪器应经常保持清洁，避免灰尘及棉毛纤维等粘在天平上，以免影响天平的准确性，使用完毕后应套上防尘罩，仪器暂时不使用应放硅胶干燥剂。
5.5.3当光学零件上有灰尘时，应先用软毛刷刷去灰尘，然后用擦镜纸揩试，严禁用手去抚摸光学零件。等重秤盘每次使用后应清洗干净，晾干待用。砝码每次使用后用擦净纸擦拭后放入砝码盒。
5.5.4切勿有杂物落进磁阻尼器中，以免影响天平的准确性。
5.5.5仪器的计量性能和等重秤盘、砝码等应根据使用频繁程度定期检查。
主要参考文献：《SH-10(A)水份测定仪使用说明书》
原创：公司制订
名称：液体比重天平标准操作规程(SOP)
关键词：液体比重天平 标准操作规程
目的：建立液体比重天平的标准操作程序。
背景知识：略
原理：略
主体内容：
5内容
5.1主要技术参数
5.1.1测锤标准温度：20℃
5.1.2测定液体的最大比重：2.0000
5.1.3准确性：0.001
5.2安装和调试
5.2.1天平经开箱拆包后，小心做好清洁工作，尤其是各刀刃及玛瑙刀座，应用手帕、软刷轻拭清洁，严禁使用粗布、硬刷，并须防止擦伤撞坏。
5.2.2将天平安装在温度正常的室内（约20℃），不能再一个方向受冷或受热，同时应免受气流、振动、强力磁源等的影响，并安装在牢固的工作台上。
5.2.3使用时先将盒内各种零件顺次取出，将测锤、弯头温度表和玻璃量筒用酒精揩净，再将支柱紧定螺钉旋松，托架升至适当高度后旋紧螺钉。横梁置于托架之玛瑙刀座上。用等重砝码挂于横梁右端之小钩上，旋动水平调整脚，使横梁上的指针尖与托盘指针尖两尖对准，以示平衡。如无法调节平衡时，首先将平衡调节器上的定位小螺钉松开，然后略微转动平衡调节器，直至平衡为止。再将中间定位螺钉旋紧，严防松动。
5.2.4将等重砝码取下，换上整套测锤，此时必须保持平衡状态，但允许有±0.0005的误差存在。如果天平灵敏度高，则将重心砣旋低，反之旋高。
5.2.5天平安装后，应检查各部件位置是否正确，待横梁正常摆动后方可认为安装完毕。
5.3使用和维护
5.3.1天平应调整平衡后方可使用。
5.3.2将需要测试的液体放入玻璃量筒内，进行测试。
5.3.3将测锤进入玻璃量筒内的液体中，此时横梁失去平衡，在横梁V型槽与小钩上应加放各种骑码使天平恢复平衡，这时横梁V型槽和小钩上的骑码总和即是侧的液体的比重数值。
5.3.4读数方法
横梁上V型槽与各种骑码的关系皆为十进位。依次类推：
骑码放在各个位置上 骑码（砝码）的名义值及其代表的数值
5g 500mg 50mg 5mg
放在第十位（小钩上）时则为 1 0.1 0.01 0.001
放在第九位（横梁V型槽上）时则为 0.9 0.09 0.009 0.0009
放在第八位（横梁V型槽上）时则为 0.8 0.08 0.008 0.0008
例如：测锤浸没入20℃之水中时，加上各种骑码使衡量平衡，所加之骑码为5g、500mg、50mg、5mg，加在横梁之V型槽位置第七位、第六位、第四位、第二位，即可直接读出当时之比重为0.7642。
5.3.5液体测定完毕，应将横梁V型槽和小钩上的骑码全部取下，不可留置横梁V槽和小钩上。
5.3.6当天平要移动位置时，应把易于分离的零件、部件及横梁等拆卸分离，以免损坏刀子。
5.3.7根据使用的频繁程度，要定期进行清洁工作和计量性能检定。当发现天平失真或有疑问时，在未清除故障前应停止使用，待修理检定合格后方可使用。
主要参考文献：《PZ-AB-5型液体比重天平使用说明书》
原创：公司制订
名称：尘埃粒子计数器标准操作规程(SOP)
关键词：尘埃粒子 计数器 标准操作规程
目的：建立尘埃粒子计数器的标准操作程序。
背景知识：略
原理：略
主体内容：
5内容
5.1使用环境条件
供电电源：～220V±10%。 温度：10～30℃。
湿度：20～75%。 自净时间：≤20min。
允许最大采样浓度：35000颗/L（尘埃颗粒粒径0.5μm），采样空气中不得含有酸碱等腐蚀性气体。
5.2屏幕显示说明
5.2.1开机画面（图1）
Y09-6激光尘埃粒子计数器苏净集团自动化仪器设备分公司TEL：0512-65331656
5.2.2观察画面（图2）
Print:OFF Flow:0.00 AlarmSave:OFF Page: < OFF >-----------------------------------------------------------------------------2000/06/06 12:12 Period:0600.3μm 000000 0000000.5μm 000000 0000001.0μm 000000 0000002.0μm 000000 0000003.0μm 000000 0000005.0μm 000000 000000
屏幕横线上方小字为系统状态条：
显示打印机开/关状态、采样泵开/关状态、保存开/关状态、保存的页号、报警状态。
屏幕横线下方小字为系统时间、采样周期及采样周期倒计时。
屏幕横线下方大字显示采样的粒径、数据，右面为上一个采样周期数据，中间为当前即时采样数据。
5.2.3查询画面（图3）
2002/06/06 14:26 Page:001----------------------------------------------------Print:ON0.3μm 000000 0.5μm 000000 1.0μm 000000 2.0μm 000000 3.0μm 000000 5.0μm 000000
屏幕横线上方为数据储存的时间、页号。
屏幕横线下方为打印机开/关状态及存储的数据。
5.3功能说明
5.3.1换算——将2.83L采样数据换算成1m3采样数据，可按换算键。
5.3.2采样——用于开/关采样气泵，可按采样键。
采样泵开，流量显示为2.83； 采样泵关，流量显示为2.83。
5.3.3打印——用于开/关打印机，可按打印键。
按打印键，当打印机开时，在换算功能下当一个采样周期结束时，打印上一个采样周期数据，在查询功能下打印所有存储数据。如果在换算功能情况下打印机已开，而画面切换到查询状态下，则并不立即打印存储数据，而需要开关一次打印机才打印存储数据。
保存——用于存储采样数据。可按保存键。
按保存键启动保存功能。在一个采样周期结束时，存储该周期的采样数据，并将在屏幕状
态调上显示当前的存储的页号。最大存储数据为256，超过这一数据时，将自动删除最先存入的数据。
5.3.4查询——用于查询存储的采样数。
按查询键，画面进入查询状态（图3）。
按增键，上翻一页。
按减键，下翻一页。
5.3.5设置——用于设置时间、报警及采样周期。
5.3.5.1设置时间（图4）
日期时间设置2002/06/06 06:06
按设置键进入时间设置画面（图4）。
按增键修改数据。
按减键移动光标。
按设置键写入数据。
按清零键退出设置。
5.3.5.2设置报警：连续按设置键两次进入报警设置画面（图5）。
报警设置10000
按增键调整报警级别，每按一次报警级别增加一级。
按设置键写入报警级别。
按清零键退出设置。
OFF → 10 → 100 → 1000 → 10000 → 100000
↑ ↓
300000
注意：报警只在周期设置值为60S的整数倍时才起作用，显示画面见图7。
设置周期：连续按设置键三次进入周期设置画面（图6）。
周期设置060
按增键修改数据。
按减键移动光标。
按设置键写入周期值。
按清零键退出设置。
注意：周期设置范围为1～999，单位为S。
5.3.5.3清零：在换算状态下用于清除上一个采样周期的采样数据及当前即时数据，在查询状态下用于清除存储数据。在查询状态下若数据被清空，则显示无数据记录（图7）。
无数据记录
5.4打印机注意事项
安装纸卷：仪器出厂时已安装了大约可打印500组数据的纸卷，用户可直接使用。纸卷用完后，可按如下过程进行装纸：
5.4.1将仪器断电，拔去电源线。
5.4.2拧下顶盖上四只螺钉，将盖板轻轻反过来，平放在仪器上，注意不得拉松导线。
5.4.3逆时针拧下纸卷轴柱，轻轻按下打印机绿色的机头扳手。
5.4.4将纸卷端剪成梯形或三角形，打印面朝上，轻轻插入入纸口，从出纸口穿出，并轻轻拉出。注意热敏纸正反面，可用手指划线判断，有黑色线条的为打印面。
5.4.5调整好出纸位置后，将打印机绿色的机头扳手复位。
5.4.6将纸卷轴柱和上盖板复原。
5.4.7装好纸后，不可用力拽纸。
5.4.8热敏打印机打印的数据不宜长期保存，如需长期保存，请复制数据。
5.4.9数据打印完毕，请用剪刀剪下打印纸，不可用力撕纸，以免打印机卡纸。
5.5仪器使用、贮存注意事项
5.5.1本仪器的工作位置和采样口应处于同一气压和同一温度环境下，以免影响仪器正常工作和产生凝露以至损坏仪器。若必须在有压情况下工作，则最大压差不能超过200Pa。在有压差和温湿度差的情况下工作会增加测量误差，甚至损坏仪器。
5.5.2禁止抽取含有水汽、油污、腐蚀性物质的气体和高温气体，禁止在高尘埃浓度的环境下使用，避免在非净化环境中使用。
5.5.3本仪器在不用时应搁置在干燥、防尘良好的室内环境中。
5.5.4搬运本仪器时，应轻搬轻放，少受震动、冲击，最好放在专用包装箱内再搬动。
5.5.5本仪器在出厂包装的状态下，允许在下列环境中运输和短期存放：温度-40～50℃，湿度90%RH(40℃)。
5.5.6本仪器应每年标定一次以保证其精度。
主要参考文献：《Y09-6型尘埃粒子计数器使用说明书》
