影响酶活性测定的因素有很多，主要包括以下几个方面：
1. 温度：温度对酶活性有显著影响。每种酶都有其最适作用温度，在此温度下，酶的催化效率最高。温度过低或过高都会导致酶活性下降。
2. pH值：不同的酶在不同pH条件下表现出来的活性也不同。每一种酶都有一个最适合它发挥功能的pH范围，偏离这个范围可能会导致酶的空间结构发生变化，从而影响其活性。
3. 底物浓度：底物是酶催化的对象，当底物浓度增加时，反应速率也会随之加快，但达到一定程度后，即使再提高底物浓度，反应速率也不会有明显变化，因为此时所有能参与催化作用的酶分子都已经与底物结合了。
4. 激活剂和抑制剂：某些物质可以作为激活剂促进酶活性，而另一些则可能成为抑制剂降低酶活性。这些物质通过改变酶的空间构象或者直接与酶上的特定位点相结合来发挥其作用。
5. 酶浓度：在一定条件下，随着酶浓度的增加，反应速率也会相应提高。但是当底物浓度相对较低时，即使酶浓度很高，也无法显著提升反应速度。
6. 共因子和辅基：很多酶需要与特定的共因子或辅基相结合才能表现出活性。这些小分子物质通常参与了电子传递、氢转移等过程，对于维持酶的功能至关重要。
7. 离子强度及缓冲液类型：溶液中的离子浓度及其种类也会影响酶的稳定性以及催化效率。合适的缓冲系统能够保持pH稳定，并提供必要的金属离子作为辅助因子。

以上就是影响酶活性测定的一些主要因素，在实际操作中需要综合考虑这些条件，以确保实验结果准确可靠。