方法名称： 葛根芩连片-葛根素的测定-高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定葛根芩连片中葛根素的含量。

本方法适用于葛根芩连片中葛根素的含量测定。

方法原理： 供试品用甲醇回流提取后，过滤，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长250nm处检测葛根素的吸收值，计算出其含量。

试剂：

 1.甲醇

2.二次重蒸水

仪器设备：

 1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇＋水（23：77）。

2.2 检测波长：250nm

2.3 温度：35℃。

试样制备： 1. 对照品溶液的制备

精密称取葛根素对照品10mg，置10m1棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL，置于50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备甲醇

取葛根芩连片20片，精密称定，求得平均片重。研细。精密称取葛根芩连片细粉适量(约相当于葛根0.lg)，置150m1三角烧瓶中，精密加入甲醇100m1，精密称定。水浴加热回流提取1h，放冷至室温，精密称量下准确补加损失的甲醇，摇匀。取少量用0.45mm滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤： 分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长250nm处测定葛根素的吸收值，计算出其含量。