这是我在书上看到的配制蛋白酶K（20mg/ml)的方法：将冷冻干燥的粉末状蛋白酶K，用灭菌的50mmol/LTris·cl（pH8.0），1.5mmol/L乙酸钙溶解，配成浓度为20mg/ml的溶液。
我想问乙酸钙是不是应该先配一个浓缩液再稀释，因为直接加进去配1ml蛋白酶K仅需0.26427mg乙酸钙，无法称量。但是我不知道如果配浓缩液的话，浓度应配多少合适？还有否需要调pH？配好后是否要高压？怎么灭菌？
望哪位配过的指点？最好告诉我具体的方法，谢谢！
还有配好后怎么保存？谢谢
估计你看的是分子克隆2吧。
在分3中(中文p1656)用水就可以直接溶解了。
如果想用你说的溶液的话，可以直接配50 mL上述缓冲液 (50 mM Tris-HCl, 1.5 mM CaAc2, pH 8.0)就可以了，最好高压灭菌一下，用时直接取来溶解蛋白酶K。
我看的是分3,1656页没有说用水直接溶解啊!我决定还是按你说的配50ml缓冲液(50 mM Tris-HCl, 1.5 mM CaAc2, pH 8.0).不过只用1ml来溶解蛋白酶K,剩下的就浪费了!非常谢谢你
是我看错了。不好意思！
如果觉得浪费的话可以单独配制50 mM or 100 mM 的CaAc2，用的时候拿0.5 M or 1 M Tris-HCl (pH 8.0) 和水兑就可以了。不过感觉没有直接配制的比较准，毕竟用枪吸的还是有不少误差的。呵呵，个人意见。
是我看错了。不好意思！
如果觉得浪费的话可以单独配制50 mM or 100 mM 的CaAc2，用的时候拿0.5 M or 1 M Tris-HCl (pH 8.0) 和水兑就可以了。不过感觉没有直接配制的比较准，毕竟用枪吸的还是有不少误差的。呵呵，个人意见。
是我看错了。不好意思！
如果觉得浪费的话可以单独配制50 mM or 100 mM 的CaAc2，用的时候拿0.5 M or 1 M Tris-HCl (pH 8.0) 和水兑就可以了。不过感觉没有直接配制的比较准，毕竟用枪吸的还是有不少误差的。呵呵，个人意见。
