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凝胶内沉淀试验:单向扩散试验

2020-06-15 14:39 医学教育网
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凝胶内沉淀试验:单向扩散试验是检验职称考试会涉及的内容,为了帮助大家了解,医学教育网为大家整理如下:

单向扩散试验:琼脂内混入抗体,待测抗原从局部向琼脂内自由扩散,如抗原和相应抗体结合,则形成沉淀环。

1、试管法:将一定量的抗体混入0.7%琼脂糖溶液中,注入小试管内,上层加抗原溶液使待测抗原在凝胶中自由扩散,在抗原抗体比例恰当位置形成沉淀环。

2、平板法:是将抗体或抗血清混入0.9%琼脂糖内,未凝固前倾注成平板,然后在上打孔,将抗原加入孔中,放37℃让其自由扩散,24~48h后可见孔周围出现沉淀环,测定环的直径或面积计算标本中待测抗原的浓度。有两种计算方法:l)Mancini曲线:适用大分子抗原的和长时间扩散(>48h)的结果,沉淀环直径的平方与抗原浓度呈线性关系c/d2=k.(其中c为抗原浓度d为沉淀环直径k为常数)

3、单向扩散试验检测时的注意点:

(1)抗血清必须特异性强、效价高、亲和力强,在良好条件下保存。

(2)每次测定都必须作标准曲线。

(3)每次测定时必须用质控血清作质控。

(4)注意双环现象(出现了两种抗原性相同成分)。

(5)应用单克隆抗体测量多态性抗原时,测定值偏低;用多克隆抗体测量单克隆病时,测定值偏高。

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以上信息由医学教育网为大家整理,希望对大家有所帮助,更多资讯请关注医学教育网!

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主讲老师:孙海珍老师

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