医学教育网临床医学检验主管技师：《答疑周刊》2016年第23期：

【临床检验基础】

学员提问：肾上腺皮质功能减退，为什么氯减低？

解析：肾上腺皮质功能减退时，由于醛固酮类皮质激素分泌减少，肾小管再吸收钠、氯不足，尿钠与氯化物排出增多，引起血氯减低。

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学员提问：percoll分离法由上到下顺序是？

解析：Percoll是经过聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrolidone，PVP)处理的硅胶颗粒混悬液，对细胞无毒性和刺激性。Percoll混悬液的硅胶颗粒大小不一，经过高速离心后，可形成一个连续密度梯度，将比重不同的细胞分离纯化。

将1份10XPBS与9份Percoll贮存液混合，制成等渗Percoll悬液，此悬液被认为是100%Percoll悬液，其密度为1.1294g/ml.用PBS或细胞培养液稀释100%Percoll而获得所需密度的Percoll分离液用于相应细胞的分离。若分离淋巴细胞应使用1.0777g/ml，配制时用稀释液稀释60%即可。

取比重1.077的Percoll分离液Xml与离心管中，将等倍稀释的抗凝血1/2Xml小心叠加在分离液上，经水平离心(1500rpm)后，便得四个细胞层，从而分离出淋巴细胞。表层为死细胞残片和血小板，底层为粒细胞和红细胞，中间有两层，上层富含单核细胞，下层富含淋巴细胞。

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学员提问：离子交换层析的主要原理是利用物质什么？

解析：离子交换层析是根据蛋白质所带电荷的差异进行分离纯化的一种方法。蛋白质的带电性是由蛋白质多肽中带电氨基酸决定的。由于蛋白质中氨基酸的电性又取决于介质中的pH，所以蛋白质的带电性也就依赖于介质的pH。当pH较低时，负电基团被中和，而正电基团就很多； 在pH较高时，蛋白质的电性与低pH时相反。当蛋白质所处的pH，使蛋白质的正负电荷相等，此时的pH称为等电点。离子交换层析所用的交换剂是经酯化、氧化等化学反应引入阳性或阴性离子基团制成的，可与带相反电荷的蛋白质进行交换吸附。带有阳离子基团的交换剂可置换吸附带负电荷的物质，称为阴离子交换剂，如DEAE-纤维素树脂；反之称为阳离子交换剂，如CM-纤维素树脂。不同的蛋白质有不同的等电点，在一定的条件下解离后所带的电荷种类和电荷量都不同，因而可与不同的离子交换剂以不同的亲和力相互交换吸附。当缓冲液中的离子基团与结合在离子交换剂上的蛋白质相竞争时，亲和力小的蛋白质分子首先被解吸附而洗脱，而亲和力大的蛋白质则后被解吸附和洗脱。因此，可通过增加缓冲液的离子强度和/或改变酸碱度，便可改变蛋白质的吸附状况，使不同亲和力的蛋白质得以分离。

【临床免疫学和免疫检验】

学员提问：老师你好，反向间接凝集反应测的是抗体还是抗原？

解析：反向间接凝集反应红细胞包被抗体，用以检测抗原的血凝反应，称为反向间接血凝反应(RPHA)。

下列疾病不属于Ⅰ型变态反应的是()。

A、支气管哮喘

B、药物过敏性荨麻疹

C、过敏性鼻炎

D、过敏性休克

E、血清病

【正确答案】 E

【答案解析】 IgE的Fc段能与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的受体结合，介导Ⅰ型变态反应的发生，因此又称亲细胞抗体。IgE多由鼻腔、扁桃体、支气管、胃肠道黏膜固有层的浆细胞所产生。Ⅰ型变态反应性疾病包括：支气管哮喘、药物过敏性荨麻疹、过敏性鼻炎、过敏性休克等。

学员提问：血清病是几型变态反应？

解析：血清病属于Ⅲ型超敏反应。血清病是指因输注异种血清导致的Ⅲ型变态反应。

【临床血液学】

学员提问：Rh阴性血的母亲，小孩Rh阳性,换血需要用阴性还是阳性的洗涤红细胞？

解答：Rh阴性的洗涤红细胞。

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