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凝胶内沉淀试验:双向扩散试验

2020-06-15 14:41 医学教育网
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凝胶内沉淀试验:双向扩散试验是检验职称考试会涉及的内容,为了帮助大家了解,医学教育网为大家整理如下:

双向扩散试验:在琼脂内抗原和抗体各自向对方扩散,在最恰当的比例处形成抗原抗体沉淀线,根据沉淀线的位置、形状以及对比关系,可对抗原或抗体作出定性分析。双向扩散试验也分为试管法和平板法。

1、试管法:

在含有抗原的溶液和含有抗体琼脂中间,加一层普通琼脂,让下层抗体和上层抗原向中间自由扩散,在抗原、抗体浓度最适时形成沉淀线。

2、平板法:

是在琼脂板上相距3~5mm打一对孔,或者梅花孔、双排孔、三角孔等。在相应孔中加入抗原或抗体,待其自由扩散后,抗原、抗体形成可见的沉淀线。根据沉淀线的位置可作如下分析:

①抗原、抗体是否存在及其相对含量。一般沉淀线靠近抗原孔,提示抗体量大,沉淀线靠近抗体孔,提示抗原量大。

②抗原、抗体相对分子量的分析;抗原或抗体在琼脂内自由扩散,其速度受分子量影响。医学|教育网编辑整理分子量小者,扩散快,反之较慢。由于慢者扩散圈小,局部浓度较大,形成沉淀线弯向分子量大的一方。如若两者分子量相等,则形成直线。

③抗原性质的分析,受检的抗原性质可能完全相同、部分相同、完全不同,沉淀弧可分别出现完全融合、部分融合、不融合三种情况;

④抗体效价的滴定。抗体效价是抗原、抗体经过自由扩散形成沉淀线,出现沉淀线的最高抗体稀释度为该抗体的效价。

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主讲老师:孙海珍老师

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