1.对离体小肠运动的影响 四神丸及其拆方二神丸、五味子散，以及单味药五味子、吴茱萸，对家兔离体肠管的自发活动有明显抑制作用，并能对抗乙酰胆硷和氯化钡引起的肠痉挛。四神丸与肾上腺素抑制肠管作用的比较表明，本方的抑制作用并非通过α受体而起作用。

2.对小鼠小肠推进运动、药物性腹泻小鼠腹泻次数的影响 采用小鼠止泻试验和炭末推进法.结果四神丸能降低大黄、蓖麻油引起的腹泻小鼠的腹泻次数,并能抑制正常小鼠和拮抗溴吡斯的明小鼠的炭末推进率.结论显示四神丸具有良好的涩肠止泻作用,其可能是通过抗胆碱作用和直接作用于胃肠道平滑肌而起作用.