1.干粉培养基原倍液的配制

　　1）配制过滤除菌的细胞培养基

　　1）阅读培养基使用说明，确定需要添加何种添加剂（如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等）。

　　2）根据所需将培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）将袋内残留培养基洗下，医学教.育网搜集整理并入容器。加注射用水至总体积的95%，轻微搅拌溶解。

　　3）加入规定量的碳酸氢钠及所要添加的物质。

　　4）轻微搅拌溶解，加注射用水至规定体积。

　　5）用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调pH至所需值。

　　6）用0.22μm滤膜正压过滤除菌。

　　7）溶液应在2℃～8℃下避光保存。

　　具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。

　　2.配制可高压灭菌细胞培养基

　　1）根据所需将培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水至总体积的95%，轻微搅拌溶解。

　　2）在121℃、15psi下灭菌15分钟。

　　3）待溶液冷却至室温，加入无菌0.2mol/LL-谷氨酰胺溶液规定体积、无菌7.5%（w/v）碳酸氢钠溶液规定体积，加注射用水（20℃～30℃）至规定体积，混匀。

　　4）如果必要，用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调pH至所需值。

　　5）溶液应在2℃～8℃下避光保存。