各位大虾，我做了大鼠组织的TNF-α免疫组化，是取材后送到医院病理科出钱代做的，现HE和免疫组化片子已经做好，我才意识到没有阳性和阴性对照，请问这两种对照该怎么弄，是我自己想办法还是该病理科负责给我设立？需要我自己再买相应的试剂吗？以前没有做过，所以一头雾水，请不吝赐教，多谢!
免疫组化的同一批片子中要有阳性对照和阴性对照才有意义,这些应该是同时作出来的,事后无法补救.
阳性对照片在购试剂时可以要求附两张试剂公司的阳性片子,如果没有,也可以自已搞,我做的时候是用肿瘤组织作阳性对照,实验动物组织不加一抗作阴性对照,你可以根据自己的实验设立阳性对照,不用再购买试剂.
个人见解,希望对你有帮助.
免疫组化染色中的对照片的设置非常重要，它是判断您的染色是否成功的关键依据，而且也是检测每一个抗体的质量标准，常设的对照如下：自身对照、阴性对照（空白对照、替代对照、抑制对照、 吸收实验对照）、阳性对照。
A、自身对照：在同一切片上与检测的目的物对照比较。如Actin、CD34在正常组织中的血管壁肌层应为阳性，Vimentin可以间质细胞，Desmin以血管壁及肌束为对照，S-100以小神经末为对照等，如果应为阳性的组织是阳性，则技术操作正确，如为阴性，则表明技术或免疫试剂质量有问题。
B、空白对照：用缓冲液替代一抗。
C、替代对照：用非免疫血清替代一抗。
D、抑制对照：使用与一抗相同的非标记抗体稀释特异性一抗，适于直接法。
E、吸收实验对照：已知抗原与相应的第一抗体混合，发生结合沉淀，再用此沉淀抗体复合物进行免疫组化实验，结果为阴性。
F、阳性对照：用以含有靶抗原的切片进行对照。
谢谢楼上两位仁兄的热心指点！
