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戊型病毒性肝炎诊断的标准及处理原则

2010-10-31 15:31 医学教育网
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  戊型肝炎的病原血清学诊断试剂目前尚不能在组织培养上获取供诊断用的病毒抗原、化学合成抗原肽和cDNA重组抗原。两者组装的EIA试剂在检测抗HEV-IgG时敏感性和特异性相似。

  1、化学合成寡肽抗原,由位于第二读码框架3′端的B细胞表位决定簇的42个氨基酸和第三读码框架的3′端的33个氨基酸组成,对第一读码框架的依赖于RNA的RNA聚合酶区的部分氨基酸也有合成。此三个读码框架中以第二、三读码框架为优势表位决定簇,一框架的聚合酶片段较差。

  2、CDNA重组抗原:用原核细胞分别表达的第二、三读码框架的3′端编码多肽,证明具有抗原性,可用作组装诊断试剂盒的抗原材料,将第二、三读框的B细胞表位决定簇片段嵌合表达可得嵌合多肽,对第二、三读框都有抗原反应,并且抗原性较分别表达的肽段强。当前国内外检测戊型肝炎均用EIA.其基本原理是:在聚苯乙烯板孔内在碱性条件下包被纯化的戊肝抗原,饱和吸附后洗净未结合的抗原,加待检血清标本(1∶20稀释)洗净,医学教.育网搜集整理加入由辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体(如检测IgG则加标记的抗人IgG,如检测IgM型抗体则加抗人μ链抗体)如果血清中抗HEV阳性,标记抗体可与抗HEV结合,温育,洗净后加OPD底物显橙黄色,在492nm波长下光吸收值(OD值)越大表示阳性强度越大,无色则表示阴性反应。其阳性判定值各厂家产品均有说明。操作方法及注意事项均有说明,在此不多述。

  抗HEV-IgM在疾病的早期出现,可作为HEV病原分型诊断的重要判定标准,从初步的临床检测结果看HEV-IgM的反应强度低于甲型肝炎,持续的时间也较短。因此在病人入院时立即采血做1∶50稀释检测抗HEV-IgM,最晚不能迟于发病后半个月,因抗HEV滴度较低,故凡抗HEV-IgM阳性应检测类风湿因子,如类风湿因子阳性同时抗HEV-IgM阳性时应再进一步稀释血清进行验证,如抗HEV-IgM仍阳性类风湿因子阴性,诊断成立。医学教.育网搜集整理亦可先用抗人IgG与待检血清预先中和,仍能检出IgM则可判为抗HEV-IgM阳性。当前所用的间接IgM检测法特异性较捕捉法差,有待进一步改进。

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