毒理试验

1、最大耐受量测定试验

用法用量：每只小鼠按0.4ml/10g灌服25%浓度护肝片，一日内连续灌服3次，每隔4小时1次。

结 果：小鼠一日内连续3次灌服护肝片，最大耐受量为30g/kg提取物，约相当于临床或成人用量的357倍（成人每次服4片，一日3次，全天总用量为12片，即0.35g×12片=4.2g/成人）。

结 论：经小鼠最大耐受量测定证明，认为护肝片临床口服用药较安全。

2、长期毒性试验

用法用量：护肝片高剂量组-大鼠按5g/kg灌服护肝片（内含提取物3.57克）；护肝片低剂量组-大鼠按2g/kg灌服护肝片（内含提取物1.43克）。

结 果：

1）对一般情况的影响：试验结果表明，按上述剂量给药，连续60天，大鼠在给药期间，体重、行为活动、饮食均为正常，毛具有光泽，无稀便等。

2）对红细胞、血红蛋白的影响：按上述剂量给大鼠连续灌服60天，对雌雄大鼠的红细胞计数及血红蛋白均无明显的影响。

3）对白细胞、淋巴细胞及嗜中性粒细胞的影响：结果证明，按上述剂量给大鼠连续灌服60天，对雌雄大鼠的白细胞计数、淋巴细胞、嗜中性粒细胞均无明显的影响。

4）对肝、肾功能的影响：血清谷丙转氨酶的测定采用比色法，血清尿素氮的测定采用二乙酰一肟有显色法，结果经统计学处理证明，各给药组对大鼠血清谷丙转氨酶均有明显的降低作用（P<0.05），但各组的值均在大鼠的正常值范围之内，各给药组对大鼠尿素氮均无明显影响。

5）对血清总蛋白、白蛋白的影响：血清总蛋白的测定采用双缩脲法，血清白蛋白测定采用溴甲酚绿法，结果证明，按上述剂量给大鼠连续灌服60天，对雌雄大鼠的血清总蛋白、白蛋白均无明显影响。

6）对重要器官系数的影响：将各组大鼠处死后，分别称心、肝、脾、肺、肾及睾丸的重量，并求出每只大鼠的重要器官系数，最后经统计学处理，结果证明，护肝片按上述剂量给大鼠连续灌服60天，对雌雄大鼠的重要器官系数均无明显影响。

7）对重要脏器的病理检查：将上述各组大鼠取血后，处死，分别取出各重要脏器，取材，进行常规固定、切片、HE染色，在显微镜下观察心、肝、脾、肺、肾、睾丸及卵巢组织是否有病理改变，结果如下：

心脏：心肌细胞、心内膜、心肌内结缔组织和毛细血管均无异常改变。

肝脏：肝细胞、肝小叶及小叶间结构无异常改变。

脾脏：红髓、白髓内细胞和组织结构均无异常改变。

肺脏：各级支气管组织和上皮组织均未见异常，肺泡、肺泡囊、肺泡壁亦未见形态学改变。

肾脏：肾小球、肾小管及各种小管上皮均未见异常改变。

睾丸：细精管内各级精母细胞可见，成熟精子细胞及精子大量存在。

卵巢：组织结构和各种卵泡未见异常改变。

上述结果证明，护肝片连续给大鼠口服，对重要脏器无明显的病理改变。

结 论：

上述长期毒性实验结果表明，护肝片按5g/kg（内含提取物3.57克），2g/kg（内含提取物1.43克）给大鼠连续灌服60天，对大鼠体重、红细胞、血红蛋白、白细胞、白细胞分类均无明显影响；对血清谷丙转氨酶、尿素氮、总蛋白、白蛋白、重要器官系数均无明显改变；对重要脏器心、肝、脾、肺、肾、睾丸、卵巢经镜下观察无病理改变。根据上述实验结果，认为该药口服用药无明显的毒性反应。