照高效液相色谱法（中国药典2000年版二部附录Ⅴ D）测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.025mol/L磷酸溶液（用20%氢氧化钠调节pH值至3.0±0.05）-乙腈（88：12）为流动相，检测波长235nm，理论板数按头孢氨苄峰计算应不低于3000。头孢氨苄峰与甲氧苄啶峰的分离度应不大于3.5。

测定法取装量差异下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于甲氧苄啶100mg）置200ml量瓶中，加0.1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20μll注入液相色谱仪，记录色谱图，另取头孢氨苄对照品与甲氧苄啶对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积分别计算供试品中C16H17N3O4S和C14H18N4O3的含量。