淋巴细胞分离的依据主要基于淋巴细胞的生物学特性,包括细胞大小、密度、表面抗原以及与特定介质的亲和力等方面。
从细胞大小和密度角度来看,不同类型的血细胞大小和密度存在差异。淋巴细胞相对其他血细胞如红细胞、粒细胞等,在大小和密度上有其自身特点。利用密度梯度离心法就是依据这一原理。常用的分层液如Ficoll分层液,其密度介于淋巴细胞和其他血细胞之间。将抗凝血叠加于分层液之上,通过离心,不同密度的细胞会分布于不同的层面。红细胞和粒细胞因密度较大,会沉积于管底;而血小板由于密度小,会悬浮于血浆层中;淋巴细胞和单核细胞的密度与分层液接近,会漂浮在分层液界面,从而实现淋巴细胞的初步分离。
从表面抗原特性来说,淋巴细胞表面存在多种特异性抗原,如CD系列抗原。可以利用抗原 - 抗体反应的原理进行分离。比如免疫磁珠分离法,将特异性抗体包被在磁珠上,当磁珠与细胞悬液混合时,磁珠上的抗体就会与淋巴细胞表面相应的抗原结合。然后将混合液置于磁场中,结合了磁珠的淋巴细胞会被吸附在磁场一侧,而未结合的细胞则可被洗脱,这样就能把目标淋巴细胞分离出来。此外,流式细胞术也是基于细胞表面抗原的检测来分离淋巴细胞。它通过荧光标记的特异性抗体与淋巴细胞表面抗原结合,当细胞通过流式细胞仪的检测系统时,根据荧光信号的有无和强弱,对细胞进行分类和分离。
另外,淋巴细胞对某些介质的亲和力也可用于分离。例如,单核细胞具有吸附于玻璃、塑料表面的特性,而淋巴细胞则没有这种特性。利用这一差异,将细胞悬液置于玻璃或塑料培养皿中,经过一定时间孵育,单核细胞会吸附在表面,而淋巴细胞则仍悬浮于培养液中,通过收集培养液即可获得相对纯化的淋巴细胞。综上所述,这些依据为淋巴细胞的有效分离提供了多种可行的方法和技术。
从细胞大小和密度角度来看,不同类型的血细胞大小和密度存在差异。淋巴细胞相对其他血细胞如红细胞、粒细胞等,在大小和密度上有其自身特点。利用密度梯度离心法就是依据这一原理。常用的分层液如Ficoll分层液,其密度介于淋巴细胞和其他血细胞之间。将抗凝血叠加于分层液之上,通过离心,不同密度的细胞会分布于不同的层面。红细胞和粒细胞因密度较大,会沉积于管底;而血小板由于密度小,会悬浮于血浆层中;淋巴细胞和单核细胞的密度与分层液接近,会漂浮在分层液界面,从而实现淋巴细胞的初步分离。
从表面抗原特性来说,淋巴细胞表面存在多种特异性抗原,如CD系列抗原。可以利用抗原 - 抗体反应的原理进行分离。比如免疫磁珠分离法,将特异性抗体包被在磁珠上,当磁珠与细胞悬液混合时,磁珠上的抗体就会与淋巴细胞表面相应的抗原结合。然后将混合液置于磁场中,结合了磁珠的淋巴细胞会被吸附在磁场一侧,而未结合的细胞则可被洗脱,这样就能把目标淋巴细胞分离出来。此外,流式细胞术也是基于细胞表面抗原的检测来分离淋巴细胞。它通过荧光标记的特异性抗体与淋巴细胞表面抗原结合,当细胞通过流式细胞仪的检测系统时,根据荧光信号的有无和强弱,对细胞进行分类和分离。
另外,淋巴细胞对某些介质的亲和力也可用于分离。例如,单核细胞具有吸附于玻璃、塑料表面的特性,而淋巴细胞则没有这种特性。利用这一差异,将细胞悬液置于玻璃或塑料培养皿中,经过一定时间孵育,单核细胞会吸附在表面,而淋巴细胞则仍悬浮于培养液中,通过收集培养液即可获得相对纯化的淋巴细胞。综上所述,这些依据为淋巴细胞的有效分离提供了多种可行的方法和技术。

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