24小时客服电话:010-82311666
APP下载
扫一扫,立即下载
医学教育网APP下载

开发者:北京正保医教科技有限公司

苹果版本:8.6.4

安卓版本:8.6.4

应用涉及权限:查看权限 >

APP:隐私政策:查看政策 >

正保医学教育网卫生资格_微信公众号
微信公众号
热门资讯,实时推送
med66_weisheng
正保医学教育网卫生资格_微信视频号
官方视频号
免费直播,订阅提醒
微信扫码即可关注
正保医学教育网卫生资格考试知指导老师
考试指导老师
备考规划,专属指导
微信扫码添加老师
正保医学教育网_官方抖音号
官方抖音号
分享更多医考日常
抖音扫一扫关注
当前位置:医学教育网 > 临床医学检验职称 > 精华问答

制备基因工程抗体有何步骤?

2026-05-31 06:52 来源:正保医学教育网
打印
字体:
制备基因工程抗体主要有以下步骤:

首先是抗体基因的获取。可以从已有的杂交瘤细胞中提取mRNA,然后通过反转录 - 聚合酶链反应(RT - PCR)技术扩增出抗体的可变区基因。也可以从免疫动物的脾细胞或外周血淋巴细胞中获取抗体基因,还能利用噬菌体展示技术从天然抗体库中筛选出所需的抗体基因。

接着是载体的选择与构建。要挑选合适的表达载体,如质粒、噬菌体等。将获取的抗体基因插入到载体中,构建成重组载体。在构建过程中,需保证抗体基因能在载体中正确表达,同时要考虑载体的复制能力、筛选标记等因素,以确保重组载体能在宿主细胞中稳定存在和表达。

之后是宿主细胞的转化或转染。把构建好的重组载体导入合适的宿主细胞,常用的宿主细胞有大肠杆菌、酵母细胞、哺乳动物细胞等。不同的宿主细胞具有不同的特点,大肠杆菌生长迅速、易于培养,但缺乏糖基化修饰能力;酵母细胞能进行一定程度的糖基化修饰;哺乳动物细胞则具有完整的蛋白质加工和修饰系统,能产生更接近天然抗体的产物。

然后是筛选与鉴定。在宿主细胞中筛选出含有重组载体且能正确表达抗体的细胞克隆。可以通过抗生素筛选、免疫印迹、酶联免疫吸附测定(ELISA)等方法进行筛选和鉴定,以确定表达的抗体是否具有正确的抗原结合活性和生物学功能。

最后是抗体的大规模生产与纯化。对筛选出的阳性细胞克隆进行大规模培养,优化培养条件以提高抗体的表达量。培养结束后,采用各种纯化技术,如亲和层析、离子交换层析等,从培养上清液或细胞裂解物中分离和纯化出基因工程抗体,去除杂质和其他蛋白质,得到高纯度的抗体产品。

检验职称题库

学员讨论(0
相关资讯
  • 2026卫生资格考试成绩预测?查分动态抢先知!预约入口>
卫生资格考试公众号
关注考试动态
发布考情动态
考试复习指导
免费1V1咨询考试条件
  • 免费试听
  • 辅导课程
  • 免费直播
2024中医医师入学摸底测试解析

张钰琪老师 2024-02-27 19:25--21:00

回看
2024医考报名后如何安排复习时间

张钰琪老师 2024-01-30 19:25--21:00

回看
【热招】无忧实验班 报名/考试不过重学
精品题库
  • 密题库会员
  • 题库小程序
  • 医考爱打卡
 检验职称密题库
多维练习模式
仿真模拟实战
专业解析+答疑
智能学习工具
原价:¥129-299
复购:¥103.2-239.2
查看详情
 检验职称正保医学题库
正保医学题库

· 每日一练 巩固提升

· 仿真试卷 实战演练

· 组队刷题 互相激励

查看 更多免费题库
 检验职称医考爱打卡
医考爱打卡

· 每天一个知识点

· 配套精选练习题

· 随时记录打卡心情

查看 更多免费题库
免费资料
  • · 高频考点
  • · 学习计划
  • · 科目分值
立即领取
学习社区
  • 备考交流
  • 微信
  • 视频号
拒绝盲目备考,加学习群共同进步!
寻找学习搭子
回到顶部
折叠