【摘要】本研究探讨用丙型肝炎病毒（HCV）核心抗原酶联免疫吸附技术（HCV-cAgELISA）筛查献血员感染HCV的可行性。对我医院2003年1月-2005年12月间的8677份献血者血清标本进行抗-HCV初检和复检。将仅初检阳性的15份血清标本和仅复检阳性的14份血清标本，分别再做HCV-cAgELISA和HCVRT-PCR检测。结果表明：经HCV-cAgELISA检测，29份仅初检（15份）和仅复检（14份）抗-HCV阳性血清标本中只有5份结果为阳性，阳性率为17.24%.经HCVRT-PCR检测，29份仅初检和仅复检抗-HCV阳性血清标本中同样也只有5份阳性结果，阳性率也为17.24%.结论：HCV-cAgELISA检测技术的敏感性与HCVRT-PCR技术类似，但成本明显降低，有可能作为HCV感染的辅助确证试验，或作为抗-HCV检测技术的更新换代技术用于安全输血中献血者血液的筛查。

　　【关键词】丙型肝炎病毒

　　目前临床上主要用抗-HCVELISA技术筛检献血者的HCV感染状况。尽管使用的抗-HCVELISA试剂盒均为国家“批批检”合格产品，但由于厂家之间使用HCV基因重组抗原质量及各抗原片段包被比例的不同，各厂家试剂间的灵敏度和特异性存在着一定差异，从而导致抗-HCV检测结果不一致，易产生假阳性或漏检等情况。我们从2003年1月-2005年12月采用两家厂商生产的抗-HCVELISA试剂对8677份献血者血清标本进行了初检和复检，对仅初检或复检抗-HCV阳性血清标本又用HCV-cAgELISA技术和HCVRT-PCR技术进行了检测，以探讨HCV-cAgELISA技术作为临床HCV感染的辅助确证试验，或作为抗-HCV检测技术的更新换代技术用于安全输血中献血员筛查的可行性，现将结果报告如下。

　　材料和方法

　　标本来源

　　血清标本均来自本院血站献血者，经抗-HCVELISA试剂初、复检后，将所需标本分装并置-80℃条件下存放，确保被检标本仅冻融一次。

　　质控品

　　抗-HCV质控血清由卫生部临床检测中心提供（批号0412，0503等），2NCU/ml。

　　试剂

　　用于初检和复检的抗-HCVELISA诊断试剂分别由厦门新创公司（批号为2004095805和2005025801）和上海科华公司（批号为20041203和20050317）提供，HCV-cAgELISA试剂由湖南景达基因公司提供（批号为050920）；HCVRT-PCR荧光定量试剂由上海科华公司提供（批号为20050920）。

　　主要仪器

　　洗板机（ST-36Ｗ）和酶标仪（ST-360）均为上海科华实业有限公司生产。PCR扩增仪型号为LightCyclerII。

　　方法

　　8677份献血者血清标本经抗-HCVELISA试剂初、复检后，将仅初检或复检阳性的血清标本用同批号试剂做双孔复查，确定阳性结果的标本再用HCV-cAgELISA技术和HCVRT-PCR技术检测。具体操作方法和结果判断，严格按照说明书要求进行。

　　统计学处理采用χ2检验。医学教育网搜集整理

　　结果

　　8677名献血者的血清标本经抗-HCVELISA技术检测后，结果见表1。Table 1. Results of anti-HCV in donor’s serum samples detected by ELISA（略）

　　对其中15份仅初检和14份仅复检抗-HCV阳性血清标本分别进行HCV-cAgELISA检测和HCVRT-PCR检测。结果表明，在29份仅初检和仅复检抗-HCV阳性血清标本中，抗原检测阳性为5份，核酸检测阳性也为5份，两种方法检测结果基本相符（表2）。Table 2. Results detected by  HCV-cAg ELISA and HCV RT-PCR （略）

　　讨论

　　在第三代抗-HCVELISA技术中的包被抗原主要包括HCV-core，NS3，NS4和NS5等，其中大部分为基因工程表达抗原，虽然其特异性和灵敏度都比较高［1］，但由于各厂商所用抗原质量和各抗原片段包被比例的不同，因此生产的试剂在灵敏度和特异性方面存在一定差异，从而导致抗-HCV结果的不一致，易产生漏检和假阳性等情况［2］。为提高检出的准确性，有必要寻找一种快速、便捷的辅助确证诊断技术。

　　HCV侵入人体后，血液中首先出现的是HCV抗原，经过一段时间后才可能产生相应的抗体。国内外近几年来探索应用HCV-cAg检测HCV的报道较多［4，5］。本研究应用的HCV-cAgELISA法对仅初检阳性的15份和仅复检阳性的14份血清标本分别进行了检测。结果显示，抗原检测阳性率比文献报道的在抗-HCV阳性标本中HCV-cAg阳性率（为34.48%）明显要高［5］。医学教育网搜集整理

　　应用RT-PCR技术对仅初检或仅复检抗-HCV阳性的29份血清标本的检测结果与HCV-cAgELISA法结果相同。虽然PCR技术特异性强，灵敏度高，是HCV感染辅助确证技术之一，但该方法操作复杂、费用高。比较而言，HCV-cAgELISA法快速、便捷，较适用于安全输血中献血者的血液筛检。

　　HCV-cAgELISA技术与抗-HCV有互补作用，二者同时检测能提高HCV检出结果的准确性，可明显降低抗-HCV检测的假阳性，减少血液资源的浪费，当然这还有待进一步研究。

　　【参考文献】

　　1　Colin C，Lanoir D，Touzets，et al. Sensitivity and specificity of third-generation hepatitis C virus antibody detetion assay ：an analysis of the literature. J Hepat，2001； 8： 87-95

　　2　谢立，吴晓东。丙型肝炎病毒检测方法的研究进展及其临床意义。世界华人消化杂志，2005； 13： 884-886

　　3　汪国华，张贺秋，李少波等。丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的研制及初步应用。 中国输血杂志，2004； 17：299-301

　　4　孟淑芳，李秀华，尹红章等。丙型肝炎病毒抗原检测方法的建立。中华实验和临床病毒学杂志，2001；15：287-230

　　5　Muerhoff A，Jiang L，Shah D，et al. Detection of HCV core antigen in human serum and plasma with an automated chemiluminescent immunoassay. Transfusion，2002； 42：349-356