1.显微镜检查 临床标本采集后先做涂片，革兰染色后镜检，为革兰阴性球杆菌，常成双排列，在吞噬细胞内也有存在，易误认为奈瑟菌属细菌。

2.分离培养 在血平板和麦康凯平板上经35~37℃培养18~24h后，可形成圆形、灰白色、光滑、湿润、边缘整齐、直径2~3mm的菌落，无色素形成;洛菲不动杆菌菌落较小，直径为1~1.5mm:溶血不动杆菌在血平板上可产生β溶血;有些菌株苛养，在血平板上呈针尖样菌落，在营养肉汤中不生长:某些氧化葡萄糖的不动杆菌可使血平板呈独特的棕色。氧化酶阴性，动力阴性，硝酸盐还原试验阴性。

3.耐药性 不动杆菌均对青霉素、氨苄西林和头孢拉定耐药:大多数菌株对氯霉素耐药，不同菌株对二代和三代头孢菌素的耐药性不同，所以每个分离菌株均应进行药敏试验。不发酵菌中，仅本菌属细菌与铜绿假单胞菌可采用 Kirby-Bauer法做药敏试验。多重耐药最多见于醋酸钙不动杆菌、鲍曼不动杆菌和溶血不动杆菌。