方法名称： 心脑安颗粒-葛根素的测定-离子对色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定心脑安颗粒中葛根素的含量。

本方法适用于心脑安颗粒中葛根素的含量测定。

方法原理： 供试品研成细粉，用甲醇超声提取后，过滤，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测葛根素的吸收值，计算出其含量。

试剂：

1.甲醇（色谱醇）

2.二次重蒸水

3.磷酸

4.三乙胺

5.甲醇

仪器设备：

1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇+水（20：80，内含0.0024%磷酸和0 .0012三乙胺，pH 4.5）；流速：1.0ml/min。

2.2 检测波长：254nm

2.3 温度：30℃。

试样制备：

1. 对照品溶液的制备

准确称取葛根素对照品10mg，置于100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2mL，置于25mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

将心脑安颗粒研成细粉，精密称取0.3 g，置50 ml量瓶中，加甲醇50 ml，精密称重，超声处理15 min，放至室温。补充甲醇至原重，加流动相稀释至刻度，摇匀，过滤，弃去初滤液。取续滤液5 ml至25 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤： 分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处测定葛根素的吸收值，计算出其含量。

参考文献： 中国医院药学杂志，离子对色谱法测定心脑安颗粒中葛根素含量，2002，22(5)，p261。