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自然杀伤细胞(NK)及功能的检测

2009-09-24 14:03 来源:
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  NK细胞表面至少存在CD2、CD11b、CD11c、CD16、CD56和CD69等多种抗原,但均非NK细胞所特有,因此极少以CD系列抗原为指标鉴定和计数NK细胞,现多检测NK细胞活性,因NK细胞具有细胞介导的细胞毒作用,它能直接杀伤靶细胞。测定人NK细胞活性多以K562细胞株作为靶细胞,而测小鼠NK细胞活性则用YAC细胞株,检测方法多种多样。

  1.形态法:将效应细胞与靶细胞按一定比例混合温育,继医|学教育网搜集整理用台盼蓝或伊红Y等活细胞拒染的染料处理,然后分别计数着染的死细胞和不着染的活细胞,推算NK细胞活性。

  2.酶释放法:将效应细胞与靶细胞按一定比例混合温育,离心沉淀,取上清液检测靶细胞遭破坏后释放出的酶含量。

  3.荧光法:用荧光素标记靶细胞,经与效应细胞共温后,离心去上清,用荧光计检测剩余的活靶细胞的荧光。

  4.核素法:将效应细胞与靶细胞按一定比例混合共温后,离心检测上清液或剩余靶细胞放射性的量,间接反映其活性。方法有靶细胞胞浆释放法和胞核释放法两种。

  5.化学发光法:当效应细胞与靶细胞接触时,效应细胞呼吸暴发,生成极不稳定的O2-及OH-,放出光子,在发光剂存在条件下,可被光电倍增管接受和计数,发光量与NK细胞杀伤能力相关。

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