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紫外－可见吸收光谱法

基于物质对200～800nm光谱区辐射的吸收特性建立起来的分析测定方法称为紫外-可见吸收光谱法或紫外-可见分光光度法。它具有如下特点：

1.灵敏度高，可以测定10-7～10-4g·mL-1的微量组分。

2.准确度较高，其相对误差一般在1%～5%之内。

3.仪器价格较低，操作简便、快速。

4.应用范围广。

紫外吸收光谱：200～400nm

可见吸收光谱：400～800nm

两者都属电子光谱。

紫外-可见吸收光谱的定量依据仍然是Lamber-Beer(朗伯-比耳)定律。

影响紫外-可见吸收光谱的因素：

共轭效应：

共轭效应使共轭体系形成大p键，结果使各能级间的能量差减小，从而跃迁所需能量也就相应减小，因此共轭效应使吸收波长产生红移。共轭不饱和键越多，红移越明显，同时吸收强度也随之加强。

溶剂效应：

溶剂极性对光谱精细结构的影响；

溶剂化限制了溶质分子的自由转动，使转动光谱表现不出来，如果，溶剂的极性越大，溶剂与溶质分子间产生的相互作用就越强，溶质分子的振动也越受到限制，因而由振动而引起的精细结构也损失越多；

溶剂极性对p®p*和n®p*跃迁谱带的影响；

当溶剂极性增大时，由p®p*跃迁产生的吸收带发生红移， n®p*跃迁产生的吸收带发生蓝移。

溶剂的选择：

尽量选用非极性溶剂或低极性溶剂；

溶剂能很好地溶解被测物，且形成的溶液具有良好的化学和光化学稳定性；

溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。

pH值的影响：

如果化合物在不同的pH值下存在的型体不同，则其吸收峰的位置会随pH值的改变而改变。

紫外-可见分光光度计：

仪器的基本构造：

紫外-可见分光光度计都是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号指示系统五个部分构成。

仪器类型：

紫外-可见分光光度计主要有以下几种类型：

单光束分光光度计、双光束分光光度计、双波长分光光度计和多通道分光光度计。

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