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胸腺蛋白口服溶液鉴别

2012-07-27 11:26 医学教育网
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1.取本品2ml,置具塞试管中,加双缩脲试液(取硫酸铜0.15g,酒石酸钾钠0.6g,溶于50ml水中,搅拌下加入10%氢氧化钠溶液30ml,用水稀释至100ml)8-10滴,混匀,即显紫堇色。

2.取本品12ml,加三氯乙酸1.8g,12000rpm离心10分钟,弃上清液,沉淀用无水乙醇2ml洗涤二次,每次12000rpm离心10分钟,挥干乙醇,残渣加0.1mol/L氢氧化钠溶液100μl溶解,加样品缓冲液(取浓缩胶缓冲液1.2ml、甘油1.0ml、10%十二烷基硫酸钠溶液2.0ml、0.5%溴酚蓝溶液0.5ml、β-巯基乙醇0.5ml、水4.8ml,混匀)100μl。另取标准蛋白(分子量范围14,400-97,400),用SDS还原样品缓冲液(取β-巯基乙醇25μl,加样品缓冲液475μl)以1:20稀释标准蛋白作对照,将处理好的标准蛋白和样品置水浴中5分钟,放冷后上样。照电泳法(中国药典2000年版二部附录V F第五法)测定,供试品在12KD-55KD分子量范围内应有明显电泳带。

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