在单克隆抗体制备过程中，融合细胞筛选是确保获得高效价、高特异性抗体的关键步骤。这个过程主要涉及以下几个关键环节：
1. 选择合适的融合剂：常用的融合剂有聚乙二醇（PEG），它能够有效地促进脾细胞与骨髓瘤细胞的融合。
2. 融合后的稀释和培养：将融合产物进行适当比例的稀释，然后接种到96孔板中培养。每孔中的细胞数量需控制在一定范围内，以利于后续筛选。
3. 筛选方法的选择：通常采用HAT选择性培养基来淘汰未融合的骨髓瘤细胞及其同源细胞对。只有成功融合了脾细胞的杂交瘤细胞能在这种条件下存活并增殖。
4. 抗体检测与克隆化：通过ELISA等技术对抗体产生情况进行初步筛选，挑选出阳性孔进一步进行有限稀释法或软琼脂克隆形成试验以获得单一克隆来源的杂交瘤细胞系。
5. 扩增培养及抗体生产：从上述步骤中选出最优的杂交瘤细胞株，在适宜条件下大规模培养并收集上清液中的单克隆抗体用于后续研究和应用。
以上就是关于单克隆抗体制备中融合细胞筛选的关键步骤，希望对你有所帮助。
1. 选择合适的融合剂：常用的融合剂有聚乙二醇（PEG），它能够有效地促进脾细胞与骨髓瘤细胞的融合。
2. 融合后的稀释和培养：将融合产物进行适当比例的稀释，然后接种到96孔板中培养。每孔中的细胞数量需控制在一定范围内，以利于后续筛选。
3. 筛选方法的选择：通常采用HAT选择性培养基来淘汰未融合的骨髓瘤细胞及其同源细胞对。只有成功融合了脾细胞的杂交瘤细胞能在这种条件下存活并增殖。
4. 抗体检测与克隆化：通过ELISA等技术对抗体产生情况进行初步筛选，挑选出阳性孔进一步进行有限稀释法或软琼脂克隆形成试验以获得单一克隆来源的杂交瘤细胞系。
5. 扩增培养及抗体生产：从上述步骤中选出最优的杂交瘤细胞株，在适宜条件下大规模培养并收集上清液中的单克隆抗体用于后续研究和应用。
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