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【交流】再谈实验室用水!(原创)

水是实验室内一个常常被忽视但至关重要的试剂。实验室用水有那些种类?能达到什么级别?不同实验对水的要求有那些?这些问题以前对我来说具有一些模糊的概念,前几天参加学校的纯水装置的招标,阅读有关的一些资料,初步了解了相关的知识,现在拿来和大家分享,绝大多数都是本人从外文资料翻译过来的,不当之处还望各位批评。这些资料也包括freecell战友在该版块的精华贴,在此也表示感谢!

实验室常见的水的种类:

1、蒸馏水(Distilled Water ):
实验室最常用的一种纯水,虽设备便宜,但极其耗能和费水且速度慢,应用会逐渐减少。蒸馏水能去除自来水内大部分的污染物,但挥发性的杂质无法去除,如二氧化碳、氨、二氧化硅以及一些有机物。新鲜的蒸馏水是无菌的,但储存后细菌易繁殖;此外,储存的容器也很讲究,若是非惰性的物质,离子和容器的塑形物质会析出造成二次污染。

2、去离子水(Deionized Water ):
应用离子交换树脂去除水中的阴离子和阳离子,但水中仍然存在可溶性的有机物,可以污染离子交换柱从而降低其功效,去离子水存放后也容易引起细菌的繁殖。

3、反渗水(Reverse osmosis Water):
其生成的原理是水分子在压力的作用下,通过反渗透膜成为纯水,水中的杂质被反渗透膜截留排出。反渗水克服了蒸馏水和去离子水的许多缺点,利用反渗透技术可以有效的去除水中的溶解盐、胶体,细菌、病毒、细菌内毒素和大部分有机物等杂质,但不同厂家生产的反渗透膜对反渗水的质量影响很大。

4、超纯水(Ultra-pure grade water):
其标准是水电阻率为18.2MΩ-cm。但超纯水在TOC、细菌、内毒素等指标方面并不相同,要根据实验的要求来确定,如细胞培养则对细菌和内毒素有要求,而HPLC则要求TOC低。

评价水质的常用指标:

1、电阻率(electrical resistivity):
衡量实验室用水导电性能的指标,单位为MΩ-cm,随着水内无机离子的减少电阻加大则数值逐渐变大,实验室超纯水的标准:电阻率为18.2MΩ-cm。

2、总有机碳(Total Organic Carbon ,TOC):
水中碳的的浓度,反映水中氧化的有机化合物的含量,单位为ppm 或 ppb。

3、内毒素(Endotoxin):
革兰氏阴性细菌的脂多糖细胞壁碎片,又称之为“热原”,单位cuf/ml。

以后会陆续推出一些内容和大家共享!希望对大家有帮助!
请问楼主,MilliQ水是哪一种?
嗯,不错,很多我自已也没真正去了解过,只是人云亦云。但也做了几年的实验,也愿意与大家交流。先说说以前的实验室,读研时,实验室一般用双蒸水仪器。然后蒸完的ddH2O,再用另一个继续蒸,成四蒸水。一般双蒸的用来洗洗东西,而四蒸水用来做细胞培养,如果要用PCR,则拿四蒸水再去灭一次菌。我们用那个水测过pH值,酸性非常强,一般是5点几。所以做细胞培养时要用碱继续调一下pH。做了好几年了,感觉还可以,没出太多水质的问题。由于以前是老楼,老板只需要交一些管理费,就能随便用电用水了,感觉这种蒸馏水的成本还是挺高的,十分浪费水,也浪费电能,就因为不用交水电费,而且人力、蒸馏水仪器费便宜,所以老板就首选这个了。
毕业时,老实验室搬到新的地方去了,在新大楼里,仍然是用双蒸水,烧完后再用millpore(如图),再贮藏至nalgene的水桶中,反正够用,所以不管是什么实验,就用这种水了。

现在的实验室是准备按美国的节能型大楼设计,所以不会出现这种制作方式。一般是先用离子交换过术,再用超纯水渗透技术,就是那个所谓18.2兆欧母的,但产率非常低,一天只能产75L,倒是三个实验室共用,因此,根本满足不了大家的用途,而每个实验室各买一套又没这么多经费,所以就只能省着用。不过所谓的这个超纯水,不知道是不是号称啊,我用pH计测过pH值,也是6.2左右,偏酸。实验还没正式开始,所以我也不太清楚效果怎么样。平时洗洗东西,我们就用去离子水了。
楼上还有台LTQ质谱仪,但这个超纯水据说仍然满足不了它的需要,所以一直向国外直接买水(好可怜啊,比油贵的多的水)。
综上所述,呵呵,感觉普通洗东西就用双蒸水(去离子水),做PCR的话,去离水+灭菌就可以了,做RNA相关的,最好再干净点,超纯水+DEPC,做质谱么,呵呵,进口水吧。
changbaihou wrote:
请问楼主,MilliQ水是哪一种?

MilliQ是millipore 公司的主要产品,其生成的水属于超纯水即其电阻率为18.2MΩ-cm,但MilliQ又分四种系列( Milli-Q Academic Milli-Q Biocel Milli-Q Gradient Milli-Q Synthesis),在TOC、热原等方面还是有差异的,适用于不同的实验。
呵呵,竟然分的这么细,回去看看我们实验室的是什么系列。
晕,我们这就蒸馏水和去离子水的。
非常不错 又学到了好多东西啊
我们实验室根本没有蒸馏水,就只有去离子水,所以大家漂洗器皿、配液基本上都是用它,不过,我的细胞还是在长,就是不知道如果用的是蒸馏水的话,应该长成什么样
我还知道有一家实验室光用自来水的作培养的,灭一下菌就OK了,居然还没什么问题,晕啊
erwinchen wrote:
我还知道有一家实验室光用自来水的作培养的,灭一下菌就OK了,居然还没什么问题,晕啊

如果是普通发酵培养细菌用自来水并没有什么不妥,我们实验室的发酵培养基基本上都是使用自来水配制的,自来水里面的杂质就当成是微量元素,呵呵。
但是我在培养大肠杆菌做分子实验(例如:提质粒或转化之类的)时,配LB培养基使用的是蒸馏水,配完后pH是7.1~7.2之间,不用调pH值直接可以灭菌了。
在做酶切还有PCR的时候,一直使用的是灭菌后milli-Q水,不过估计如果没有milli-Q水,用灭菌的蒸馏水也是可以的。
我在做酶修饰及酶活测定时,对水要求比较高,这个时候一定要用milli-Q水,不然就算使用的是去离子水,其中残留的离子和其他杂质对结果的影响仍然很大。
如果大家对水的使用有特别要求,可以在实验之前做一系列参比,看看不同纯度的水对结果的影响究竟有多大,选取一个性价比最高的来使用。
我们实验室只要是配液就要用三蒸水,而且要高压后再用.因为我烧双蒸水比较方便,所以配液我用的基本是四蒸水了,有时烧好了的四蒸水,由于其他原因还要耽搁几天才能配液,我就会拿去再双蒸一次,那就是6蒸了.也不知道这样有没有什么问题,细胞养的还可以.
洗了东西过三遍也是用的双蒸水。我们 co2培养箱里的水也是用的高压后的双蒸水.
问其他实验室的同学,他们配液从来没有高压过水。我都有些泄气,想偷懒,但还是不敢,怕出错了。
我们实验室用的是Milli-Q Biocel ,这个型号更适合作哪方面的实验呢?
我用的超纯水,PH值为6。2,不知是否会影响酶切、连接等结果?
太奢侈了,钱多了就是好啊!

dyy... wrote:
我们实验室只要是配液就要用三蒸水,而且要高压后再用.因为我烧双蒸水比较方便,所以配液我用的基本是四蒸水了,有时烧好了的四蒸水,由于其他原因还要耽搁几天才能配液,我就会拿去再双蒸一次,那就是6蒸了.也不知道这样有没有什么问题,细胞养的还可以.
洗了东西过三遍也是用的双蒸水。我们 co2培养箱里的水也是用的高压后的双蒸水.
问其他实验室的同学,他们配液从来没有高压过水。我都有些泄气,想偷懒,但还是不敢,怕出错了。

太奢侈了,钱多了就是好啊!

dyy... wrote:
我们实验室只要是配液就要用三蒸水,而且要高压后再用.因为我烧双蒸水比较方便,所以配液我用的基本是四蒸水了,有时烧好了的四蒸水,由于其他原因还要耽搁几天才能配液,我就会拿去再双蒸一次,那就是6蒸了.也不知道这样有没有什么问题,细胞养的还可以.
洗了东西过三遍也是用的双蒸水。我们 co2培养箱里的水也是用的高压后的双蒸水.
问其他实验室的同学,他们配液从来没有高压过水。我都有些泄气,想偷懒,但还是不敢,怕出错了。

HPLC的流动相用水应该怎样制呢?? 谢谢!
大家用什么去装处理过的水呢?
HPLC的流动相用三蒸水就足以了
我们实验室只用单蒸水和双蒸水
这个议题很有意思!事实上我个人认为,实验中用什么水,关键是看用水的目的是什么。比如说上文中有位说到质谱用水,在我们实验室也有过这种情况,先是用的自己实验师的MILLIQ出的水,结果发现干扰极大,后来在偶然的情况下尝试用了外买的大家喝的桶装超纯水,居然还没干扰了,那水才10块钱,一大瓶。后来大家分析说可能这种水超纯的只剩H2O,所以对于灵敏度极高的质谱来说分析到的只是H2O,自然就没有干扰了。而MILLIQ的水用作其它实验,比如细胞培养配掖,分子生物学实验等等却没发现什么明显不对,当然也可能有的会有影响但是不大。至于洗瓶子等等就是用普通蒸馏水。
我们实验室用的都是娃哈哈的纯净水做HPLC,呵呵,还不错。不知道他们的水是用什么方法作的。
我们买了一台电导率仪,我检测了自来水,去离子水,双蒸水,纯水,超纯水等,发现超纯水的电导率比18.2MΩ-cm大,可能是检测过程当中由于环境的影响导致超纯水成分发生变化了。
...还有这么多分类啊
我们这里虽然有3个不同的水龙头..但是好象所有人都只用DH2O那个..
后来有了个Ultra-pure grade water的机器,所有人都只用那个了,干什么都用

不过好象有看过隔壁组的人从Progema买过1L的水..要20镑
上面就标了一个H2O..
不知道是什么东西
caiyl1976 wrote:
我用的超纯水,PH值为6。2,不知是否会影响酶切、连接等结果?


没有问题的,大部分的超纯水都有点偏酸性,对实验没影响的,象酶切、PCR和连接都有缓冲液的。
sixday1004 wrote:
...还有这么多分类啊
我们这里虽然有3个不同的水龙头..但是好象所有人都只用DH2O那个..
后来有了个Ultra-pure grade water的机器,所有人都只用那个了,干什么都用

不过好象有看过隔壁组的人从Progema买过1L的水..要20镑
上面就标了一个H2O..
不知道是什么东西


是啊,我们实验室也是这样,以前没有超纯水的时候蒸馏水就可以了,有超纯水后就什么都需要用超纯水了,害得老板经常需要换柱子,呵呵
erwinchen wrote:
我还知道有一家实验室光用自来水的作培养的,灭一下菌就OK了,居然还没什么问题,晕啊


呵呵,其实是没问题的。不过北方的水质偏硬,培养还是最好用蒸馏水,南方的水就没问题。
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