ELISA，即酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay），是一种常用的生物化学技术，主要用于检测样本中的特定蛋白质、抗体或其他分子。这项技术基于抗原与抗体之间的特异性结合反应，并利用酶标记的二抗来放大信号，从而实现对目标物质的高度敏感检测。

ELISA的基本原理可以分为以下几个步骤：
1. 包被：首先将已知的抗原或抗体固定在固相载体（如微孔板）上。
2. 封闭：使用非特异性蛋白溶液覆盖未结合位点，以减少背景干扰。
3. 加样：加入待测样本，如果样本中含有目标分子，则会与包被物发生特异性结合。
4. 洗涤：去除未结合的物质。
5. 抗体孵育：加入酶标记的一抗或二抗，使其与已结合的目标分子进一步反应。
6. 再次洗涤：清除未参与反应的抗体。
7. 底物显色：向孔中添加酶底物溶液，经过一段时间后会产生颜色变化。
8. 终止反应并读数：加入终止液停止显色过程，并使用分光光度计测量吸光值。

ELISA的应用范围非常广泛：
- 临床诊断：用于检测血液、尿液等生物样本中的各种病原体抗体或抗原，如HIV、HBV、梅毒螺旋体等。
- 免疫学研究：评估免疫反应强度及性质，监测疫苗效果等。
- 生物制药：在药物研发过程中测定目标蛋白表达水平和纯度。
- 食品安全检测：检查食品中可能存在的过敏原或污染物。

总之，ELISA因其操作简便、灵敏度高、特异性强等特点，在医学检验领域占据着重要地位。