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亚叶酸钙主要有以下三种生产方法。
（1）以叶酸为原料，以氧化铂催化氢化后直接用无水甲酸甲酰化法。
（2）以叶酸为原料，用保险粉与硼氢化钠二次还原后直接酰化。
（3）用硼氢化钾/硼氢化钠将叶酸还原后，酰化，成盐后制备。
方法（1）氧化铂昂贵且危险，成本高；方法（2）因需二不还原较费时间；方法（3）用硼氢化钠代替硼氢化钾收率提高，且成本更便宜。
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