1.水相的最适pH值
2.酸性染料的影响
提取完全是提取常数和酸性染料阴离子的浓度密切相关的，而提取常数的大小由是与B-的种类和有机溶剂的选择密切相关的。一般用的有甲基橙、溴麝香草酚蓝（BTB）和溴甲酚绿等。
3.有机溶剂的影响
离子对提取常数的大小还与有机溶剂的性质有关。通常有机溶剂与离子对形成氢键的能力强，则提取效率高，如氯仿和二氯甲烷等具有中等程度的提取率，并且提取的选择性也较好，为最常用的有机溶剂。
4.水分的影响
有有机溶剂提取有色的离子对时，应严防水分的混入。
5.共存物的影响
一般赋形剂，重型、酸性乙基弱碱性的医学教育网|收集整理物质均不干扰测定，强酸可改变染料溶液或缓冲液的pH，因而对测定有干扰。
以上五种影响因素中，水相的最适pH和有机医学教育网|收集整理溶剂对离子对的提取完全是酸性染料比色法的试验关键。
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