临床执业医师考试：《答疑周刊》2016年第36期：

问题索引：

一、「问题」什么是过氧化物酶染色？

二、「问题」什么是中性粒细胞碱性磷酸酶染色？

三、「问题」什么是非特异性酯酶染色？

四、「问题」什么是糖原染色？

具体解答：

一、「问题」什么是过氧化物酶染色？

「解答」血细胞中的过氧化物酶（POX）能分解试剂中的底物H2O2，释放出新生态氧，使无色联苯胺氧化为蓝色联苯胺，后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的颗粒，沉着于细胞质中。胞质中无蓝黑色颗粒者为阴性反应，出现细小颗粒、分布稀疏者为弱阳性反应，颗粒粗大而密集者为强阳性反应。主要用于急性白血病类型的鉴别。急性粒细胞白血病时，白血病细胞多呈强阳性反应，急性单核细胞白血病时呈弱阳性或阴性反应，急性淋巴细胞白血病呈阴性反应。

二、「问题」什么是中性粒细胞碱性磷酸酶染色？

「解答」碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞，其他细胞均呈阴性反应。阳性反应为胞质中出现灰色到棕黑色颗粒，反应强度分为5级，即"-、1+、2+、3+、4+".反应结果以阳性反应细胞百分率和积分值来表现。血涂片染色后在油镜下观察100个成熟中性粒细胞，阳性反应细胞所占百分率即为阳性率。对所有阳性反应细胞逐个按反应程度分级，将各级所占的百分率乘以级数，然后相加，即为积分值。成人NAP阳性率10-40%，积分值40-80分。由于各实验室条件不同，参考值也有差异。急性化脓性感染活性增高，病毒性感染时活性正常或减低；慢性粒细胞白血病活性明显减低，积分值常为0，类白血病反应是活性极高；急性粒细胞白血病时积分值减低，急性淋巴细胞白血病积分值多增高，急性单核细胞白血病是一般正常或减低；再障时活性增高，PNH时活性减低。

三、「问题」什么是非特异性酯酶染色？

「解答」α-醋酸萘酚酯酶又称非特异性酯酶（NSE），能将基质液中的α-醋酸萘酚水解，产生α-萘酚，再与重氮染料偶联，形成不溶性的有色沉淀，定位于胞质内。胞质中出现有色沉淀为阳性反应，此酶主要存在于单核系细胞中，原单核细胞为阴性反应或弱阳性反应，由单核细胞和单核细胞为阳性反应，粒系细胞一般为阴性或弱阳性反应，淋巴细胞一般为阴性反应。所以急性单核细胞白血病细胞呈强阳性反应，但单核细胞中的酶活性可被氟化钠抑制，故在进行染色，常同时被氟化钠抑制试验。急性粒细胞白血病是呈阴性反应或弱阳性反应，但阳性反应不被氟化钠抑制。

四、「问题」什么是糖原染色？

「解答」糖原染色又称过碘酸-Schiff反应（PAS），过碘酸能将血细胞内的糖原氧化，生成醛基，醛基与Schiff液中的无色品红结合，形成紫红色化合物，定位于胞质内。胞质中出现红色者为阳性反应，阳性反应物可呈颗粒状、小块状或弥漫均匀红色。PAS的阳性程度通常以强阳性、阳性、弱阳性和阴性来表示。也有用阳性百分率和积分值来表示。红血病或红白血病时幼红细胞呈强阳性反应；急性粒细胞白血病时，原粒细胞成阴性或弱阳性反应，阳性反应物质呈细颗粒状或均匀淡红色；急性淋巴细胞白血病时，原淋和幼淋细胞常呈阳性反应，阳性反应物质呈粗颗粒状或块状；急性单核细胞白血病，原单核细胞大多为阳性反应，呈弥漫均匀红色或细颗粒状。

「例题」男性，25岁，发热，牙龈出血，皮肤瘀斑5天，胸骨压痛明显，肝脾肋下触及，血红蛋白70g/L，白细胞50×109/L，血小板20×109/L，骨髓：原始细胞0.90， POX（+），PAS阴性，非特异性酯酶阴性，诊断为

A. 急性粒细胞白细胞

B. 急性早幼粒细胞白血病

C. 急性单核细胞白血病

D. 急性淋巴细胞白血病

E. 急性红白血病

「正确答案」A

「解析」细胞化学染色

⑴过氧化物酶：急淋细胞呈阴性（阳性＜3％）；急粒细胞呈强阳性；急单细胞呈阳性或弱阳性。

⑵糖原染色：急淋细胞呈阳性（粗颗粒或粗块状，常集于胞浆一侧）；急粒、急单细胞呈弱阳性（弥散性细颗粒状）；红白血病：幼红细胞呈强阳性。

⑶非特异性酯酶染色：急单细胞呈强阳性，能被氟化钠明显抑制（>50％）；急粒细胞呈阳性或弱阳性，氟化钠轻度抑制（＜50％）；急淋细胞一般呈阴性。

⑷中性粒细胞碱性磷酸酶染色：急淋白血病积分增高或正常；急粒白血病明显减低；急单白血病可增高或减低。

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