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M蛋白测定方法有哪些?

2026-02-06 19:53 来源:正保医学教育网
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M蛋白即单克隆免疫球蛋白,是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常免疫球蛋白。M蛋白测定方法有多种,以下为您详细介绍。

血清蛋白电泳是测定M蛋白的基本方法。在pH 8.6的缓冲液中,血清蛋白质在电场中向阳极泳动,不同蛋白质因其所带电荷、分子量和分子形状不同而泳动速度有差异,从而分离成不同区带。正常血清蛋白电泳图谱可分为清蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白五个区带,而M蛋白在电泳图谱上常表现为异常浓集的窄区带,多位于γ区或β区。该方法操作简单、成本低,但敏感性相对较低,对一些含量较低的M蛋白可能无法准确检测。

免疫电泳是将区带电泳与免疫扩散相结合的一种免疫化学分析技术。先将血清进行区带电泳,使不同蛋白质成分分离,然后在与电泳方向平行的槽中加入相应的抗血清,让抗原和抗体进行双向扩散,形成沉淀线。通过观察沉淀线的形状、位置和数量等,可对M蛋白的类型进行初步鉴定,能区分IgG、IgA、IgM等不同类型的M蛋白,还可判断其轻链类型(κ或λ),其特异性较高,但操作相对复杂,耗时较长。

免疫固定电泳是在血清蛋白电泳的基础上发展而来的一种更为敏感和特异的方法。先将血清在琼脂糖凝胶上进行区带电泳,使蛋白质分离,然后在凝胶表面覆盖抗血清,让抗血清与相应的抗原在凝胶内结合形成免疫复合物并固定下来,经过染色后可清晰地观察到特异性的免疫沉淀条带。该方法能准确鉴定M蛋白的类型,包括IgG、IgA、IgM、IgD、IgE及其轻链类型,敏感性高,是目前鉴定M蛋白的“金标准”,广泛应用于临床诊断和研究。

此外,还有速率散射比浊法,它是利用抗原 - 抗体结合形成复合物的动力学变化来测定M蛋白的含量。在一定条件下,抗原与抗体快速结合形成免疫复合物,使反应液的浊度发生变化,通过检测浊度的变化速率来计算抗原的含量。该方法操作简便、快速,可

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