方法名称： 阿替洛尔原料药－阿替洛尔－高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定阿替洛尔原料药中阿替洛尔的含量。

本方法适用于阿替洛尔原料药。

方法原理： 供试品经流动相溶解并定量稀释，加入内标后再经流动相稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长275nm处检测阿替洛尔的峰面积，计算出其含量。

试剂： 1. 磷酸盐缓冲液

2. 甲醇

3. 辛烷磺酸钠

4. 非那西丁

仪器设备： 1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按阿替洛尔峰计算应不低于2000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：磷酸盐缓冲液 甲醇=7 3，每1000mL中含辛烷磺酸钠1.30g

2.2 检测波长：275nm

2.3 柱温：室温

试样制备： 1. 磷酸盐缓冲液

取磷酸二氢钾6.8g，加水溶解并稀释至1000mL，用磷酸调节pH值至3.0。

2. 内标溶液的制备

精密称取非那西丁适量，加流动相制成每1mL中含80µg的溶液，即为内标溶液。

3. 对照品溶液的制备

精密称取阿替洛尔对照品适量，加流动相适量，超声处理20分钟使溶解，用流动相定量稀释成每1mL中含0.32mg的溶液，精密量取该溶液与内标溶液各5mL，置25mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。

4. 供试品溶液的制备

精密称取供试品适量，加流动相适量，超声处理20分钟使溶解，用流动相定量稀释成每1mL中含0.32mg的溶液，精密量取该溶液与内标溶液各5mL，置25mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤： 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长275nm处测定阿替洛尔（C14H22N2O3）的峰面积，计算出其含量。

参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，二部，p.299。