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粪便直接涂片检查寄生虫的方法

2017-06-29 11:18 医学教育网
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粪便直接涂片检查寄生虫的方法是医学检验士的重要考点,医学教育网整理了关于粪便直接涂片检查寄生虫的方法的内容,希望可以帮助大家复习。

用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。方法简便,连续作3次涂片,可提高检出率。

(1)蠕虫卵检查:滴一滴生理盐水于洁净的载玻片,用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的粪便块,在生理盐水中涂抹均匀;涂片的厚度以透过涂片约可辨认书上的字迹为宜。一般在低倍镜下检查,如用高倍镜观察,需加盖片。应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。虫卵都具有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有色泽;卵内含卵细胞或幼虫。

(2)原虫检查:

1)活滋养体检查:涂片应较薄,方法同查蠕虫卵。气温愈接近体温,滋养体的活动愈明显。必要时可用保温台保持温度。

2)包囊的碘液染色检查:直接涂片方法同上,以一滴碘液代替生理盐水。如碘液过多,可用吸水纸从盖片边缘吸去过多的液体。若同时需检查活滋养体,可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液,取少许粪便在碘液中涂匀,再盖上盖片。涂片染色的一半查包囊;末染色的一半查活滋养体。

原虫包囊碘液染色操作方法

碘液配方:碘化钾4g,碘2g,蒸馏水100ml.

3)隐孢子虫卵囊染色检查:目前较佳的方法为金胺酚改良抗酸染色法。对于新鲜粪便或经10%福尔马林固定保存(4℃1个月内)的含卵囊粪便都可用此法染色。染色过程是先用金胺-酚染色,再用改良抗酸染色法复染。方法步骤如下:

金胺-酚染色法:

①染液配制:1g/L金胺-酚染色液(第一液):金胺0.1g,石碳酸5.0g,蒸馏水100ml;3%盐酸酒精(第二液):盐酸3ml,95%酒精100ml;5g/L高锰酸钾液(第三液):高锰酸钾0.5g,蒸馏水100ml.

②染色步骤:滴加第一液于晾干的粪膜上,10~15分钟后水洗;滴加第二液,1分钟后水洗;滴加第三液,1分钟后水洗,待干;置荧光显微镜检查。

低倍荧光镜下,可见卵囊为一圆形小亮点,发现乳白色荧光。高倍镜下卵囊呈乳白或略带绿色,卵囊壁为一薄层,多数卵囊周围深染,中央淡染,似环状,或深染结构偏位,有些卵囊全部为深染。但有些标本可出现非特异的荧光颗粒,应注意鉴别。

改良抗酸染色法:

①染液配制:石炭酸复红染色液(第一液):碱性复红4g, 95%酒精20ml,石炭酸8ml,蒸馏水100ml;10%硫酸溶液(第二液):纯硫酸10ml,蒸馏水90ml(边搅拌边将硫酸徐徐倾入水中;20g/L孔雀绿液(第三液):20g/L孔雀绿原液1ml,蒸馏水10ml.

②染色步骤:滴加第一液于粪膜上,1.5~10分钟后水洗;医学教|育网搜集整理滴加第二液,1~10分钟后水洗;滴加第三液,1分钟后水洗,待干;置显微镜下观察。

经染色后,卵囊为玫瑰红色,子孢子呈月牙形,共4个。其他非特异颗粒则染成蓝黑色,容易与卵囊区分。

不具备荧光镜的实验室,亦可用上述方法先后染色,然后在光镜低、高倍下过筛检查,发现小红点再用油镜观察。效果好,可提高检出速度和准确性。

2.厚涂片透明法(改良加藤法)取约5mg

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