时间分辨荧光免疫分析属于非放射性标记免疫分析技术中的一种,它在临床免疫学和免疫检验领域有着重要的应用。下面从其原理、特点、分类等方面进行详细阐述。
从原理上来说,时间分辨荧光免疫分析利用了镧系元素(如铕、钐等)的荧光特性。这些镧系元素的荧光寿命长,可达10 - 1000微秒,而普通荧光物质的荧光寿命仅为1 - 10纳秒。当激发光照射后,普通荧光物质的短寿命荧光迅速衰变消失,而镧系元素的长寿命荧光依然存在。通过延迟测量时间,避开短寿命荧光的干扰,只检测镧系元素的荧光信号,从而大大提高了检测的灵敏度。
从特点来看,时间分辨荧光免疫分析具有诸多优势。首先是高灵敏度,由于有效排除了背景荧光的干扰,其检测限可达10 - 12 摩尔/升甚至更低。其次是宽线性范围,可在几个数量级的范围内保持良好的线性关系,这使得它能够准确检测不同浓度的待测物质。再者是标记物稳定,镧系元素的螯合物性质稳定,有效期长,便于储存和使用。另外,它还具有多标记能力,可以同时标记多种不同的抗原或抗体,实现多指标的同时检测。
从分类上,时间分辨荧光免疫分析可分为双抗体夹心法、竞争法和固相抗体竞争法等。双抗体夹心法适用于检测大分子抗原,先将特异性抗体包被在固相载体上,加入待测抗原和标记抗体,形成夹心复合物,通过检测复合物上的荧光信号来确定抗原的含量。竞争法主要用于检测小分子抗原,标记抗原和待测抗原竞争结合固相抗体,待测抗原含量越高,结合到固相上的标记抗原就越少,荧光信号也就越弱。固相抗体竞争法是将抗体包被在固相载体上,标记抗原和待测抗原竞争结合固相抗体,通过检测游离标记抗原的荧光信号来测定待测抗原的含量。
综上所述,时间分辨荧光免疫分析凭借其独特的原理、显著的特点和多样的检测方法,在临床免疫学和免疫检验中发挥着重要作用,为疾病的诊断、治疗监测等提供了有力的技术支持。
从原理上来说,时间分辨荧光免疫分析利用了镧系元素(如铕、钐等)的荧光特性。这些镧系元素的荧光寿命长,可达10 - 1000微秒,而普通荧光物质的荧光寿命仅为1 - 10纳秒。当激发光照射后,普通荧光物质的短寿命荧光迅速衰变消失,而镧系元素的长寿命荧光依然存在。通过延迟测量时间,避开短寿命荧光的干扰,只检测镧系元素的荧光信号,从而大大提高了检测的灵敏度。
从特点来看,时间分辨荧光免疫分析具有诸多优势。首先是高灵敏度,由于有效排除了背景荧光的干扰,其检测限可达10 - 12 摩尔/升甚至更低。其次是宽线性范围,可在几个数量级的范围内保持良好的线性关系,这使得它能够准确检测不同浓度的待测物质。再者是标记物稳定,镧系元素的螯合物性质稳定,有效期长,便于储存和使用。另外,它还具有多标记能力,可以同时标记多种不同的抗原或抗体,实现多指标的同时检测。
从分类上,时间分辨荧光免疫分析可分为双抗体夹心法、竞争法和固相抗体竞争法等。双抗体夹心法适用于检测大分子抗原,先将特异性抗体包被在固相载体上,加入待测抗原和标记抗体,形成夹心复合物,通过检测复合物上的荧光信号来确定抗原的含量。竞争法主要用于检测小分子抗原,标记抗原和待测抗原竞争结合固相抗体,待测抗原含量越高,结合到固相上的标记抗原就越少,荧光信号也就越弱。固相抗体竞争法是将抗体包被在固相载体上,标记抗原和待测抗原竞争结合固相抗体,通过检测游离标记抗原的荧光信号来测定待测抗原的含量。
综上所述,时间分辨荧光免疫分析凭借其独特的原理、显著的特点和多样的检测方法,在临床免疫学和免疫检验中发挥着重要作用,为疾病的诊断、治疗监测等提供了有力的技术支持。

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