医学教育网小编整理了针对β-内酰胺酶的常见检测方法如下，请各位考生仔细查看。

（一）微生物活性消失法

此法是以一株对青霉素高度敏感的枯草芽胞杆菌的指示菌，如待检菌株产生β内酰胺酶，破坏了青霉素，则在划线两边有枯草芽胞菌生长，否则指示菌仍呈很大抑菌环。

β内酰胺酶破坏β内酰胺环，碘与被打开β内酰胺环结合，使蓝色的淀粉-碘复合物转变成无色。

方法：用pH6.0磷酸缓冲液配制青霉素悬液6000μg/ml，取该液0.1ml置于微量稀释板凹孔中，挑选检测菌株数个菌落混悬于其中，摇动30min，静置室温中1h，加淀粉液2滴，再加碘液1滴，混合，立即观察颜色变化，阳性者当加入碘液后，首先立即出现蓝色、如在10min内消失蓝色，提示该菌产生β-内酰胺酶。

（三）酸测量法

青霉素被β-内酶胺酶水解后成青霉素酸，pH值下降6.8以下，用酚红指示剂，由红（紫）色（原液：枸橼酸缓冲液pH8.5）→黄色（pH6.8以下）。

（四）头孢硝基噻吩显色反应

头孢硝基噻吩（Nitrocefin）的β-内酰胺环被β-内酰胺酶打开，基质由黄色变成红色。

液体方法：10mg头孢硝基噻吩溶解于lml的二甲基亚砜中，然后用0.1mol/LPBS（pH7.0）再稀释1：20，最后浓度为500μg/m1，溶液呈黄或淡橙色，保存4～10℃，可用几个星期。取该溶液0.05ml置放于微量稀释板凹孔中或小试管中，挑取被试菌落，制成浓厚悬液，与凹孔中基质液混和，室温10～30min，头孢硝基噻吩由黄变成红色为阳性，若显色不明显，观察可延长6h.

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