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抗血清纯化的常见方法有哪些?

2025-09-06 10:23 来源:正保医学教育网
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抗血清纯化是免疫学研究和诊断试剂生产中的重要步骤,目的是从动物血清中去除非特异性成分,提高抗体的浓度和特异性。常见的抗血清纯化方法有以下几种:
1. 盐析法 这是最传统的纯化方法之一,主要是利用不同蛋白质在不同盐浓度下溶解度不同的特点来实现分离。最常用的是硫酸铵沉淀法。
2. 层析技术 包括凝胶过滤层析、离子交换层析和亲和层析等。其中亲和层析是目前应用最为广泛的方法,它通过特异性配体与目标抗体结合的原理进行纯化,如使用Protein A或Protein G作为固定相。
3. 超滤法 利用半透膜的选择透过性,在压力驱动下使小分子物质透过而大分子抗原-抗体复合物被截留,从而达到浓缩和初步分离的目的。
4. 密度梯度离心 通过在离心管中形成连续的密度梯度介质层,不同密度的蛋白质会在不同的位置形成带状分布,进而实现分离纯化。
5. 免疫吸附法 将特异性抗原固定于固相载体上,与含有多克隆抗体的血清混合后,经过洗涤去除未结合成分,最后洗脱获得高纯度的目标抗体。

选择哪种方法取决于实验室的具体条件、所需抗体的数量和质量要求等因素。在实际操作过程中,往往需要根据具体情况组合使用多种技术以达到最佳效果。

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