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瑞氏染色法染色原理是什么?pH值的影响是什么?

2020-06-30 15:52 医学教育网
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瑞氏染色法是检验职称考试会涉及的内容,为了帮助检验职称考生了解,助力检验职称考生复习,医学教育网为大家整理如下:

【知识点名称】瑞氏染色法

【进阶攻略】瑞氏染色法是《临床检验基础》入门知识,属于熟练掌握的内容。常在《专业知识》和《专业实践能力》中考查。

【知识点详情】

瑞氏染色法:

1.瑞氏染料 由酸性染料伊红(E-)和碱性染料亚甲蓝(M+)组成。伊红通常为钠盐,有色部分为阴离子。亚甲蓝(又称美蓝)为四甲基硫堇染料,有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐,即氯化美蓝,有色部分为阳离子。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料(即天青)。将适量伊红、美蓝溶解在甲醇中,即为瑞氏染料。甲醇的作用:一是溶解美蓝和伊红;二是固定细胞形态。

2.染色原理 既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质;原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。

3.pH值的影响:细胞各种成分均属蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液pH而定,在偏酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,红细胞和嗜酸性粒细胞染色偏红,细胞核呈淡蓝色或不染色;在偏碱性环境中负电荷增多,易与美蓝结合,所有细胞呈灰蓝色,颗粒呈深暗,嗜酸性颗粒呈暗褐,甚至棕黑色,中性颗粒偏粗,呈紫黑色。稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则可导致细胞染色反应呈色异常,形态难以识别,甚至错误。

【知识点随手练】

一、单项选择题

1.瑞氏染色法的染色原理

A.物理吸附

B.化学亲和

C.物理吸附和化学亲和

D.化学反应

E.物理性结合

2.瑞氏染色中起溶解作用的有机溶剂是

A.无水乙醇

B.甲醇

C.氯仿

D.二甲苯

E.乙二醇

3.瑞氏染料是一种复合染料,其组成是

A.酸性伊红和碱性美蓝

B.碱性品红和碱性美蓝

C.甲基红和亚甲蓝

D.伊红和糊精

E.碱性伊红和酸性美蓝

【知识点随手练参考答案及解析】

一、单项选择题

1.【答案及解析】C。染色原理:既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。

2.【答案及解析】B。甲醇一方面可以解离ME成为M+和E-。另一方面,其强大的脱水作用可将细胞瞬间固定,增强染色效果。

3.【答案及解析】A。瑞氏染料是由酸性伊红和碱性美蓝组成的复合染料,伊红为钠盐,有色部分为阴离子,美蓝为氯盐,有色部分为阳离子。

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