方法名称： 镇脑宁胶囊－葛根素的测定－高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定镇脑宁胶囊中葛根素的含量。

本方法适用于中成药镇脑宁胶囊。

方法原理： 本品经石油醚加热回流后，加30%乙醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长250nm处检测葛根素的吸收值，计算出其含量。

试剂： 1. 30%乙醇

2. 甲醇

3. 石油醚

仪器设备： 1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按葛根素峰计算应不低于4000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 水=25 75

2.2检测波长：250nm

2.3柱温：室温

试样制备： 1. 称取供试品

取装量差异项下的本品内容物，混匀，取约1g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取葛根素对照品适量，加30%乙醇制成每1mL含15mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取装量差异项下的本品内容物，混匀，取约1g，精密称定，加硅藻土1g，研匀，置索氏提取器中，加石油醚（60~90℃）适量，加热回流提取4小时，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，连同滤纸筒一并置具塞锥形瓶中，精密加入30%乙醇50mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率50kHz）40分钟，放冷，再称定重量，用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

操作步骤： 分别精密吸取对照品溶液5mL和供试品溶液10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长250nm处测定葛根素（C21H20O9）的峰面积，计算出其含量。

参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p654。