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细胞骨架的第三种纤维结构称中等纤维或中间纤维（intermediate filament，IF），又称中间丝，为中空的骨状结构，直径介于微管和微丝之间，其化学组成比较复杂，在不同细胞中，成分变化较大。中间纤维使细胞具有张力和抗剪切力。中间纤维有共同的基本结构，即构建成一个中央α螺旋杆状区，两侧则是大小和化学组成不同的端区。端区的多样性决定了中间纤维外形和性质的差异和特异性。

以上这些结构单元并非是一成不变的，而是随细胞的生命活动而呈现高度的动态性，它们均由单体蛋白以较弱的非共价键结合在一起，构成纤维型多聚体，很容易进行组装和去组装，这正是实现其功能所必需的特点。

细胞的第三种骨架成分：

中间纤维是细胞的第三种骨架成分，由于这种纤维的平均直径介于微管和微丝之间， 故称为中间纤维。由于其直径约为10nm， 故又称10nm 纤维。微管与微丝都是由球形蛋白装配起来的，而中间纤维则是由长的、杆状的蛋白装配的。中间纤维是三种骨架纤维中最复杂的一种。

与微管和微丝相比， 中间纤维在结构和功能上至少有三方面的差异。首先， 中间纤维是相当稳定的结构，即使用含有去垢剂和高盐溶液抽提细胞， 中间纤维仍然保持完整无缺。第二， 中间纤维在体积上与微管和微丝是不同的， 微管是直径是24nm， 微丝是7nm， 而中间纤维是10nm.而且形态上也不相同， 微管是由αβ微管蛋白二聚体组装成的中空管状， 微丝是由球形亚基装配成的α螺旋纤维， 而中间纤维的亚基是α-螺旋杆状装配成似杆状的结构。第三，IFs的亚基并不同核苷酸结合， 而微管的亚基与GTP或GDP结合， 微丝的亚基则与ATP或ADP结合，但是对于中间纤维装配的许多细节尚不清楚。

中间纤维是一种坚韧的、耐久的蛋白质纤维。它相对较为稳定， 既不受细胞松弛素影响也不受秋水仙素的影响。某些IFs分子能够形成同源二聚体的纤维， 而有些则能形成异源二聚体纤维。长度是可变的， 一般为40～50nm.