扩散法是临床检验技师常用的一种检测方法，以纸片扩散法检测细菌对抗菌药物的敏感性为例，其操作步骤如下：

首先是准备工作。要准备好合适的培养基，一般采用水解酪蛋白（M - H）琼脂培养基，将其加热融化后，待冷却至 45 - 50℃时，在无菌条件下倾注于无菌平皿中，制成厚度约 4mm 的平板，放置使其凝固。同时，准备好标准的抗菌药物纸片，这些纸片应保存在合适的条件下，确保其有效性。还要准备待检的细菌培养物，可从患者标本中分离培养得到纯菌，然后用生理盐水或肉汤将菌液浓度调整至 0.5 麦氏浊度标准，相当于 1.5×10⁸CFU/ml。

接着进行接种。用无菌棉拭子蘸取已调整好浓度的菌液，在管壁上挤压除去多余的菌液，然后在 M - H 琼脂平板表面均匀涂抹三次，每次旋转平板约 60°，最后沿平板边缘涂抹一周，以保证菌液均匀分布。接种后，在室温下干燥 3 - 5 分钟。

之后是贴抗菌药物纸片。用无菌镊子或纸片分配器将抗菌药物纸片贴在已接种细菌的平板表面，各纸片中心间距应大于 24mm，纸片距平板边缘应大于 15mm。纸片贴上后不可再移动，因为移动会影响抑菌圈的形成。

然后是培养。将贴好纸片的平板倒置，放入 35℃孵箱中培养 16 - 18 小时（对于一些特殊细菌，如肺炎链球菌等，需在含 5%二氧化碳的环境中培养）。

最后是结果判读。培养结束后，用游标卡尺或直尺测量抑菌圈的直径，根据标准的判读表判断细菌对该抗菌药物是敏感、中介还是耐药。同时要注意观察抑菌圈的形态、是否有云雾状生长等情况，以确保结果的准确性。

整个扩散法操作过程需要严格遵守无菌操作原则，以保证结果的可靠性和准确性，为临床治疗提供有效的依据。