常见膜载体免疫测定主要有免疫渗滤试验、免疫层析试验等,它们在原理上存在一定差异。
免疫渗滤试验的原理基于斑点免疫结合试验。以双抗体夹心法为例,先将特异性抗体固定在硝酸纤维素膜上形成固相载体。当待检标本滴加在膜上时,由于膜的毛细管作用,标本会向四周渗透扩散。标本中的抗原会与膜上的抗体结合,形成抗原 - 抗体复合物。然后加入酶标记的抗体,它会与已结合在膜上的抗原结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标记抗体复合物。最后加入底物,酶催化底物显色,通过肉眼观察颜色变化来判断结果。其特点是操作简便、快速,能在短时间内得出结果,但灵敏度相对有限。
免疫层析试验则是利用了微孔膜的毛细管作用。同样以双抗体夹心法来说,在硝酸纤维素膜的特定区域分别包被检测线(T线)的特异性抗体和质控线(C线)的抗体。样品滴加在样品垫上后,会沿着膜向前移动。如果样品中存在抗原,抗原会与结合垫上的胶体金标记抗体结合,形成抗原 - 胶体金标记抗体复合物。当复合物移动到检测线时,会被T线的抗体捕获,形成双抗体夹心结构,出现肉眼可见的红色条带。未结合的胶体金标记抗体继续移动到质控线,与C线抗体结合显色,作为实验有效的标志。免疫层析试验操作更为简单、快速,可单人份检测,适合现场快速检测,但定量检测能力较差。
总之,不同的膜载体免疫测定原理各有特点,在灵敏度、操作便捷性、检测速度、定量能力等方面存在差异,可根据实际需求选择合适的检测方法。
免疫渗滤试验的原理基于斑点免疫结合试验。以双抗体夹心法为例,先将特异性抗体固定在硝酸纤维素膜上形成固相载体。当待检标本滴加在膜上时,由于膜的毛细管作用,标本会向四周渗透扩散。标本中的抗原会与膜上的抗体结合,形成抗原 - 抗体复合物。然后加入酶标记的抗体,它会与已结合在膜上的抗原结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标记抗体复合物。最后加入底物,酶催化底物显色,通过肉眼观察颜色变化来判断结果。其特点是操作简便、快速,能在短时间内得出结果,但灵敏度相对有限。
免疫层析试验则是利用了微孔膜的毛细管作用。同样以双抗体夹心法来说,在硝酸纤维素膜的特定区域分别包被检测线(T线)的特异性抗体和质控线(C线)的抗体。样品滴加在样品垫上后,会沿着膜向前移动。如果样品中存在抗原,抗原会与结合垫上的胶体金标记抗体结合,形成抗原 - 胶体金标记抗体复合物。当复合物移动到检测线时,会被T线的抗体捕获,形成双抗体夹心结构,出现肉眼可见的红色条带。未结合的胶体金标记抗体继续移动到质控线,与C线抗体结合显色,作为实验有效的标志。免疫层析试验操作更为简单、快速,可单人份检测,适合现场快速检测,但定量检测能力较差。
总之,不同的膜载体免疫测定原理各有特点,在灵敏度、操作便捷性、检测速度、定量能力等方面存在差异,可根据实际需求选择合适的检测方法。

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