吡哌酸作用于DNA旋转酶吡哌酸与其他喹诺酮类一样，主要作用于细菌细胞的DNA旋转酶(gyrase)，干扰细菌DNA的合成而引起细菌死亡。

动力学吡哌酸口服后迅速而较完整地被吸收，单次空腹口服1g和2g，服药后2小时血药浓度达峰值，分别为5、4和10、3μg/ml，服药后6~8小时分别下降为2、3和4μg/ml。进食后服药lg，达峰时间为2小时，血药峰浓度4～5μg/ml。

该品的蛋白结合率为30 %，T1/2约为5~6小时。吸收后广泛分布于体内各组织和体液中，除脑及脑脊液外，吡哌酸在肾、肝、胆汁和尿液中的浓度远超过同期血药浓度。仅少量该品经胎盘进入胎儿循环中。吡哌酸在体内几乎不被代谢，70%于24小时内以原形自尿中排出，进食后服药1g，24小时内尿中仅排出40%，约20%随粪便排出。