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脑脊液蛋白质定量测定方法-检验技师考试

2014-02-25 11:10 来源:
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医学教育网小编搜集了有检验技师考试复习的知识点,供广大考生参考,如下:

正常时脑脊液的蛋白质含量较其他体液均低,因此测定时需选用敏感的方法。测定脑脊液蛋白质的方法很多,主要围绕提高敏感度及白蛋白和球蛋白含量在形成浊度与成色上一致。

常用的方法有:考马斯亮蓝法、磺基水杨酸-硫酸钠浊度法、邻苯三酚红钼络合法。染料结合法如考马斯亮蓝法,虽然灵敏度很高,但对球蛋白显色较浅而使结果偏低,因为脑脊液中的蛋白质主要为白蛋白,所以有人认为考马斯亮蓝法对球蛋白的显色过浅,不会影响该法的临床应用价值,该法形成的考马斯亮蓝-蛋白质复合物易粘附器皿,影响比色杯,因此测定后必须用95%乙醇或甲醇清洗。浊度法如磺基水杨酸-硫酸钠浊度法虽然操作简单,但敏感性不如考马斯亮蓝法,必须先经离心沉淀,以排除细胞及细胞蛋白的影响。浊度法是难得到准确结果的测定方法,影响因素较多,但因操作简便,结果对临床有诊断意义,故仍为大多数实验室采用。所以在操作时应注意实验时的温度、操作手法对形成浊度等的影响。脑脊液蛋白浓度过高时,一定要稀释后进行测定,否则对结果影响较大。本法加试剂后,10分钟内浊度进行性增加,到10分钟时达到顶点。因此必须严格掌握时间,才能得到正确结果。化学结合法,如邻苯三酚红钼络合法灵敏度同考马斯亮蓝G-250,色素不吸附器皿,邻苯三酚红试剂国产价廉,故应用较多。

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