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单个补体成分测定

2009-10-13 14:04 来源:
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  在30多种补体成分中,主要检测C3、CA、C1q、B因子和C1酯镁抑制物。测定方法分为免疫溶血法及免疫化学法。

  1.免疫溶血法

  溶血法主要根据抗原与其特异性抗体(IgG、IgM型)结合后可激活补体的经典途径,导致细胞溶解。该方法中抗原为SRBC,抗体为兔或马抗SRBC的抗体,即溶血素。将两者组合作为指示系统参与反应。

  试验中有两组补体参与,一组是作为实验反应系统的补体,此类试剂可选用先天缺乏某单一补体成分的动物或人血清,如某些人可天然缺乏C2、豚鼠缺C5、家兔缺C6;也可利用化学试剂人为灭活正常血清中某种成分制备缺乏该成分的补体试剂,加入致敏SRBC(检测经典途径补体成分用)或总红细胞RRBC(检测替代途径补体成分用)指示系统后,此时由于补体级联反应体系中缺乏某种补体成分,不能使补体连续激活,不发生溶血。

  另一组为待测血清中的补体,当加入待测血清,使原来缺乏的成分得到补充,补体成分齐全,级联反应恢复,产生溶血。溶血程度与待测补体成分活性有关,仍以50%溶血为终点。

  免疫溶血法无须特异仪器与设备,快速,但敏感性较低,医学|教育网搜集整理影响因素多。该法不是检测某补体成分的具体含量,而是检测其活性,在某些需了解该成分活性情况下,本试验适用。

  2.免疫化学法

  免疫化学法分为单向免疫扩散法、火箭免疫电泳、透射比浊法和散射比浊法。前两种方法已逐渐趋于淘汰,后两种方法通过仪器对补体的C3、C4、B因子等单个成分进行测定。待测血清标本的C3、C4成分适当稀释后与检测用相应抗体结合形成复合物,反应介质中的PEG可使该复合物沉淀,仪器对复合物产生的光散射或透射信号进行自动检测,并换算成所测成分的浓度单位。

  自动免疫化学法检测补体成分方法简单、特异、重复性好,可反映所测补体成分的绝对值,并能进行标准化流程管理和质控,是当前主要检测方法。

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