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【求助】如何观察神经纤维缠结

都有哪些特殊的染色方法呀,用哪一种更好呀.最好是有具体步骤还有出处????????
  1. 神经元神经纤维缠结可以用银染色(Bielschowsky 银染)发现。在所有病例中,围绕核的神经纤维丝(neu ropil threads),似Pick体的不规则颗粒,以及胶质细胞与神经元内包涵体都可在银染 色及tau相关的免疫化学法下观察。

  2.采用H&E染色显示Alzheimer病引起的神经纤维缠结。大脑Alzheimer病神经纤维缠结的显微镜图像在细胞质出现粉红色的细长丝。他们由细胞骨架中间丝组成。
 
  3.免疫组织化学方法。
用BODIAN法效果非常好。
用BODIAN法效果非常好。
CALLYAS-BRAAK 银染色法也非常好。
用BODIAN法效果非常好。
CALLYAS-BRAAK 银染色法也非常好。
Bielschowsky氏染色法
特需试剂
氨银液:于20%硝酸银溶液5毫升内加入6滴40%氢氧化钠液。逐滴加入浓氨水(0。880),直到生成的沉淀物恰好溶解。再加蒸馏水至总量为25毫升,过滤备用。
浸染技术:
(1)  组织用福尔马林盐液固定,一次固定适当,时间久些不要紧。
(2)  切制前将组织水洗。
(3)  切制冰冻切片,厚度10微米(神经原纤维)或15-20微米(细胞和轴突)。
(4)  切片用蒸馏水洗1小时,多次换水。
(5)  切片移到一小碟4%硝酸银溶液内,置于暗处24-48小时(切片应在液内平展,勿有皱褶)。
(6)  蒸馏水速洗。
(7)  用新配的上述氨银液2-10分钟。直至切片从淡褐色变为深烟草褐色。
(8)  蒸馏水速洗两次。
(9)  移至10%福尔马林常水溶液内5-10分钟,使银还原。
(10)  蒸馏水洗2-3次5-10分钟。
(11)  用0。2%氯化金调色10-15分钟。
(12)  蒸馏水洗。
(13)  移至5%硫代硫酸钠液内5分钟。
(14)  水洗5分钟。
(15)  附贴于清洁载玻片上,脱水,透明,常规封固。
请各位帮我看看这个方法可不可以!!!!!!!!
Bielschowsky氏染色法
特需试剂
氨银液:于20%硝酸银溶液5毫升内加入6滴40%氢氧化钠液。逐滴加入浓氨水(0。880),直到生成的沉淀物恰好溶解。再加蒸馏水至总量为25毫升,过滤备用。
浸染技术:
(1)  组织用福尔马林盐液固定,一次固定适当,时间久些不要紧。
(2)  切制前将组织水洗。
(3)  切制冰冻切片,厚度10微米(神经原纤维)或15-20微米(细胞和轴突)。
(4)  切片用蒸馏水洗1小时,多次换水。
(5)  切片移到一小碟4%硝酸银溶液内,置于暗处24-48小时(切片应在液内平展,勿有皱褶)。
(6)  蒸馏水速洗。
(7)  用新配的上述氨银液2-10分钟。直至切片从淡褐色变为深烟草褐色。
(8)  蒸馏水速洗两次。
(9)  移至10%福尔马林常水溶液内5-10分钟,使银还原。
(10)  蒸馏水洗2-3次5-10分钟。
(11)  用0。2%氯化金调色10-15分钟。
(12)  蒸馏水洗。
(13)  移至5%硫代硫酸钠液内5分钟。
(14)  水洗5分钟。
(15)  附贴于清洁载玻片上,脱水,透明,常规封固。
请各位帮我看看这个方法可不可以!!!!!!!!
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