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细菌染色的基本步骤是什么?

2025-11-18 16:10 来源:正保医学教育网
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细菌染色是微生物学中的一项基本技术,用于观察和鉴定细菌。最常用的染色方法是革兰氏染色法,它可以帮助区分两大类细菌:革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。下面是进行细菌染色的基本步骤:
1. 准备载玻片:首先在干净的载玻片上滴加少量无菌水或生理盐水,然后用接种环从培养基中取一小部分待检测的细菌样本,在液滴中轻轻搅拌以分散细菌。
2. 涂片制备:将含有细菌的液体均匀涂抹成薄层,覆盖大约1/3到1/2的载玻片面积。注意不要过厚或者过稀。
3. 固定涂片:让涂片自然干燥后,通过火焰上方快速移动几次来固定细菌细胞(不要直接接触火焰)。这一步可以使细菌粘附在玻璃表面,并杀死细菌以防止污染。
4. 初染:滴加结晶紫染液覆盖整个涂片区域,静置1分钟。这是为了给所有细菌提供初步的颜色标记。
5. 水洗:轻轻倾斜载玻片,用缓慢流动的蒸馏水或自来水冲洗掉多余的染色剂,直到水流清澈为止。
6. 脱色:对于革兰氏染色来说,接下来使用95%乙醇或者乙醇-丙酮混合液作为脱色剂,滴加在涂片上作用约10秒至30秒。这一步可以去除革兰氏阴性菌的颜色而保留革兰氏阳性菌的紫色。
7. 再染:为了使革兰氏阴性菌能够被观察到,需要使用番红等复染剂进行再染色,持续大约1分钟时间。
8. 最终水洗和干燥:再次用水轻轻清洗掉多余的染色物质,并用吸水纸轻轻拍干载玻片表面。
9. 观察:将处理好的涂片放置在显微镜下观察。革兰氏阳性菌应呈现蓝紫色,而革兰氏阴性菌则显示为红色或粉红色。

通过这些步骤,可以有效地对细菌进行染色,并根据其颜色特征来初步判断细菌的类型。

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