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检验师:《答疑周刊》2017年第23期

2017-04-01 14:01 来源:
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检验师:《答疑周刊》2017年第23期:

1.【问题】双向免疫扩散沉淀现象分析?

【解答】双向免疫扩散是利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反应,扩散作用使分处两处的抗原和相应抗体相遇,形成抗原—抗体复合物,比例合适时将出现沉淀现象。

如果是相同抗原两条沉淀线相同会吻合相连;

如果部分相同会部分相切;

如果完全不同,沉淀线也不相同,会交叉而过。

2.【问题】糖尿病酸中毒各指标有什么变化?

【解答】糖尿病代谢性酸中毒时:HCO3-原发性下降,PCO2代偿性下降,血氯代偿性升高,血清钾升高。血钠升高,血钙降低。

3.【问题】酶桥法免疫组化检测和ABC法的区别?

【解答】酶桥法:抗酶抗体作为第三抗体,通过桥抗体(第二抗体),将特异性识别组织抗原的第一抗体与第三抗体连接起来,形成酶联的抗原-抗体复合物,加底物显色。

酶桥法较酶标法的敏感性有所提高,但操作分四步,较为复杂。在酶桥法中,如果抗酶抗体与酶结合弱,在操作中酶常被冲洗掉;如果酶标记在非特异性抗体上就会存在背景着色问题;如果抗酶抗体的非特异性成分与桥抗体结合,就会与抗酶抗体竞争桥抗体结合位点,影响方法的敏感性。

亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术(ABC)法的反应原理是:按一定比例将亲和素与酶标生物素结合,形成可溶性亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)。当其与检测反应体系中的生物素化抗体(直接法)或生物素化第二抗体(间接法)相遇时,ABC中未饱和的亲和素结合部位即可与抗体上的生物素结合,使抗原抗体反应体系与ABC标记体系连成一体进行检测。

ABC法的优点:敏感性高。生物素与亲和素的结合十分牢固,并且1个分子亲和素有4个生物素结合位点,可以分别和生物素化的抗体和酶结合,l个过氧化物酶或免疫球蛋白分子又可结合多个生物素分子,从而形成网络状复合物。医学/教育网搜集整理此外,ABC法尚具有亲和力强、特异性高、第一抗体和第二抗体工作浓度低、操作时间短、可以多重标记等特点。

4.【问题】与可溶性抗原结合的颗粒性载体有什么要求?

【解答】颗粒型载体应具有化学惰性,不得与样品组分起化学反应,且稳定性要好等。

检验师:《答疑周刊》2017年第23期(word版本下载)

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