支原体血清学检验方法有多种，在临床诊断和研究中发挥着重要作用。

补体结合试验是较为经典的方法之一。它的原理是利用抗原与抗体结合后可激活补体的特性。当待检血清中存在针对支原体的特异性抗体时，与相应的支原体抗原结合，再加入补体，补体被激活。之后通过加入指示系统（绵羊红细胞和溶血素）来判断结果。如果补体被抗原 - 抗体复合物结合，指示系统就不会发生溶血，为阳性反应；反之则为阴性。该方法对于支原体感染的诊断有一定价值，但敏感性和特异性可能受到多种因素影响。

间接血凝试验操作相对简便。其基本原理是将支原体抗原吸附于红细胞表面，当待检血清中存在特异性抗体时，会与吸附有抗原的红细胞发生凝集反应。通过观察红细胞的凝集程度来判断抗体的滴度。此方法灵敏度较高，能够快速得出结果，在基层医院和大规模筛查中应用较为广泛。

酶联免疫吸附试验（ELISA）是目前应用较为普遍的方法。它利用酶标记的抗体或抗原，通过酶催化底物显色来检测血清中的支原体抗体。可以检测IgM、IgG等不同类型的抗体。检测IgM抗体有助于早期诊断支原体感染，因为IgM通常在感染早期出现；而检测IgG抗体则可用于了解感染的既往史和病程的进展。ELISA具有灵敏度高、特异性强、可批量检测等优点，能够准确地检测出低水平的抗体。

冷凝集试验主要用于检测肺炎支原体感染。肺炎支原体感染人体后，患者血清中会出现冷凝集素，这种抗体在4℃时可与自身红细胞或“O”型人红细胞发生凝集反应。将患者血清与“O”型人红细胞混合，置于4℃环境中，观察是否出现凝集现象。若出现凝集，再将其置于37℃环境中，凝集现象消失，即为阳性。不过，冷凝集试验的特异性不强，其他一些疾病如传染性单核细胞增多症、风疹等也可能出现假阳性结果。

免疫荧光法是用荧光素标记的抗体与待检血清中的支原体抗原或抗体结合，在荧光显微镜下观察荧光现象来判断结果。直接免疫荧光法是用荧光标记的抗体直接检测标本中的支原体抗原；间接免疫荧光法是先让待检血清中的抗体与支原体