照高效液相色谱法，（中国药典2000年版二部附录Ⅴ D）测定。

色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：0.05mlo/L硼砂溶液（用磷酸溶液调节pH值至6.0）-甲醇-乙腈（75：15：10）为流动相；柱温30℃；检测波长为214nm；理论板数按林可霉素峰计算应不低于1500.

测定法 精密称取本品适量（约相当于林可霉素20mg），置烧杯中，加入上述0.05mlo/L硼砂溶液适量，用玻棒充分搅拌使分散均匀并溶解后，转移至100ml量瓶中，加0.05mol/L硼砂溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，另取林可霉素对照品适量，用0.05mol/L硼砂溶液制成每1ml中含林可霉素0.2mg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。