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凝胶过滤法分离物质的原理

2012-09-28 15:09 医学教育网
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【提问】洗脱先后的原理是什么?为什么是大分子的先洗脱?请问是因为极性吸附吗?

【回答】学员hxsll,您好!您的问题答复如下:

您的说法不够全面。

凝胶过滤法分离物质的原理:凝胶过滤法(gel filtration)也叫凝胶渗透色谱(gel permeationchromatography)、分子筛过滤(molecular sieve filtration)或排阻色谱(exclusion chromatography),系利用分子筛分离物质的一种方法。其中所用载体,如葡聚糖凝胶,是在水中不溶、但可膨胀的球形颗粒,具有三维空间的网状结构。当在水中充分膨胀后装入色谱柱中,加入样品混合物,用同一溶剂洗脱时,由于凝胶网孔半径的限制,大分子将不能渗入凝胶颗粒内部(即被排阻在凝胶粒子外部),故在颗粒间隙移动,并随溶剂一起从柱底先行流出;小分子因可自由渗人并扩散到凝胶颗粒内部,故通过色谱柱时阻力增大、流速变缓,将较晚流出。样品混合物中各个成分因分子大小各异,渗入至凝胶颗粒内部的程度也不尽相同,故在经历一段时间流动并达到动态平衡后,即按分子由大到小的顺序先后流出并得到分离。

Sephadex LH-20是凝胶的一种。Sephadex LH-20为Sephadex G-25经羟丙基化处理后得到的产物,除保留有Sephadex G-25原有的分子筛特性,可按分子量大小分离物质外,在由极性与非极性溶剂组成的混合溶剂中常常起到反相分配色谱的效果,适用于不同类型有机物的分离,在中药化学成分的分离中得到了越来越广泛的应用。

★问题所属科目:执业药师---中药化学

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