作用于胆碱酯酶的药物主要分为两类，一类是胆碱酯酶抑制剂，另一类是胆碱酯酶复活剂，它们有着不同的作用机制。

胆碱酯酶抑制剂能抑制胆碱酯酶的活性，从而使乙酰胆碱在突触间隙内的浓度升高，发挥拟胆碱作用。根据其与胆碱酯酶结合后水解的难易程度，又可分为可逆性和不可逆性胆碱酯酶抑制剂。可逆性胆碱酯酶抑制剂以新斯的明为代表，它能与胆碱酯酶的酯解部位结合，形成二甲氨基甲酰化胆碱酯酶。这种复合物水解速度较慢，导致胆碱酯酶暂时失去活性，使乙酰胆碱不能及时被水解而堆积，产生拟胆碱作用。新斯的明对骨骼肌的兴奋作用最强，这是因为它除了抑制胆碱酯酶外，还能直接激动骨骼肌运动终板上的N2受体，并促进运动神经末梢释放乙酰胆碱。不可逆性胆碱酯酶抑制剂主要是有机磷酸酯类，如敌敌畏、乐果等。它们能与胆碱酯酶的酯解部位丝氨酸上的羟基以共价键结合，生成难以水解的磷酰化胆碱酯酶，使胆碱酯酶失去活性，造成乙酰胆碱在体内大量积聚，引起一系列中毒症状。

胆碱酯酶复活剂如碘解磷定等，其作用机制是能与磷酰化胆碱酯酶中的磷酰基结合，形成磷酰化碘解磷定，使胆碱酯酶游离出来，恢复其水解乙酰胆碱的活性。此外，碘解磷定还能直接与体内游离的有机磷酸酯类结合，形成无毒的磷酰化碘解磷定，由尿排出，从而阻止游离的有机磷酸酯类进一步与胆碱酯酶结合，避免中毒进一步加深。总之，作用于胆碱酯酶的药物通过不同的机制影响胆碱酯酶的活性，进而调节体内乙酰胆碱的水平，发挥相应的药理作用或用于治疗相关疾病。