ELISA，即酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay），是一种基于抗原与抗体特异性结合反应的高灵敏度和特异性的检测方法。它主要用于测定血清、细胞培养上清液等生物样本中的微量蛋白质、多肽、激素、病毒抗原或抗体等物质。
ELISA的基本原理是利用固相载体（如微孔板）吸附抗原或抗体，然后加入待测样品及酶标二抗，通过洗涤去除未结合的成分后，再加底物显色。根据颜色变化程度来判断目标分子的存在与否及其浓度大小。具体步骤如下：
1. 包被：将已知的抗原（直接法）或抗体（间接法、竞争法等）固定在固相载体表面。
2. 封闭：加入封闭液以减少非特异性结合。
3. 加样：向孔中加入待测样本，使其中的目标分子与包被物发生特异性结合。
4. 洗涤：去除未结合的物质。
5. 酶标抗体孵育：加入能与目标分子或其复合物特异结合并带有酶标记的二抗。
6. 再次洗涤：去除游离的酶标抗体。
7. 底物显色：加入底物溶液，酶催化底物产生颜色变化。
8. 终止反应：加终止液停止颜色变化过程。
9. 测定光密度值（OD）并进行数据分析。
ELISA技术广泛应用于临床检验、科研实验等领域。例如，在传染病诊断中用于检测乙肝表面抗原、艾滋病病毒抗体等；在肿瘤标志物检测方面，可用于测定CEA、AFP等多种指标；此外还被用来研究细胞因子水平变化、药物残留分析等多个方向。
ELISA的基本原理是利用固相载体（如微孔板）吸附抗原或抗体，然后加入待测样品及酶标二抗，通过洗涤去除未结合的成分后，再加底物显色。根据颜色变化程度来判断目标分子的存在与否及其浓度大小。具体步骤如下：
1. 包被：将已知的抗原（直接法）或抗体（间接法、竞争法等）固定在固相载体表面。
2. 封闭：加入封闭液以减少非特异性结合。
3. 加样：向孔中加入待测样本，使其中的目标分子与包被物发生特异性结合。
4. 洗涤：去除未结合的物质。
5. 酶标抗体孵育：加入能与目标分子或其复合物特异结合并带有酶标记的二抗。
6. 再次洗涤：去除游离的酶标抗体。
7. 底物显色：加入底物溶液，酶催化底物产生颜色变化。
8. 终止反应：加终止液停止颜色变化过程。
9. 测定光密度值（OD）并进行数据分析。
ELISA技术广泛应用于临床检验、科研实验等领域。例如，在传染病诊断中用于检测乙肝表面抗原、艾滋病病毒抗体等；在肿瘤标志物检测方面，可用于测定CEA、AFP等多种指标；此外还被用来研究细胞因子水平变化、药物残留分析等多个方向。
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