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淀粉酶测定-中医助理医师实践技能

2014-05-07 10:41 医学教育网
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淀粉酶测定是中医助理医师实践技能第二站体格检查会涉及到的知识点,医学教育|网搜集整理,请参考。

淀粉酶测定-中医助理医师实践技能

(1)碘-淀粉比色法测定:B血清(或血浆)中a-淀粉酶(a-AMY)催化淀粉分子中α-1,4糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1,6糖苷支链的糊精。在底物过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物,其蓝色的深浅与空白管比较、从而推算出淀粉酶的活性单位。

(2)对-硝基苯麦芽七糖苷法:以对-硝基苯麦芽七糖苷为底物,经α-淀粉酶催化,水解为游离的寡糖(G5、G4、G3)及葡萄糖单位减少的对一硝基苯寡糖苷(4NP-G2、4NP-G3、4NP-G2);4NP-G2、4NP-G3及一部分4NP-G4,受α-葡萄糖苷酶催化,水解为对一硝基酚和葡萄糖。对一硝基酚的生成量,在一定范围内与R-淀粉酶活力成正比;但其摩尔数仅为酶解底物(4NP-G7)的三分之一,还有三分之二结合在4NP-G4中。

PNP(对-硝基苯酚)的生成引起405nm处吸光度的上升,上升速率与AMY的活力成正比。

(3)2-氯-4-硝基苯麦芽三糖苷法

CNP(2-氯-4-硝基苯酚)的生成引起405nm处吸光度的上升,上升速率与AMY的活力成正比。

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